郭晓冲 作品数:23 被引量:60 H指数:5 供职机构: 中国医科大学法医学院法医病理学教研室 更多>> 发文基金: 辽宁省科学技术计划项目 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 生物学 农业科学 更多>>
基质金属蛋白酶3研究进展及其法医学意义 被引量:12 2008年 基质金属蛋白酶3是基质金属蛋白酶家族的重要成员,能够降解多种细胞外基质成分,参与组织形态发生、损伤修复、炎症反应等一系列生理、病理过程,并在风湿性关节炎、动脉粥样硬化、乳腺癌等疾病和肿瘤的发生及进展中发挥重要作用。新近的研究表明基质金属蛋白酶3可能是凋亡神经元与小胶质细胞间一种重要的信号传导分子,它通过激活小胶质细胞加剧阿耳茨海默病、帕金森病中神经元变性。此外基质金属蛋白酶3基因启动子区域5A/6A多态性与心肌梗死的发生风险相关,且血浆中基质金属蛋白酶3的浓度在心肌梗死前后存在差异,有望成为法医学鉴定中诊断心肌梗死的辅助指标。脑损伤后基质金属蛋白酶3的表达发生改变,提示其在神经组织修复、突触发生过程中具有重要作用,阐明脑损伤后基质金属蛋白酶3表达变化规律,可能提供一种推断脑损伤时间的新指标。 郭晓冲 李如波 梁红霞 王福远 熊昌艳关键词:法医病理学 基质金属蛋白酶3 心肌梗死 脑损伤 猝死 大鼠钝力性脑挫伤后PSD-95的表达 被引量:7 2010年 目的检测脑挫伤修复过程中突触后致密蛋白(postsynaptic density protein 95,PSD-95)的表达,探讨其变化规律与损伤时间的相关性。方法雄性SD大鼠50只,随机分为8个实验组,1个对照组,每组5只。制作大鼠脑挫伤模型,于伤后3、6、12h和3、5、7、10d取脑组织,应用免疫组织化学技术和免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测脑挫伤后不同时间脑组织中PSD-95的表达变化。结果对照组脑组织仅有少量PSD-95阳性细胞;实验组中,伤后3h、6h组脑组织出现较多PSD-95阳性细胞,12h组阳性细胞数量持续升高,伤后1d阳性细胞数下降,5d后又升高并达到高峰,7d、10d恢复;计算阳性率,统计分析结果显示,阳性细胞数与相邻上组比较,存在显著性差异。Western blot结果:挫伤后,3~12h表达量上升,1d下降,随后又逐步上升,5d达到高峰,7d、10d下降;应用Fluorchem V2.0 Stand Alone软件获取感光条带的平均灰度值,经统计分析,各组与相邻上组比较,存在显著性差异。结论大鼠脑损伤后损伤周边区PSD-95呈现升高→下降→再升高→再下降的表达规律,对损伤时间推断有一定的参考意义。 梁红霞 李如波 王福远 郭晓冲 郭英利关键词:法医病理学 免疫组织化学 免疫蛋白印迹 PSD-95 脑挫伤 大鼠脑挫伤后基质金属蛋白酶3表达变化的研究 前言:
脑挫伤是法医学工作中常见的损伤类型,推断脑挫伤时间对刑事案件的侦查及审判具有重要意义,然而准确推断脑挫伤时间一直是法医学中的难题,至今尚未圆满解决。基质金属蛋白酶3(MMP-3)是基质金属蛋白酶家族的重... 郭晓冲关键词:金属蛋白酶 脑挫伤 法医学 病理过程 文献传递 5-脂氧化酶转基因小鼠表型初步研究 2015年 目的建立5-脂氧化酶(5-LO)高表达转基因小鼠模型,为动脉粥样硬化(AS)发病分子机制的研究提供有应用价值的动物模型。方法对5-LO转基因及正常对照小鼠分别选用RT—PCR、免疫组织化学、血脂、血压监测等方法进行分析实验。结果5-LO及大鼠5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)免疫组织化学实验结果显示,在肾和肺中5-LO及FLAP的表达,转基因小鼠高于正常对照组小鼠:RT—PCR实验结果显示,转基因小鼠与正常对照小鼠比较在骨髓细胞、腹腔细胞、脾脏、肾脏中白三烯介质及其受体均有不同程度的高表达。其中,两种小鼠的腹腔细胞和骨髓细胞中白三烯A4(LTA4)、白三烯B4(LTB4)和半胱酰胺-白三烯受体2(Cys—LTR2)的表达存在差异(P〈0.05),脾和肾脏中LTB4、白三烯C4(LTC4)及Cys—LTR2的表达存在差异(P〈0.05),肾脏中半胱酰胺-白三烯受体1(Cys-LTR1)的表达存在差异(P〈0.05)。C反应蛋白(CRP)、白介素-1β(IL-1β)、血小板衍生因子(PDGF)、坏死因子-κB(NF-κB)等细胞因子检测结果显示,在肾组织中转基因小鼠的各项指标显著高于正常对照小鼠(P〈0.05);血压测定结果显示,转基因小鼠高于正常对照小鼠(P〈0.05);血脂检测结果显示,两种小鼠未见明显差异(P〉0.05)。结论成功建立5-LO高表达转基因小鼠模型。 张梅英 杨葳 吴红联 董婉维 周生来 于洋 王惟 郭晓冲 郑志红关键词:转基因小鼠 eNOS基因敲除大鼠模型的建立及表型初步研究 2015年 目的建立内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因敲除大鼠模型。方法利用锌指核酸酶(ZFN)技术,通过显微注射的方法将编码eNOS特异性锌指酶的mRNA注入SD大鼠受精卵并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR产物测序的方法鉴定基因型。对敲除大鼠进行外观观察,HE染色分析组织结构形态。通过Westernblot分析敲除大鼠模型的心脏和肾脏组织中eNOS的表达情况。测量8~16周大鼠体质量,分析eNOS基因敲除对体质量的影响。采用尾套法测量大鼠心率、血压、收缩压和舒张压,比较与野生型大鼠的差异。结果通过显微注射方法共注射441枚受精卵,存活365枚,分别移入12只SD大鼠输卵管,共产出23只F0代大鼠。PCR产物测序分析获得4只阳性原代大鼠,对8号大鼠筛选获得纯合子。阳性纯合子大鼠表现为肢体缺损,HE染色显示动脉血管结构形态异常。Westernblot结果显示,eNOS敲除大鼠的心脏和肾脏组织中不表达eNOS蛋白。敲除大鼠的体质量明显低于野生型大鼠,体质量增长幅度慢。血压、收缩压、舒张压均高于野生型SD大鼠,有极显著差异(P〈0.01)。eNOS敲除雌鼠心率低于野生型SD雌鼠(P〈0.05)。eNOS敲除雄鼠心率与野生型SD雄鼠相比无统计学差异。结论成功建立eNOS基因敲除大鼠模型,该模型或可成为高血压疾病研究的理想动物模型。 杨葳 周生来 董婉维 王惟 于洋 郭晓冲 张婀娜 王宏宇 郑志红关键词:基因敲除 高血压 金黄仓鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织器官中的差异表达 2015年 目的构建金黄仑鼠载脂蛋白A5(Apoa5)基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析,为深入研究Apoa5基因在金黄仓鼠不同组织中功能奠定基础。方法提取金黄仓鼠肝脏组织总RNA,采用RT—PCR方法对金黄仓鼠Apoa5基因的cDNA进行克隆,构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞,分别采用RT—PCR和Westernblot方法检测mRNA及蛋白质表达水平。采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5mRNA在8个组织中的表达量。结果经PCR检测鉴定,Apoa5基因表达载体构建成功,经测序分析金黄仓鼠Apoa5基因cDNA全长1243bp,编码366个氨基酸,与人、大鼠、小鼠等物种比对,核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性,金黄仓鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75%、84%、84%。转染293T细胞48h后,RT—PCR和Westernblot结果表明,Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达。荧光定量PCR结果显示,Apoa5mRNA在肝脏表达量最高,在脑和睾丸中中度表达,在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达。结论成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异,为制备Apoa5转基因金黄仓鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄仓鼠脂类代谢中的功能奠定基础。 董婉维 张婀娜 郭晓冲 魏政立 杨葳 周生来 赵文 郑志红关键词:金黄仓鼠 基因表达 应用Dicer1转基因小鼠建立黑色素瘤模型的研究 2015年 目的应用D妇r1(编码蛋白属于RNA酶Ⅲ家族)转基因小鼠建立黑色素瘤模型。方法将小鼠黑色素瘤细胞株分别移植于Dicer1转基因鼠和C57BL/6J小鼠前肢腋下,观察两种小鼠的荷瘤情况,包括移植瘤生长情况、移植瘤生长曲线。结果与C57BL/6J小鼠组肿瘤比较,Dicer1转基因小鼠组的肿瘤成瘤时间短、肿瘤生长速度快、肿瘤体A(P〈0.05)。结论应用Dicer1转基因小鼠建立了黑色素瘤模型,结果显示Dicer1基因对黑色素瘤荷瘤有明显影响。 李兆阳 姜川 郭晓冲 杨葳 董婉维 郑志红关键词:转基因小鼠 黑色素瘤 大鼠局灶性脑挫伤后Homer蛋白表达变化 被引量:6 2011年 目的观察局灶性脑挫伤后Homer蛋白表达的变化规律,探讨其表达变化与损伤时间的相关性。方法建立大鼠钝力性局灶性脑挫伤模型,应用免疫组织化学技术和Western印迹法观察脑损伤后不同时间脑组织中Homer蛋白表达的变化。结果对照组、假手术组及伤后0.5h组脑组织中有少量Homer蛋白染色阳性细胞,伤后3 h组脑组织Homer蛋白染色阳性细胞增多,伤后12 h组阳性细胞数达到高峰,伤后1 d起阳性细胞数持续下降,至伤后7 d降到基础水平。Homer蛋白染色及Western印迹法显示,Homer蛋白表达量在相邻组间差异均具有统计学意义。结论大鼠钝力性局灶性脑挫伤后损伤周边区Homer蛋白表达变化与脑挫伤时间具有相关性。 王福远 李如波 梁红霞 沈宇 郭晓冲 王正印关键词:法医病理学 脑损伤 免疫组织化学 JNK信号转导通路及其在组织损伤中的作用 被引量:5 2008年 丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是广泛表达的丝氨酸/酪氨酸激酶,在哺乳动物细胞多种信号转导通路中起重要作用。MAPK有4个主要亚族:ERK、JNK、p38MAPK和ERK5。JNK信号转导通路是MAPK通路的一重要分支,它在细胞周期、生产、凋亡和细胞应激等多种生理和病理过程中起重要作用。本文就JNK的分型、分布、信号通路的组成及其在组织损伤中的作用进行综述,旨在为组织损伤程度和伤后时间推断的法医病理学研究提供参考资料。 熊昌艳 赵锐 官大威 郑吉龙 樊少群 王昌亮 郭晓冲 杨玫关键词:法医病理学 信号转导通路 肿瘤研究常用动物小鼠病原菌16s rDNA检测方法的建立 2015年 目的:建立肿瘤研究常用动物小鼠病原菌快速检测方法。方法:提取经常规方法已被鉴定的小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌DNA,利用PCR技术扩增病原菌16s rDNA全长,经纯化后直接测序。利用BLAST软件从Gen Bank数据库中搜索相关菌株的序列进行序列比对和同源性分析,确定病原菌的种属。结果:测序结果与数据库中搜索到的相关菌株的序列进行序列比对显示,3种病原菌测序序列分别与绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌序列一致。结论:16s rDNA PCR方法可准确地检测肿瘤研究常用动物小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌感染,并且缩短了检测时间。 时伟红 魏政立 郭晓冲 刘佳 吴腾飞 郑志红关键词:小鼠 病原菌 RDNA 多聚酶链反应