胡家
- 作品数：12 被引量：20H指数：2
- 供职机构：首都医科大学医学实验与测试中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学文化科学更多>>
- 人乳牙牙髓干细胞全蛋白质非胶分级分离电泳分析被引量：2
- 2016年
- 目的对人乳牙牙髓干细胞全蛋白质进行非胶分级分离电泳,并用液质联用质谱分析所得蛋白质组分。方法对人乳牙牙髓干细胞进行裂解,将所得的细胞全蛋白质均分到12孔样品槽里进行非胶分级分离电泳,液相回收电泳后的12个组分,对各组分进行SDS-PAGE分离,并对各组分进行溶液酶切后再进行液质联用质谱分析。结果 SDS-PAGE图谱显示人乳牙牙髓干细胞全蛋白质经非胶分级分离电泳分成了12个不同的蛋白质组分,液质联用对各组分进行分析均成功鉴定到一定数目蛋白质。结论非胶分级分离电泳能将复杂蛋白质样品进行预分离,液相回收分离后样品便于进行液质联用分析。
- 胡家李蕾王劲松赵君朋
- 关键词：蛋白质组
- 通过液质联用鉴定蛋白质相互作用方法的建立被引量：2
- 2013年
- 蛋白质是生命功能的执行者，但大多数蛋白质并不能单独行使其功能，而是通过与其他蛋白质相互作用来参与细胞或组织的生理活动。蛋白质组学研究的轰轰烈烈兴起开启了人们解析各种生命活动以及生理功能的新思路，近些年已经由比较蛋白质组学研究逐渐过渡到功能蛋白质组学研究。构建蛋白质相互作用网络能展示出两种以上蛋白质之间的相互依赖性以及这些蛋白质相互作用所起到的重要生理功能。
- 胡家郑帅胡科殷爱红
- 关键词：蛋白质相互作用液质联用功能蛋白质组学比较蛋白质组学生命活动生理活动
- 微波辅助的蛋白质酶解方法被引量：2
- 2012年
- 近些年，蛋白质组学研究技术手段不断进步，研究策略不断更新，归纳起来主要分为2种策略：“top—down”策略和“bottom-up”策略。“top-down”策略是先对蛋白质混合物进行分离，然后进行蛋白质酶解和质谱鉴定¨引。将蛋白质混合物通过凝胶电泳分离，从凝胶上切点进行胶内酶解，再通过质谱鉴定蛋白质，这就是最常见的“top-down”策略（3）。“bottom-up”策略是指将蛋白质混合物酶解后得到更为复杂的多肽混合物，经多维高效液相色谱分离后进行串联质谱鉴定获得肽段序列信息，再搜索蛋白质数据库确定最后的鉴定结果（4）。这2种蛋白质组学研究策略都包含了蛋白质酶解这个步骤，虽然目前针对蛋白质分离和鉴定都有一些快速自动化的方法，但是对于蛋白质酶解及质谱上样之前的准备工作仍然步骤繁杂，耗时费力，严重影响了蛋白质大规模鉴定的速度。本文介绍一种快速酶解的方法，通过微波的辅助大大简化了蛋白质酶解步骤，并缩短了酶解所需时间（5-8）
- 殷爱红胡家阮晶武文琦张进禄
- 关键词：蛋白质组学微波辅助质谱鉴定蛋白质数据库电泳分离蛋白质分离
- 蛋白质组学方法鉴定小鼠Barnes迷宫空间记忆相关蛋白
- 2016年
- 目的：通过Barnes Maze （ Barnes迷宫， BM）对小鼠进行空间记忆训练，随后用蛋白质组学方法鉴定BM空间记忆相关的海马蛋白并分析蛋白功能及参与的生物学过程。方法将小鼠分为实验组和对照组。应用BM对实验组小鼠进行空间记忆训练，蛋白质组学方法鉴定两组小鼠中表达水平不同的海马蛋白，分析空间记忆相关的蛋白及其功能。结果实验组小鼠学习训练后学习记忆能力明显强于对照组，到达目标孔的时间明显缩短[对照组：（116．0＆#177;5．5） s，实验组：（42．0＆#177;3．6） s； P＜0．05]。蛋白质组学分析结果表明9种海马蛋白的表达水平在记忆形成过程中显著下调，下调的蛋白按功能可分为4类：①细胞骨架；②能量代谢；③神经发育；④物质运输。结论这9种学习记忆相关蛋白可能通过调节细胞骨架、能量代谢、神经发育和物质运输等生物学过程进而影响了学习记忆能力。
- 代元平彭志强陈慧敏王雯胡家贺俊崎郑君芳
- 关键词：蛋白质组学质谱
- Hela细胞蛋白质分离和肽质量指纹谱鉴定方法的建立被引量：5
- 2009年
- 目的研究Hela细胞总蛋白质的分离及利用肽质量指纹谱对蛋白质进行鉴定的方法。方法提取了Hela细胞的总蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行了分离,并应用图像扫描仪及图像分析软件获取蛋白质点的数字化信息。对其中不同丰度的蛋白质点,进行胶内酶切后,通过基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱(MALDIO-TOF-MS)分析,再将检测出的多肽质量数通过Mascot搜索引擎检索NCBInr数据库。结果获得了Hela细胞总蛋白质双向电泳图谱及蛋白质点的数字化信息,通过MALDIO-TOF-MS检测得到的肽质量指纹谱再经过网上公共数据的检索从而获得3个蛋白质点分别是α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、γ-肌动蛋白(γ-actin)和过氧化物酶2(peroxiredoxin 2)。结论Hela细胞总蛋白质双向电泳的分离效果较好,肽质量指纹谱法能有效地对Hela细胞的蛋白质斑点进行鉴定。
- 胡家李燕英孙丽翠殷爱红武文琦贺俊崎
- 关键词：HELA细胞蛋白质组2-DE肽质量指纹图谱
- 蛋白质组学方法分析多T迷宫训练后的小鼠空间记忆蛋白被引量：4
- 2013年
- 应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定和数据库检索,分析比较C57BL/6J小鼠在多T迷宫(MTM)训练和记忆测试组与未训练组海马蛋白表达的差异,探讨与MTM空间记忆相关的蛋白质.C57BL/6J小鼠经MTM训练后,可对相应的空间线索保持记忆能力,其海马蛋白质表达存在明显差异,14个蛋白质与MTM空间记忆形成显著相关.其中,6个蛋白点表达显著上调,8个蛋白点表达水平显著降低.这些蛋白按功能可分为6类:细胞骨架相关蛋白,物质运输相关蛋白,蛋白合成相关蛋白,能量和物质代谢相关蛋白,信号转导相关蛋白,通道蛋白.这些空间记忆形成相关蛋白的研究深化了对空间记忆机制的认识,为研究和治疗认知相关疾病提供了新靶标.
- 郑君芳陈慧敏宋然胡家沙莎贺俊崎
- 关键词：空间记忆蛋白质组学质谱法
- 生物活性肽蛋白质组分分离与鉴定方法的建立被引量：2
- 2014年
- 目的:评估大规模蛋白质组分离与鉴定技术策略在生物活性肽研究中的应用价值。方法:采用全溶液酶解及胶内分离与酶解方法分离生物活性肽;肽段离子阱串联质谱鉴定时,采用碰撞诱导解离与电子转移解离2种互补的肽段碎裂模式。结果:几种方法联用,鉴定到复杂生物活性肽样品中236个多肽大分子;不同分离和鉴定策略显示出良好的互补性,基于凝胶电泳分离的策略提供了最好的鉴定效果。结论:大规模的蛋白质组学分离与鉴定技术策略可以有效应用于生物活性肽组分的表征。
- 李蕾俞兰胡家苏秀兰赵君鹏
- 关键词：生物活性肽生物质谱碰撞诱导解离
- 蛋白质磷酸化位点富集与鉴定方法的建立与应用被引量：2
- 2015年
- 建立了一种用Ti O2填料,自制色谱小柱,从而实现磷酸化肽段富集的方法,填料负载量可根据需求调整等优势。质谱分析显示,Ti O2小柱可以实现标准磷酸化蛋白质修饰位点的识别,针对alpha-casein的分析显示,结合液相色谱串联质谱鉴定,可以获得15个磷酸化修饰位点。方法用于突触核蛋白(α-synuclein)磷酸化修饰位点的鉴定,确认了数据库中的S87,T125 2个修饰位点,同时发现了11个新的修饰位点。有望促进磷酸化蛋白质质谱分析技术在基础与临床研究实验室的推广应用。
- 李蕾邢昊胡家杨慧薛冰赵君朋
- 关键词：生物质谱磷酸化修饰突触核蛋白
- 大型离心机集中管理与维护
- 2016年
- 本文介绍了大型离心机的集中管理、使用和维护。从离心机的实验室配置、维护保养方面加强管理;对使用人员进行安全和操作培训,包括合理选择离心机和转子、设置离心条件和注意事项,以确保离心机的安全应用,发挥其效能。
- 殷爱红胡家武文琦
- 关键词：离心机集中管理
- 人乳牙牙髓干细胞和恒牙牙髓干细胞的蛋白质组学比较被引量：2
- 2013年
- 目的采用蛋白质组学方法研究人乳牙牙髓干细胞(SHED)和恒牙牙髓干细胞(DPSC)中的蛋白表达差异。方法应用双向凝胶电泳技术分离SHED和DPSC的细胞总蛋白。通过比较两种细胞的蛋白组学图谱,确定差异表达的蛋白点,而后对差异点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析和蛋白数据库信息检索,对差异蛋白进行功能分类。结果建立了SHED和DPSC的蛋白质组图谱,经软件分析出45个差异蛋白点,其中26个表达上调,19个表达下调,再经质谱鉴定出48种蛋白,其生物学功能涉及细胞周期、代谢等。结论 SHED与DPSC中蛋白的差异表达体现了两种细胞在结构和功能上的异同性,为进一步研究SHED和DPSC在增殖、分化中的差异,以及牙齿相关干细胞在组织工程和再生医学研究中的应用提供参考。
- 王劲松胡家王松灵
- 关键词：乳牙牙髓干细胞蛋白质组学
