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朱海娟: 作品数：15 被引量：41H指数：4; 供职机构：安徽医科大学第二附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金安徽省科技厅年度重点项目安徽高校省级自然科学研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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MicroRNA-133b-5p通过靶向调控Fas基因影响H9c2心肌细胞凋亡被引量：6: 2016年; 目的研究microRNA(miR)-133b-5p在H9c2心肌细胞凋亡中发挥的作用及其靶向调控Fas基因的机制。方法取对数生长期大鼠H9c2胚胎心肌细胞,分为空白对照组、miR-133b-5p抑制剂组、抑制剂阴性对照组。分别转染48 h后收集细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-133b-5p表达,微板法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,Annexin V-FITC联合PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告基因系统验证miR-133b-5p与Fas mRNA的3'UTR区的靶向结合。最后运用qRT-PCR和Westernblot分别检测各组Fas mRNA与Fas蛋白表达水平。结果miR-133b-5p抑制剂组细胞内miR-133b-5p表达水平下调至空白对照组的33%(P<0.05);LDH活性升高,细胞凋亡率增加,均明显高于空白对照组与抑制剂阴性对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因证明Fas是miR-133b-5p的一个靶基因;miR-133b-5p inhibitor显著上调Fas mRNA和Fas蛋白水平(P<0.05)。结论利用化学合成miR-133b-5p inhibitor抑制大鼠H9c2心肌细胞中miR-133b-5p表达,可诱导心肌细胞损伤和凋亡,其机制可能与调控靶基因Fas表达有关。; 程洁何淑芳韩正怡朱海娟张野; 关键词：心肌细胞微小RNAS 凋亡 FAS

瑞芬太尼预处理对心力衰竭大鼠心肌的保护作用被引量：10: 2012年; 目的探讨瑞芬太尼预处理对阿霉素心衰大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤的作用。方法 60只成年♂SD大鼠(250±20)g,尾静脉注射阿霉素2μg·g-1,每周1次,共6周,制成阿霉素心衰大鼠模型。随机将阿霉素心衰大鼠分为6组:对照组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)、10μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 1组)、30μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 2组)、60μg·L-1瑞芬太尼预处理组(RPC 3组)。采用Langendorff离体大鼠心肌灌注模型。除Sham组为持续灌注165 min外,所有心脏予以30 min缺血,90 min再灌注。IPC组在缺血前结扎左冠状动脉5 min,松开5 min,共3个循环。RPC组在缺血前给予含浓度分别为10、30、60μg·L-1的瑞芬太尼的K-H液灌注5 min后改用不含瑞芬太尼的K-H液灌注5 min,共3个循环。记录各组心脏在平衡末、再灌5 min、再灌30 min、再灌90 min时的心率(HR)、左室发展压(LVDP)和左室压力升高或降低最大速率(±dp/dtmax)、冠脉流量(CF)并测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。再灌末TTC法计算心肌缺血梗死区(IS/AAR)。Western blot半定量检测p-Akt和总Akt的含量。结果平衡灌注末各组间心功能指标(基础值)差异未见统计学意义(P>0.05)。再灌5、30、90 min时,RPC 2组和RPC 3组的LVDP、±dp/dtmax、CF较I/R组高,LDH值较I/R组低(P<0.05)。灌注结束后,见RPC 2组、RPC 3组的IS/AAR较I/R小,p-Akt表达水平升高(P<0.05),而IPC组和RPC 1组的各项指标较I/R组无差异。结论 RPC在一定程度上减轻阿霉素心衰大鼠心肌缺血/再灌注损伤,而缺血预处理对阿霉素心衰大鼠心肌缺血/再灌注损伤无明显保护作用。; 王斌张野朱海娟黄春霞谢春林吴运香胡宪文陈志武; 关键词：瑞芬太尼阿霉素心肌保护 PI3K-AKT信号通路

缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析被引量：4: 2015年; 目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对照组(CON)和缺氧预处理组(HPC),CON组细胞正常培养,HPC组细胞经历10 min缺氧和30 min再给氧,提取心肌细胞总RNA,行miRNA芯片筛选,qRT-PCR验证芯片结果。利用软件预测差异表达miRNA调控的靶基因,分析靶基因富集的基因功能(gene ontology,GO)和信号通路(pathway)。结果与CON组相比,HPC可诱导大鼠心肌细胞miRNA表达谱发生明显改变,共有12个miRNA上调,14个miRNA下调(P<0.01,FDR<0.05);选择其中荧光信号值>500的7个miRNA,用于生物信息学分析。qRT-PCR检测miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216水平,变化趋势与芯片结果一致。生物信息学分析显示差异表达miRNA所调控的靶基因功能明显富集于27个GO和6条信号通路。结论 HPC可诱导成年大鼠心肌细胞miRNA表达谱明显改变,这些差异表达miRNA可能通过调控靶基因参与HPC介导的心肌细胞保护作用。; 何淑芳朱海娟程洁许士进杨婉张野; 关键词：心肌细胞成年大鼠缺氧预处理 MICRORNA

PI3K和ERK信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用: 2014年; 目的评价1-磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法雄性成年SD大鼠,体重200～230 g,尾静脉注射盐酸多柔比星2 mg/kg,1次/周,连续6周,制备大鼠慢性心力衰竭模型.第8周末将成功制备慢性心力衰竭模型的大鼠42只,采用随机数字表法分为7组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、吗啡预处理组（MP组）、ERK抑制剂PD98059＋吗啡预处理组（PD＋ MP组）、PI3K抑制剂渥曼青霉素＋吗啡预处理组（WT＋ MP组）、PD98059组（PD组）和渥曼青霉素组（WT组）.采用Langendorff离体心脏灌注及结扎左冠状动脉前降支（LAD）法制备大鼠缺血再灌注损伤模型,缺血30min,再灌注120 min.S组只缝线,不结扎LAD,持续灌注K-H液195 min.I/R组先灌注K-H液45 min,再制备大鼠缺血再灌注损伤模型.MP组先灌注K-H液15 min,再灌注含1μmol/L吗啡的K-H液进行预处理,灌注5 min,再次灌注K-H液5min,共3个循环,然后制备心脏缺血再灌注损伤模型.PD＋ MP组和WT＋ MP组于吗啡预处理前10 min,分别用含ERK抑制剂PD98059（10 μmol/L）和PI3K抑制剂渥曼青霉素（100 nmol/L）的K-H液进行灌注,持续至缺血5 min.PD组和WT组于缺血前40 min持续至缺血5 min分别灌注含PD98059和渥曼青霉素的K-H液.各组分别于心脏稳定灌注15 min、再灌注5和10 min时,收集冠脉流出液,采用化学比色法检测LDH活性.再灌注120 rin时,取下大鼠心脏,测量缺血危险区体积（AAR）、梗死区体积（IS）及IS/AAR比值.结果与S组比较,I/R组再灌注5和10min时LDH活性升高,IS和IS/AAR均增加（P＜0.05）,AAR差异无统计学意义（P＞0.05）;与I/R组比较,MP组再灌注5min时LDH活性降低,IS和IS/AAR减小（P＜0.05）,AAR差异无统计学意义,WT组和PD组LDH活性、IS、AAR和IS/AAR差异无统计学意义（P＞0.05）;与MP组比较,PD＋; 金世云何淑芳吴昊朱海娟许士进张书杰张野; 关键词：1-磷脂酰肌醇3-激酶细胞外信号调节MAP激酶类吗啡心力衰竭

吗啡预处理对心力衰竭大鼠离体心肌细胞缺氧复氧时miRNA表达的影响被引量：4: 2013年; 目的评价吗啡预处理对心力衰竭大鼠离体心肌细胞缺氧复氧时miRNA表达的影响.方法清洁级健康成年雄性SD大鼠,体重200～ 220 g,制备大鼠心力衰竭模型并分离心室肌细胞接种于24孔板或60mm培养皿,采用随机数字表法分为3组（n=16）：对照组（C组）、缺氧复氧组（H/R组）和吗啡预处理组（MP组）.C组正常培养,H/R组和MP组细胞通入5％CO2-95％N2缺氧90 min后用含10％新生牛血清的高糖DMEM培养120 min.M组细胞缺氧前即刻采用吗啡培养液（吗啡终浓度为0.3μmol/L）培养10 min,再换为无吗啡培养液培养30 min进行预处理.于复氧120m in时各组随机取8孔细胞,采用台盼蓝染色法检测细胞活力和乳酸脱氢酶（LDH）活性.各组余8孔细胞提取总RNA行miRNA芯片检测,筛选各组差异表达的miRNA.结果与C组比较,H/R组和MP组心肌细胞活力降低,LDH活性升高,miR-6216和let-7e-5p上调,miR-133b-5p下调（P＜0.05）;与H/R组比较,MP组心肌细胞活力升高,LDH活性降低,miR-133b-5p上调,miR-6216和let-7e-5p下调（P＜0.05）.结论吗啡预处理通过调控miR-133b-5 P、miR-6216和let-7e-5p等miRNA表达减轻心力衰竭大鼠离体心肌细胞缺氧复氧损伤.; 朱海娟何淑芳吴昊金世云张书杰缪琳张野; 关键词：吗啡缺血预处理缺氧

MAPK通路在瑞芬太尼预处理减轻心衰大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的作用被引量：7: 2014年; 目的探讨MAPK信号通路在瑞芬太尼预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的作用。方法成年♂SD大鼠,尾静脉注射阿霉素,制备慢性心力衰竭模型,通过随机数字表将54只模型大鼠分为9组(n=6):假手术组(sham)、缺血/再灌注组(IR)、瑞芬太尼预处理组(RPC)、ERK抑制剂PD98059+RPC组(RPD)、p38抑制剂SB203580+RPC组(RSB)、JNK抑制剂SP600125+RPC组(RSP)以及抑制剂对照组(PD、SB和SP)。化学比色法检测再灌注5min和10 min时冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,再灌注末行TTC染色并计算心肌梗死面积,通过Power Lab系统记录血流动力学。结果与IR组相比,RPC可以明显降低梗死面积与缺血危险区的比值(IS/AAR),同时,也可以降低再灌注5 min及10 min LDH活性;而JNK抑制剂SP600125几乎完全取消RPC的保护作用,明显增加IS/AAR,并升高再灌注5 min LDH活性;ERK抑制剂PD98059也可部分阻断RPC的保护作用;而p38抑制剂SB203580对RPC的保护作用则无明显影响。血流动力学结果显示,与IR相比,RPC及加入MAPK抑制剂后对离体心脏缺血/再灌注损伤后心功能影响差异无统计学意义。结论 JNK和ERK信号通路可能在瑞芬太尼预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中发挥重要作用。; 金世云何淑芳吴昊朱海娟张书杰张野; 关键词：瑞芬太尼丝裂原活化蛋白激酶阿霉素

阿片受体、PI3K/Akt和ERK信号通路在瑞芬太尼预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用被引量：12: 2013年; 目的评价阿片受体、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）和细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在瑞芬太尼预处理（RPC）减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤中的作用.方法健康成年雄性SD大鼠,处死后取心室肌组织,原代培养心肌细胞,调整细胞浓度为2×104个/ml后接种于24孔细胞培养板（500 μl/孔）中,采用随机数字表法,将其中108个培养孔分为12组（n=9）：正常对照组（C组）；H/R损伤组（H/R组）采用缺氧90 min/复氧120 min的方法制备心肌细胞H/R损伤模型；缺氧预处理组（HPC组）在H/R前,培养孔经缺氧10 min/复氧30 min；瑞芬太尼预处理组（RPC组）在H/R前,以终浓度1μmol/L瑞芬太尼孵育心肌细胞10 min,再常规培养30 min;δ受体拮抗剂纳曲吲哚＋ RPC组（NTD＋ RPC组）、κ受体拮抗剂nor-binahorphimine（nor-BNI）＋ RPC组（BNI＋RPC组）、PI3K/Akt信号通路阻断剂渥曼青霉素＋RPC组（W＋ RPC组）、ERK信号通路阻断剂PD98059＋ RPC组（PD＋ RPC组）在RPC前10 min分别维持培养孔终浓度5μmol/L纳曲吲哚和nor-BNI、0.1μmol/L渥曼青霉素和30 μmol/L PD98059,然后与瑞芬太尼共孵育10 min,再常规培养30 min,随后行H/R；试剂对照组分别为NTD组、BNI组、W组和PD组.于复氧结束时,测定心肌细胞活力、细胞凋亡率和培养液乳酸脱氢酶（LDH）活性.结果与C组比较,H/R组心肌细胞活力降低,细胞凋亡率和培养液LDH活性升高（P＜0.05）；与H/R组比较,HPC组、RPC组和BNI＋ RPC组心肌细胞活力升高,细胞凋亡率和培养液LDH活性降低（P＜0.05）,NTD＋ RPC组、W＋ RPC组、PD＋ RPC组、NTD组、BNI组、W组和PD组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）；与RPC组比较,NTD＋ RPC组、BNI＋ RPC组、W＋ RPC组和PD＋ RPC组心肌细胞活力降低,细胞凋亡率和培养液LDH活性升高（P＜0.05）.结论瑞芬太尼预处理可能通过激活δ受体,进而激活P; 吴昊何淑芳朱海娟金世云胡军张野; 关键词：1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶细胞外信号调节MAP激酶类细胞低氧

缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析: 目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对...; 何淑芳朱海娟程洁许士进杨婉张野; 关键词：心肌细胞成年大鼠缺氧预处理 MICRORNA; 文献传递

微小RNA-133b-5p对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤和凋亡的影响: 目的评价微小RNA-133b-5p(miR-133b-5p)对H9C2大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤和凋亡的影响。方法大鼠H9C2胚胎心肌细胞在含10%胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代。细胞接种于6孔细胞培养板,采用...; 韩正怡何淑芳朱海娟程洁许士进张野; 关键词：微小RNA 心肌细胞缺氧复氧凋亡; 文献传递

微小RNA-133b-5p对大鼠H9c2心肌细胞损伤和凋亡的影响: 目的 miRNA是一种非编码的小分子RNA,在心肌细胞损伤和凋亡过程中发挥着重要的作用,各种miRNAs对心肌细胞损伤和凋亡的作用及机制仍需进一步阐明。本研究探讨了miR-133b-5p对H9c2心肌细胞损伤和凋亡的影响...; 程洁何淑芳韩正怡朱海娟张野; 关键词：微小RNA FAS; 文献传递

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