肖驰
- 作品数:41 被引量:131H指数:7
- 供职机构:四川农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 鸡新城疫、鸡传染性支气管炎基因芯片的构建及其检测技术研究
- 鸡新城疫(Newcasttle Disease,ND)和鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是鸡的主要呼吸道传染病,严重危害养鸡业的发展.基因芯片技术是近年来发展起来的一种生物新技术,该技...
- 曹三杰文心田肖驰张焕容杨利
- 关键词:鸡新城疫鸡传染性支气管炎基因芯片疫病检测基因检测病原检测
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)诊断DNA微阵列的构建被引量:4
- 2007年
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)诊断DNA微阵列,应用RT—PCR从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)C14—2分离株和欧洲型弱毒疫苗株VP046扩增并克隆获得戋洲型重组质粒C14P9(基因号:AY775132)、PRRS—PS9(基因号:AY775134)、Ulb(基因号:AY775135)、Y11(基因号:AY775133)、Y12(基因号:AY775136)和欧洲型基因重组质粒E6和E8。PCR法制备的靶基因和探针纯化后,质量浓度分别为300~600mg/L和200-400mg/L。芯片杂交动力学研究表明,杂堑信号强度随靶基因和探针浓度的增加而增强,最佳靶基因质量浓度为200mg/L,探针适宜范围为3~3000μg/L,系统灵敏性为3μg/L。靶基因杂交特异性研究表明,除个别靶基因在某一温度下存在交叉反应和杂交信号弱外,大多数靶基因在40~56℃下杂交信号强。采用AY775133、AY775134、E6和E8靶基因构建PRRS诊断DNA微阵列在40℃下预杂交1h、48℃湿盒避光杂交6h后经洗涤和扫读分析,杂交信号强、斑点明显、特异性高,按SNR≥1.5为标准能够区分PRRSV蔓洲型和欧洲型。应用PRRS诊断DNA微阵列检测了AMERVAC-PRRS、PRRSV弱毒疫苗、C14—2株、SCU株和临床样本,能正确区分PRRSV基因型。研究结果表明构建的PRRS诊断DNA微阵列可用于PRRS临床诊断和基因分型。
- 肖驰曹三杰文心田
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒DNA微阵列克隆
- 应用基因芯片技术检测禽重要疫病的研究——Ⅰ.4种禽病检测基因芯片靶基因的克隆及鉴定被引量:5
- 2006年
- 对NDV、IBV、AIV和IBDV等病原进行了分子生物学特征分析,以RT-PCR分别扩增制备NDV、IBV、IBDV和AIV的靶基因,分别命名为ND1、ND2、ND3、ND4、ND5、IB1、IB2、IB3、IB4、AI1、AI2和IBD1。并分别对制备的靶基因进行了克隆和鉴定分析,经BamHⅠ酶切、PCR和核酸序列测定鉴定分析表明,除T/WZ重组质粒外,T/ND1(F48E9),T/ND2(LaSota),T/ND3(LaSota),T/ND4(F48E9),T/ND5(LaSota),T/ND5(F48E9),T/IB1(SM),T/IB1(M41),T/IB2(SM),T/IB3(M41),T/WZ,T/AI1,T/AI2,T/IBD1等14个重组质粒,均是其病原的特异性基因。该批靶基因的成功克隆和鉴定为禽疫病检测基因芯片的构建和制备提供了确实可靠的靶基因材料,是禽类疫病基因检测芯片构建和制备的关键技术之一。
- 曹三杰文心田肖驰张焕容杨利
- 关键词:基因芯片靶基因克隆
- PRRS诊断基因微阵列靶标的设计与评价
- 本研究目的是克隆PRRS诊断型DNA微阵列技术的靶标。试验应用ArrayDesigner2.0软件设计PRRSV诊断基因微阵列靶标引物,用一步法RT-PCR从分离毒株C14-2和疫苗株VP046 BIS扩增获得靶标并用p...
- 肖驰曹三杰文心田
- 关键词:PRRSRT-PCR克隆微阵列
- 文献传递
- PRRS-CSF-PCV2诊断DNA芯片构建研究
- 本研究研制了CSF-PRRS-PCV2诊断DNA芯片。该芯片能同时检测PRRS、CSF和PCV2感染,并能区分PRRSV欧洲型和美洲型毒株,芯片检测阳性判读标准为SNP≥1.5(信号总强度模式量化)或信号强度>1000(...
- 肖驰曾三杰文心田张焕容
- 关键词:猪圆环病毒2型DNA芯片
- 应用Dot-PPA-ELISA检测猪链球菌病抗体的研究
- 随着我国集约化养猪业的不断发展,猪链球菌病已成为危害养猪业的一种重要疾病。特别是近年来2型链球菌的流行,不仅给我国养猪业造成重大损失,而且还是一种人畜共患病。建立简便、快速、准确的诊断方法对控制该病有重要意义,但国内外...
- 李金海曹三杰文心田肖驰
- 应用Dot-PPA-ELISA检测猪链球菌病抗体的研究
- 本文建立了检测链球菌抗体的Dot-PPA-ELISA,用于链球菌病的诊断,流行病学调查,免疫监测,以期达到有助于控制链球菌病的目的。
- 李金海曹三杰文心田肖驰
- 关键词:猪传染病猪链球菌
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重庆株的分离鉴定
- 从重庆某猪场的发病仔猪中分离到一株病毒,命名为C14-2。该病毒能在Marc-145细胞上增殖并致细胞病变:电镜观察可见病毒粒子呈球形,有囊膜,直径大小为40-60nm:核酸类型为RNA病毒;不凝集猪、犬、兔、、豚鼠、鸡...
- 周婷曾三杰文心田肖驰
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用
- 胸膜肺炎放线杆菌是传染性胸膜肺炎的病原,可引起猪以胸膜肺炎为特征的高度传染性和致死性的呼吸道传染病。该病呈世界性分布,给世界养猪业造成了巨大的经济损失[1]。胸膜肺炎放线杆菌是一种具有荚膜的革兰氏阴性杆菌,有2个生物型和...
- 肖国生曹三杰段丽丽文心田肖驰马晓平杨利
- 关键词:猪传染病胸膜肺炎放线杆菌基因克隆
- 文献传递
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与病原特性研究
- 本研究在重庆地区分离和鉴定了3株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。MC、ME和MH分离株的形态为革兰氏阴性短杆菌或球杆菌等;生长需要V因子,尿素酶试验呈阳性,MR、VP和吲哚试验呈阴性。MC和ME株动物回归试验表明均对易感猪具有...
- 马晓平曹三杰肖驰文心田陈华美杨利张雪峰
- 关键词:猪传染性胸膜肺炎放线杆菌
- 文献传递