王进
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Taq RecA蛋白的克隆表达及其在SNP基因分型中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的研究克隆表达的Taq RecA蛋白作为一种添加剂在单核苷酸多态性(SNP)基因型分析中的作用。方法构建pET-28a-Taq RecA表达质粒,在BL21(DE3)菌株中诱导表达,用热变性和饱和硫酸铵沉淀法去除部分杂蛋白,再经Ni-NTA亲和层析柱纯化分离Taq RecA蛋白;用PCR和等位基因特异性PCR(AS-PCR)方法研究其增强特异性和在SNP基因分型中提高分型准确性的作用。结果成功构建了表达质粒,表达纯化得到较高纯度蛋白,用于SNP基因分型中减少了非特异性产物,提高了分型准确性。结论 Taq RecA蛋白作为一种PCR中的添加剂,在ATP辅助作用下,适量添加能提高AS-PCR介导的SNP基因分型的准确度。
- 陈曹鑫何晓辉秦正红王进
- 关键词：单核苷酸多态性
- 慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合类型的研究及其临床意义被引量：5
- 2012年
- 目的研究不同类型的BCR-ABL融合基因在慢性粒细胞白血病(CML)患者中所占比例及其与治疗效果和预后的关系。方法采用RT-PCR方法检测46例CML患者BCR-ABL融合基因的类型,并用巢式PCR方法扩增伊马替尼耐药患者的Abl激酶区约864bp碱基片段,对扩增产物进行纯化、双向测序并分析。结果 46例CML患者中,M-BCR占33例,其中b3a2型19例,b2a2型6例,而b3a2/b2a2共表达者8例。一些少见类型如e20a2、b2a2/e20a2及b3a2/e20a2占的比例较低。随访6例伴Abl激酶区突变的伊马替尼耐药CML患者中,b3a2/b2a2型4例。结论典型CML患者的BCR/ABL融合基因类型以M-BCR占绝大多数,另外也可见一些其他类型;而伊马替尼耐药并检测出Abl激酶区点突变的患者中BCR/ABL融合基因类型以b3a2/b2a2居多。
- 谷红丽王进秦正红张日
- 关键词：慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合基因伊马替尼耐药点突变
- 伊马替尼耐药慢性髓性白血病患者ABL激酶区点突变的检测及其临床意义被引量：1
- 2012年
- 慢性髓性白血病（CML）是起源于骨髓造血干细胞的恶性增殖性疾病，它含有特征性的BCR—ABL融合基因，该基因编码产生的蛋白具有组成性的酪氨酸激酶活性，通过激活其下游的信号传导途径导致CML的发生；酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸伊马替尼（Imatinib，IM）通过竞争性结合ABL酪氨酸激酶区的ATP结合位点，使该激酶失去催化活性，阻断下游的信号传导，达到治疗CML的目的。
- 谷红丽王进秦正红张日
- 关键词：慢性髓性白血病ABL白血病患者点突变
- 食管癌组织P110α和pAKT蛋白的表达及其临床意义被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨食管癌组织中P110α、pAKT的表达与食管癌临床病理特征之间的关系。方法:收集2010年5月至2011年5月苏州大学附属第一医院76例患者的食管癌组织标本,25例正常对照食管黏膜组织标本来自解放军第101医院病理科。免疫组织化学SP法检测食管癌及正常食管黏膜组织中P110α及pAKT的表达水平。结果:76例食管癌组织pAKT表达阳性率为72.4%(55/76)、P110α表达阳性率为57.9%(44/76),均明显高于对照组(PpAKT=0.001,PP110α=0.025)。食管癌组织中pAKT、P110α的高表达与食管癌淋巴结转移相关(PpAKT=0.017,PP110α=0.009),与其他临床病理特征无关。食管癌组织中pAKT与P110α双阳性率为52.6%(40/76),两者的表达呈正相关(r=0.486,P=0.001)。结论:食管癌组织中P110α、pAKT表达与淋巴结转移相关,有可能成为临床检测食管癌淋巴结转移的生物指标。
- 王卫峰何靖康秦正红王进邬君超韩蓉
- 关键词：食管癌PAKT免疫组织化学
- 全血AS-PCR方法检测Wilson病ATP7B基因四个突变被引量：1
- 2014年
- 目的研究肝豆状核变性ATP7B基因高频突变位点，探索全血等位基因特异性-PCR（allelespecificPCR，AS-PCR）技术在该基因4个常见突变检测中的应用。方法针对ATP7B基因4个突变位点（G2333T、C2850T、G2855A、G2975T）设计等位基因特异性弓I物，应用高保真酶对人抗凝全血样本进行聚合酶链反应，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳以判断待检样本有无基因突变及其等位基因型。PCR扩增人基因组ATP7B基因第8、12、13外显子，扩增产物直接进行基因序列测定。结果全血AS-PCR法检测ATP7B基因4个基因突变，各位点检测结果与基因序列测定完全相符。27份健康对照血样分型结果G2333T、C2850T和G2975T等3个位点没有出现突变，而G2855A位点突变率则达到了51．8％。22份患者血液样本分型结果显示除G2855A位点外，其余3个位点共检出11例含有突变，阳性率达到50％。结论建立了全血AS-PCR检测肝豆状核变性ATP7B基因4个基因突变的方法，为该病的早期诊断和及早治疗提供了有效的手段。
- 孙玮管俊杰王进秦正红
- 关键词：WILSON病ATP7B基因
- 苏南地区脊髓小脑共济失调临床和基因诊断及CAG突变分析被引量：3
- 2010年
- 目的研究苏南地区脊髓小脑共济失调(SCA)的临床表现、影像学及基因诊断,并探讨SCA3的ATXN3基因中CAG重复突变的特征。方法对9个脊髓小脑共济失调家系及1个散发病例进行临床、影像及基因突变总结分析。结果 9个家系共41例作过SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA7、SCA17及齿状核红核苍白球路易体萎缩(DRPLA)各亚型(CAG)n三核苷酸重复扩增检测的患者及家系成员中,SCA3有6个家系,患者24例,症状前患者4例;余下的3个家系和1个散发病例,共9例受检者(7例发病)上述SCA 7个亚型基因检测未见异常。结论 SCA3是苏南地区最多见的SCA亚型,其确诊有赖于基因检测;但在此地区也存在其他未知亚型,有待进一步确诊。
- 俞立强方琪何晓辉王进秦正红王达鹏董万利
- 关键词：脊髓小脑性共济失调
- PARK16与苏州地区汉族人帕金森病相关性研究被引量：3
- 2011年
- 目的 研究PARK16区域rs947211多态性与帕金森病（PD）的关系.方法 采用病例-对照研究,病例组为2008至2010年之间就诊于苏州大学附属第二医院帕金森病专科门诊的160例PD患者,对照组为来自我院体检中心的200名健康正常人,采用聚合酶链反应（PCR）、DNA测序、高保真DNA聚合酶介导等位基因特异性PCR结合实时荧光PCR的SNP检测方法,检测PARK16区域rs947211多态性,探讨其与苏州地区PD发病的关系.结果 成功建立了高保真酶介导的rs947211多态性检测方法,并得到DNA测序结果验证,采用荧光检测提高了检测效率和通量.研究发现了PARK16区域rs947211的所有基因型,PD组G等位基因频率高于对照组（60.6%比51.0%）,且差异有统计学意义（χ2=6.662,P=0.010,OR=0.676,95%CI0.502～0.911）,两组中G/G基因型与A/G＋A/A基因型相比差异有统计学意义（χ2=8.401,P=0.004,OR=1.951,95%CI 1.238～3.076）.H＆Y分级在不同基因型之间差异有统计学意义（P＜0.05）,G/G基因型分级明显高于A/A基因型分级（P=0.025,95%CI0.059～0.851）和A/G基因型（P=0.020,95%CI 0.058～0.654）.结论 结合高保真酶介导的等位基因SNP识别方法建立了高效特异的实时荧光PCR检测rs947211多态性的方法.多态性检测结果提示苏州地区汉族人群中PARK16区域与PD相关,证实了对日本PD患者的全基因组扫描的研究结果.另外,对临床特点的分析发现,G/G基因型可能是PD的危险因素,在3个基因型中,G/G基因型携带者的疾病严重度或许最高.
- 李冬辉王进毛成洁胡伟东肖莉杨亚萍秦正红刘春风
- 关键词：帕金森病多态性
- 鲑鱼精DNA提高人工突变质粒模板中单核苷酸多态性位点识别的特异性及其应用
- 2011年
- 目的探讨等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)检测单核苷酸多态性(SNP)的方法,研究鲑鱼精DNA对优化等位基因特异性引物的作用。方法对鲑鱼精DNA设一系列浓度梯度,分别进行AS-PCR后观察电泳结果。结果鲑鱼精DNA能显著提高识别基因SNP位点的特异性,在25μl的质粒检测系统中加入50 ng的鲑鱼精DNA结果最佳。结论鲑鱼精DNA加入到质粒检测系统中可有效测试所设计的检测引物的特异性,达到模拟基因组DNA的目的 。
- 刘二平韩立影方琪秦正红王进
- 关键词：单核苷酸多态性等位基因特异性聚合酶链反应
