殷爱红
- 作品数：13 被引量：16H指数：2
- 供职机构：首都医科大学医学实验与测试中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 高通量检测蛋白磷酸化技术研究
- 2013年
- 目的研究常规细胞裂解法与AlphaScreen技术结合检测细胞内蛋白磷酸化水平的可行性。方法使用常规配制的细胞裂解缓冲液裂解细胞,分别用传统的Western blot方法和AlphaScreen技术检测在表皮生长因子(EGF)刺激下乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞内AKT磷酸化(p-AKT)水平的变化。结果使用AlphaScreen技术检测到的p-AKT变化趋势和幅度与使用传统Western blot方法检测所得结果一致,同时AlphaScreen技术所得结果更快速。结论常规细胞裂解法所得细胞裂解液可用于AlphaScreen技术检测细胞内蛋白磷酸化水平,该方法使AlphaScreen技术成为一种可以替代Western blot法检测组织和细胞内蛋白激酶活性的高效和灵敏的手段。
- 杨颖熊英殷爱红武文琦赵焕英
- 关键词：细胞裂解蛋白磷酸化
- 低氧诱导人VEGF基因表达载体的构建及其蛋白表达检测被引量：2
- 2011年
- 目的以人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因的低氧反应元件(HRE)作为增强子,构建含HRE的真核表达载体,探讨含HRE不同拷贝数的载体对低氧的反应状态。方法将人工合成的HRE串联后与CMV启动子连接,替换pcDNA3.1的启动子部分,构建成低氧诱导真核表达载体;将hVEGF基因重组到此载体中,转染BHK细胞。用免疫组化染色法检测VEGF的表达,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测低氧前后细胞hVEGF表达的变化。结果成功构建了含HRE的低氧诱导真核表达载体4HRE-pcDNA-VEGF和6HRE-pcDNA-VEGF。转染细胞后进行低氧培养,VEGF的表达均增高,含6HRE的低氧诱导作用高于4HRE。结论在含HRE的真核表达载体中,低氧时可诱导基因的表达,其拷贝数可影响诱导作用的强度。
- 殷爱红武文琦何丽明郑少鹏
- 关键词：缺氧诱导因子低氧反应元件血管内皮细胞生长因子
- 犬乳腺复合型腺瘤的组织病理学观察
- 2015年
- 犬乳腺肿瘤是兽医临床上常见的肿瘤疾病之一,在雌犬中属最易发生的肿瘤,其发病率约1.988‰[1]。乳腺肿瘤分为恶性乳腺肿瘤和良性乳腺肿瘤。良性乳腺肿瘤包括单纯性腺瘤、嗜碱性腺瘤、复合型腺瘤、良性混合瘤、纤维腺瘤、导管乳头状瘤等。犬乳腺肿瘤在其发病病因、肿瘤性质、药物及手术治疗以及预后等方面均与人类乳腺肿瘤较为相似[2]。
- 武文琦王宇峰殷爱红
- 关键词：乳腺导管组织病理学观察乳腺肿物肿瘤性质肌上皮细胞混合瘤
- 四妙勇安汤对糖尿病大鼠肢体缺血治疗作用及其分子机制被引量：1
- 2013年
- 目的研究四妙勇安汤对糖尿病后肢缺血大鼠的治疗作用及对丝苏氨酸蛋白激酶（Akt）、p38丝裂原活化蛋白激酶（P38）蛋白水平的影响。方法40只Wistar大鼠完全随机分为4组：对照组、对照治疗组建立单纯缺血模型；模型组、模型治疗组建立糖尿病肢体缺血模型，对照治疗组、模型治疗组给予四妙勇安汤治疗。分别于术前、术后即刻、术后第3、7、14天测下肢血流变化，术后15d取腓肠肌组织免疫组织化学CD31染色血管内皮细胞观察新生血管密度，及蛋白印迹法检测内皮细胞Akt、P38蛋白变化情况。结果模型组血管损伤严重，血管重建能力明显降低，第7天对照组、对照治疗组、模型组、模型治疗组血流比值为（45±4）、（49±3）、（364-3）、（48±6）％，第14天血流比值为（63±6）、（66±4）、（45±4）、（61±4）％，与模型组比较，其余3组差异均有统计学意义（P〈0．05）。模型组术后15d新生血管密度明显减低，Akt蛋白表达明显降低，P38表达明显升高，其他3组与其差异均有统计学意义（P〈0．05）；四妙勇安汤能够明显增加新生血管数量[模型组、模型治疗组分别为（9．1±2．0）、（16．4±2．9）个，P〈0．05，模型组、模型治疗组比值分别为（0．62±0．15）、（0．86±0．18）％，P〈0．05]，增加Akt蛋白表达，降低P38表达，差异均有统计学意义[模型组与模型治疗组蛋白相对光密度比值：Akt：（0．20±0．07）、（0．28±0．56）％；P38：（1．18±0．23）、（0．99±0．04）％，P〈0．05]，对照治疗组未发现中药治疗后副作用。结论四妙勇安汤能够改善糖尿病下肢缺血血运重建过程，加快血管新生速度，其作用机制可能是通过促进Akt表达，抑制P38表达实现的。
- 张超罗涛杨盛家陈兵李建新殷爱红武文琦
- 关键词：糖尿病四妙勇安汤肢体缺血P38丝裂原活化蛋白激酶
- 通过液质联用鉴定蛋白质相互作用方法的建立被引量：2
- 2013年
- 蛋白质是生命功能的执行者，但大多数蛋白质并不能单独行使其功能，而是通过与其他蛋白质相互作用来参与细胞或组织的生理活动。蛋白质组学研究的轰轰烈烈兴起开启了人们解析各种生命活动以及生理功能的新思路，近些年已经由比较蛋白质组学研究逐渐过渡到功能蛋白质组学研究。构建蛋白质相互作用网络能展示出两种以上蛋白质之间的相互依赖性以及这些蛋白质相互作用所起到的重要生理功能。
- 胡家郑帅胡科殷爱红
- 关键词：蛋白质相互作用液质联用功能蛋白质组学比较蛋白质组学生命活动生理活动
- 低氧诱导VEGF基因表达载体治疗家兔肢体缺血性疾病的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨低氧诱导血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因表达载体对家兔肢体缺血性模型的基因治疗效果。方法通过切除髂外动脉远端和股动脉分支制作家兔左后肢缺血模型,术后立即将含VEGF基因的低氧诱导表达载体6HRE-pcDNA-VEGF165多点注射至患侧肌肉内,并于不同时间点进行后肢胫动脉血压测量和动脉血管造影。结果与对照组相比,应用低氧诱导VEGF基因表达载体的基因治疗组胫动脉血压恢复快;动脉血管造影显示基因治疗组动脉充盈早于对照组,新生血管多于对照组,早于对照组建立侧支循环。结论低氧诱导VEGF基因表达载体可促进家兔肢体缺血模型新生血管的形成,改善缺血肢体的血液循环。
- 殷爱红武文琦崔世军滕旭郑少鹏
- 关键词：血管内皮细胞生长因子肢体缺血
- Hela细胞蛋白质分离和肽质量指纹谱鉴定方法的建立被引量：5
- 2009年
- 目的研究Hela细胞总蛋白质的分离及利用肽质量指纹谱对蛋白质进行鉴定的方法。方法提取了Hela细胞的总蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行了分离,并应用图像扫描仪及图像分析软件获取蛋白质点的数字化信息。对其中不同丰度的蛋白质点,进行胶内酶切后,通过基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱(MALDIO-TOF-MS)分析,再将检测出的多肽质量数通过Mascot搜索引擎检索NCBInr数据库。结果获得了Hela细胞总蛋白质双向电泳图谱及蛋白质点的数字化信息,通过MALDIO-TOF-MS检测得到的肽质量指纹谱再经过网上公共数据的检索从而获得3个蛋白质点分别是α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、γ-肌动蛋白(γ-actin)和过氧化物酶2(peroxiredoxin 2)。结论Hela细胞总蛋白质双向电泳的分离效果较好,肽质量指纹谱法能有效地对Hela细胞的蛋白质斑点进行鉴定。
- 胡家李燕英孙丽翠殷爱红武文琦贺俊崎
- 关键词：HELA细胞蛋白质组2-DE肽质量指纹图谱
- 大型离心机集中管理与维护
- 2016年
- 本文介绍了大型离心机的集中管理、使用和维护。从离心机的实验室配置、维护保养方面加强管理;对使用人员进行安全和操作培训,包括合理选择离心机和转子、设置离心条件和注意事项,以确保离心机的安全应用,发挥其效能。
- 殷爱红胡家武文琦
- 关键词：离心机集中管理
- 缺氧诱导真核基因表达载体及其用途
- 本发明公开了一种缺氧诱导真核基因表达载体及其用途。所述发明对pcDNA3.1进行了改造，将其增强子用缺氧诱导的增强子替代，构建了缺氧诱导基因表达载体；为了检测缺氧诱导基因表达载体的功能，将hVEGF<Sub>165</S...
- 郑少鹏殷爱红武文琦
- 文献传递
- 微波辅助的蛋白质酶解方法被引量：2
- 2012年
- 近些年，蛋白质组学研究技术手段不断进步，研究策略不断更新，归纳起来主要分为2种策略：“top—down”策略和“bottom-up”策略。“top-down”策略是先对蛋白质混合物进行分离，然后进行蛋白质酶解和质谱鉴定¨引。将蛋白质混合物通过凝胶电泳分离，从凝胶上切点进行胶内酶解，再通过质谱鉴定蛋白质，这就是最常见的“top-down”策略（3）。“bottom-up”策略是指将蛋白质混合物酶解后得到更为复杂的多肽混合物，经多维高效液相色谱分离后进行串联质谱鉴定获得肽段序列信息，再搜索蛋白质数据库确定最后的鉴定结果（4）。这2种蛋白质组学研究策略都包含了蛋白质酶解这个步骤，虽然目前针对蛋白质分离和鉴定都有一些快速自动化的方法，但是对于蛋白质酶解及质谱上样之前的准备工作仍然步骤繁杂，耗时费力，严重影响了蛋白质大规模鉴定的速度。本文介绍一种快速酶解的方法，通过微波的辅助大大简化了蛋白质酶解步骤，并缩短了酶解所需时间（5-8）
- 殷爱红胡家阮晶武文琦张进禄
- 关键词：蛋白质组学微波辅助质谱鉴定蛋白质数据库电泳分离蛋白质分离
