卢强
- 作品数:13 被引量:89H指数:6
- 供职机构:解放军农牧大学更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 聚合酶链反应检测食品中的沙门氏菌被引量:1
- 1994年
- 参考沙门氏菌侵袭性基因invA的序列,设计合成一对引物扩增其中一段序列,建立了特异性检测沙门氏菌的PCR方法。引物两端分别加了Bam HI和EcoR I切点,扩增片段大小为300bp。对收集的50个血清型123株沙门氏菌及7种23株非沙门氏菌进行PCR检测,结果仅沙门氏菌有300bp的扩增产物,显示了很强的特异性,为下一步克隆而设计的两个酶切位点对引物的特异性没有影响。经琼脂糖凝胶电泳,PCR的检出极限是10pg染色体DNA和10~2 cfu的细菌。将扩增产物经slot—blot与辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的invA基因探针杂交,经增强型化学发光反应(ECL)及化学发光自显影(CPD)检测,可提高检测的敏感性一个数量级,同时增加了特异性。为推广应用,本文试验了8种模拟食品样品对PCR反应的影响,结果除奶酪外,其余都得到较好扩增。对120份污水及食品样品进行检测,该检测系统检出70份阳性结果,检出率高于常规分离。初步应用显示,PCR检测方法敏感、特异、简便、快速,适合于食品卫生检验和临床标本检验的现场应用。
- 刘明远卢强陈贵连柳增善王礼文
- 关键词:INV聚合酶链反应食品
- PNT—PCR检测食品中沙门氏菌方法的建立及应用
- 1995年
- 本文将自行研制的一种沙门氏菌强选择性增菌液PNT与PCR技术相结合,建立了快速、特异、敏感地检测食品中沙门氏菌的PNT—PCR技术。通过对食品样品、污水样品的检测,结果表明该检测系统可检出食品中10cfu的沙门氏菌。应用本检测系统检测各类食品及污水样品612份,PNT—PCR法检出沙门氏菌198份,而常规方法检出104份,本法在特异性、敏感性及实际样品检出率方面均显示了很强的优越性。
- 卢强刘明远陈贵连柳增善张国利张明军王礼文吴锡芬李克涓
- 关键词:噬菌体PCR
- 应用增强化学发光法检测人巨细胞病毒DNA被引量:5
- 1994年
- 用增强化学发光法(ECL)检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA。该检测系统用戊二醛将辣根过氧化酶与HCMV特异片段结合制备酶标基因探针。探针与靶DNA杂交后,酶催化检测系统中发光底物,再经增强剂作用将光信号放大,杂交信号通过X光自显影。经狭缝杂交证明ECL的敏感性达到0.2pg同源DNA,且仅与HCMVDNA杂交。用ECL检测42例巨细胞包涵体病(CID)患儿和20例正常同龄儿童尿中HCMVDNA,结果阳性率分别为54.8%和35.0%。与病毒分离相比较,ECL的敏感性为92.3%,符合率为87.1%,表明用ECL检测HCMV是安全、快速、敏感和特异的方法,适用于临床诊断和研究。
- 蔡庆卢强陈友纯林万明
- 关键词:巨细胞病毒核酸杂交化学发光法
- 沙门氏菌快速、特异检验方法的建立及其应用
- 1996年
- 1.首次在国内研制出强选择性的PNT增菌液(国外尚未见报道),并建立了以微量复增菌法为基础的常规检验方法。突破点表现在增菌效果好(沙门氏菌生长,杂菌基本被抑制,一次性增菌仅需6h);
- 卢强刘明远王礼文林万明林万明陈贵连吴锡芬柳增善张明军
- 关键词:沙门氏菌增菌效果增菌液选择性分离菌
- HRP直接标记属特异性基因探针检测沙门氏菌的研究被引量:6
- 1994年
- 以活化辣根过氧化物酶复合物(HRP—PBQ—PEI+—NH3+)直接标记沙门氏菌属特异性DNA探针pLS2和pLS3,探针与靶DNA杂交后催化发光底物,经增强型化学发光反应(ECL),用普通X光胶片自显影(CPD)检测沙门氏菌。经狭缝杂交(Slotblot),该法标记探针均可检测到0.1pg的纯质粒DNA及103个未经培养的鼠伤寒沙门氏菌。Dot—blot杂交结果证明,HRP标记的探针仅与沙门氏菌属细菌杂交,而与试验的其他肠道非沙门氏菌不杂交。本研究表明,HRP直接标记基因探针化学发光自显影法检测沙门氏菌,安全、快速、简便,且有高度的敏感性和特异性,是一种有较大应用前景的非放射性标记探针杂交检测方法。
- 卢强林万明陈贵连
- 关键词:过氧化物酶沙门氏菌
- 对虾副粘病毒样病毒的细胞分离培养被引量:9
- 1997年
- 选用鲤鱼上皮乳状瘤细胞(EPC)和虹鳟肝细胞(R1),对新发现的对虾暴发流行病病原副粘病毒样病毒进行了细胞分离与培养。结果证实对虾副粘病毒样病毒可在这2种鱼类传代细胞中复制,其中EPC培养的病毒粒子的滴度在108/mL以上。
- 岳玉环黎诚耀杨盛华卢强陶增思王文东王振英邹啸环殷震
- 关键词:对虾细胞培养
- 聚合酶链反应(PCR)鉴定羊肉方法的建立及应用被引量:6
- 1996年
- 应用自行设计合成的羊DNA引物特异性地扩增出羊1.714卫星DNA序列中277bP的DNA片段,建立了扩增羊DNA片段鉴定生熟羊肉的PCR方法。本法检测的敏感度为:生羊肉为38.48fg全基因组DNA;熟羊肉和高压羊肉分别为0.364Pg和0.361Pg的全基因组DNA。设计合成的羊DNA引物可以扩增出绵羊、山羊、滩羊、细毛羊、羯羊五种羊肉DNA的同一目的DNA片段,而对牛、马、驼、鹿、猪等十五种动物DNA无扩增效果。利用本法对40份生、熟羊肉样品进行鉴定,其阳性率为100%。对各种肉类样品的检测均可在6h内完成。
- 张国利郑明光周志江欧阳红生张让堂卢强
- 关键词:羊肉聚合酶链反应
- 聚合酶链反应(PCR)鉴定马肉方法的建立及应用被引量:14
- 1997年
- 依据马卫星DNA序列设计了1对引物,建立了PCR鉴定生、熟马肉的方法。应用本方法特异地扩增出预期的马186bpDNA片段,其检测敏感度对生马肉达28.6fgDNA;对熟马肉和高压马肉为0.254pg。运用该引物仅可扩增出马DNA的单一片段,而对牛、绵羊、山羊、骆驼、驴、骡、猪等12种动物肉的DNA扩增则呈阴性。利用本方法对54份生、熟马肉进行鉴定,正确鉴定率为100%,对各种样品检测,均可在6h内完成。
- 郑明光张国利周志江张让堂刘明远卢强欧阳红生
- 关键词:聚合酶链反应马肉
- 对虾暴发流行病的一种新病原——副粘病毒样病毒被引量:5
- 1997年
- 对1996年我国河北、山东人工养殖的日本对虾和中国对虾暴发流行的虾病进行了病原学研究,发现引起本次虾病暴发流行的病原是迄今尚未见报道的对虾的一种新病原——副粘病毒样病毒。该病毒主要侵害对虾肝胰腺,导致细胞严重变性。
- 黎诚耀杨盛华岳玉环陶增思穆占昆王玉平杨振国卢强王振英
- 关键词:对虾流行病病原学
- 应用PCR-ECL技术检测食品中的沙门氏菌被引量:13
- 1995年
- 应用PCR-ECL技术检测食品中的沙门氏菌卢强,陈贵连,林万明沙门氏菌在食品公共卫生上有重要的意义,需要对其进行快速、敏感、特异的检测。由于聚合酶链反应(PCR)有很高的特异性和敏感性,并且能在较短时间内对大量标本同时进行检测,所以是一种较理想的检测...
- 卢强陈贵连林万明
- 关键词:食品检验沙门氏菌聚合酶链反应ECL