熊英
- 作品数：30 被引量：68H指数：6
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 高通量检测蛋白磷酸化技术研究
- 2013年
- 目的研究常规细胞裂解法与AlphaScreen技术结合检测细胞内蛋白磷酸化水平的可行性。方法使用常规配制的细胞裂解缓冲液裂解细胞,分别用传统的Western blot方法和AlphaScreen技术检测在表皮生长因子(EGF)刺激下乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞内AKT磷酸化(p-AKT)水平的变化。结果使用AlphaScreen技术检测到的p-AKT变化趋势和幅度与使用传统Western blot方法检测所得结果一致,同时AlphaScreen技术所得结果更快速。结论常规细胞裂解法所得细胞裂解液可用于AlphaScreen技术检测细胞内蛋白磷酸化水平,该方法使AlphaScreen技术成为一种可以替代Western blot法检测组织和细胞内蛋白激酶活性的高效和灵敏的手段。
- 杨颖熊英殷爱红武文琦赵焕英
- 关键词：细胞裂解蛋白磷酸化
- GPER与PDZ蛋白SAP90相互作用的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探索并鉴定G蛋白偶联雌激素受体（G protein-coupled estrogen receptor，GPER）与PDZ蛋白SAP90（突触后致密物质-95，PSD-95）的相互作用以及该相互作用的分子机理，为进一步研究GPER的功能提供线索；方法对GPER与SAP90的相互作用及其特异性．应用GST融合蛋白沉降和免疫共沉淀实验等多种方法予以鉴定：结果①GSTpulldown检测结果显示GPER．CT与SAP90的PDZ1-2结构域存在相互作用；真核细胞中瞬时表达的GPER完整蛋白与SAP90蛋白的PDZ1-2结构域存在相互作用；②免疫共沉淀结果显示，在细胞内完整的GPER与SAP90蛋白质分子也存在相互作用。结论GPER与SAP90之间存在相互作用．该相互作用是通过GPER的羧基端与SAP90的PDZ1-2结构域结合而实现的。
- 贺旭孟冉秦琼熊英贺俊崎
- 关键词：蛋白相互作用
- 人酪氨酸羟化酶全长及催化结构域序列表达产物酶活性比较被引量：3
- 2003年
- 采用人的全长酪氨酸羟化酶 c DNA为模板 ,设计特定的引物进行 PCR扩增反应 ,获得编码 N-端缺失 14 1个氨基酸的催化结构域 c DNA片段 ,将其插入谷胱甘肽巯基转移酶融合表达载体 p GEX-4 T-1中 ,构建表达质粒 p GEXTHc,同时构建其全长片段的表达质粒 p GEXTHa。两者分别转化大肠杆菌 BL2 1,以 IPTG诱导可高效表达 ,产物以可溶形式存在 ,经亲和层析纯化后以蛋白酶裂解 ,再经亲和层析分离得到较纯的酶蛋白 ,采用高效液相色谱法 ( HPLC-ECD)检测酶活性 ,结果证明催化结构域活性高于全酶 ,是全酶活性的 2 .
- 熊英杨慧于培兰徐群渊
- 关键词：酪氨酸羟化酶催化结构域融合蛋白表达酶活性
- 恐惧记忆相关蛋白的蛋白质组学研究被引量：4
- 2010年
- 应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定和数据库检索,分析比较了CD1和C57BL/6J小鼠经条件性恐惧实验后海马蛋白表达的差异,探讨了与恐惧记忆相关的蛋白质.CD1和C57BL/6J小鼠经条件性恐惧实验后,海马蛋白表达存在明显差异,29种蛋白(31个蛋白点)与恐惧记忆的形成显著相关.其中24个蛋白点表达显著上调,7个蛋白点显著下调.与恐惧记忆相关的蛋白按功能可分为如下6类:(1)能量代谢或线粒体功能相关蛋白;(2)神经发育相关蛋白;(3)信号转导相关蛋白;(4)细胞骨架相关蛋白;(5)氨基酸代谢和蛋白分解相关蛋白;(6)伴侣蛋白.这些恐惧记忆形成的相关蛋白深化了对恐惧记忆脑机制的认识,为研究和治疗认知相关疾病提供了新靶标.
- 郑君芳刘华熊英王小柱贺俊崎
- 关键词：海马蛋白质组学质谱
- 啤酒酵母中细胞周期检验点对DNA损伤监控的研究
- 张红WolframSiedeZhiningZhu张松赵晶晶YuleLiu熊英杨荟敏
- 细胞内DNA的损伤是相对常见的一种现象，可能会导致突变、肿瘤及其机体死亡。为了防止DNA 损伤造成的后果，细胞会激活机体内相应的机制去除这种死亡。包括：细胞周期检验点，DNA修复，激活转录因子和细胞凋亡。任何一条途径的丧...
- 关键词：
- 关键词：DNA损伤啤酒酵母
- 人酪氨酸羟化酶全长及催化核心序列原核表达载体的构建、表达及酶活性比较
- 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见于中老年人的中枢神经系统变性疾病,主要病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元的退行性改变,引起脑内纹状体多巴胺含量的明显减少.酪氨酸羟化酶(Tyrosine H...
- 熊英
- 关键词：酪氨酸羟化酶催化结构域融合蛋白表达
- 文献传递
- 《生物化学》实验课学生科研创新能力培养探索被引量：1
- 2012年
- 生物化学是一门以实验为基础的科学,传统的生物化学实验课教学已不能满足要求。在基本实验技能和知识掌握的基础上,以多媒体等教学方式拓展学科知识,通过学生独立设计实验,独立分析和讨论结果,初步培养了学生的科研创新能力。
- 杨晓梅张国军程杉贺旭郭瑞翰熊英贺俊崎
- 关键词：生物化学
- PBL教学法在生物化学教学中的探讨与实践被引量：5
- 2010年
- 生物化学课程是高等医学院校一门重要的基础课,但难学难懂且难教。通过PBL教学法在生物化学教学中的应用与实践,培养了学生的自主学习能力,激发了学生的学习兴趣,为提高教学质量、探讨新的教学模式、深化教学改革,找到一条有效的教学途径。
- 文朝阳郑少鹏韩玉英何俐明刘华付慧芳熊英杨晓梅王雅梅贺俊崎
- 关键词：PBL教学法传统教学模式生物化学教学改革
- 血管紧张素(1-7)的受体MAS与PSD-95的相互作用被引量：1
- 2007年
- 经过对蛋白质MAS的氨基酸序列进行分析、比对发现,其羧基末端含有一段高度保守的PDZ结合模序.据此推测,MAS通过此模序可能会与某些PDZ蛋白质发生相互作用.将MAS羧基末端27个氨基酸所对应的DNA序列,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-MAS-CT.将重组质粒转入大肠杆菌BL21内,经IPTG诱导,并用glutathione-Sepharose 4B纯化,得到纯化的融合蛋白GST-MAS-CT.以GST-MAS-CT为饵蛋白,利用GST pull down方法,在兔脑组织中筛选与MAS特异结合的蛋白质.结果表明,在兔脑组织中有多种蛋白质可以与MAS-CT特异结合,经Western印迹检验其中之一为突触后致密物质-95(postsynaptic density protein95,PSD-95).PSD-95与MAS的相互作用的研究结果,为研究完整的MAS与PSD-95的相互作用以及这种相互作用对MAS受体的功能的影响奠定了基础.
- 李积凤熊英李延华杨晓梅陈鹏江琪安云庆贺俊崎
- 关键词：MAS血管紧张素PSD-95G蛋白偶联受体PDZ蛋白
- 案例式教学法——医学生物化学课程学习与临床应用的桥梁被引量：7
- 2009年
- 生物化学课程是高等医学院校一门重要的基础课,但难学难懂且难教。通过案例式教学法在医学生物化学中的应用,激发学生的学习兴趣,加强学生学习生化的主观能动性,为提高教学质量、探讨新的教学模式、深化教学改革,找到一条有效的教学途径。
- 文朝阳韩玉英何丽明熊英王雅梅杨晓梅付慧芳郑少鹏贺俊崎
- 关键词：案例式教学法医学生物化学教学改革
