金洪涛
- 作品数：33 被引量：67H指数：5
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- IL-18和HIV-1gag-gp120嵌合基因DNA疫苗联合免疫小鼠的免疫应答被引量：15
- 2004年
- 目的 :探讨IL 18和HIV 1gag gp12 0嵌合基因的DNA疫苗联合免疫小鼠的免疫应答。方法 :构建含IL 18的真核表达质粒pVAXIL18,将他与表达HIV 1gag gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒pVAXGE共同肌注免疫BALB/c小鼠 ,检测免疫小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体滴度。结果 :联合免疫组小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体水平均显著高于单独免疫组 (P <0 .0 5 ) ,空白质粒对照组 (P <0 .0 1)和PBS对照组 (P <0 .0 1)。结论 :IL 18和HIV 1gag gp12 0嵌合基因的DNA疫苗联合免疫可诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫 ,且IL 18发挥了免疫佐剂的作用。
- 江文正金宁一李子健张立树王宏金洪涛
- 关键词：HIV-1IL-18DNA疫苗
- 抗肿瘤重组活载体疫苗
- 一种抗肿瘤重组活载体疫苗，属于生物技术领域，特别是涉及一种鸡痘病毒活载体疫苗的重组。本发明提供三株分别表达鸡贫血病毒(CAV)凋亡素基因(VP3)，鸡新城疫病毒(NDV)血凝素－神经氨酸酶基因(HN)和人白细胞介素18基...
- 金宁一李霄米志强金扩世孙迎春李昌夏志平金洪涛管国芳李杰
- 文献传递
- 传染性非典型肺炎限制性内切酶检测方法的研究被引量：3
- 2006年
- 目的建立一种对传染性非典型肺炎,又称严重急性呼吸综合征(SARS)准确诊断的新方法。方法利用GCG软件将已公布的SARS病毒变异品系与人类基因组、人类易感病原体进行比对分析。结果筛选出了用于检测的ScDNA核苷酸片段,并在该片段中确定特异性的酶切位点,使检测方法的准确性得以保证。结论与传统检测方法比较,限制性内切酶分析法完全克服了检测中非特异性结果的产生,使检测结果准确可靠。
- 孙非刘立侠金扩世许守民金洪涛金宁一靳玉琴刘志屹张淑芹黄伟江禹万忠海赵文彬邹啸环
- 关键词：非典型肺炎传染性非典型肺炎酶检测人类基因组SARS病毒
- 应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag被引量：1
- 2002年
- 目的 构建含HIV-1Gag全长基因的重组酵母表达质粒pPICGAG，并在毕赤酵母中进行表达。方法用Not I和XhoI将含HIV－1 Gag全长基因的质粒pKSGAG双酶切后，克隆到酵母表达载体pPIC9中，构建了重组表达质粒 pPICGAG。pPICGAG用 SacI线性化后，电转化毕赤酵母 GS115，PCR鉴定阳性酵母转化子，并分别将PCR阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达，表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果 酵母转化子的整合率为72．7％。SDS-PAGE结果显示表达蛋白的相对分子质量为55000左右，与预计计算的值相同。Western blot结果显示表达蛋白能与单克隆抗体发生特异性反应。结论 在毕赤酵母中成功地表达了HIV-1核心蛋白Gag，且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性。
- 江文正金宁一王宏伟金洪涛张应玖王海燕
- 关键词：HIV-1核心蛋白毕赤酵母中国株
- 共表达中国株HIV-1gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒研究被引量：2
- 2003年
- 目的 构建共表达中国株HIV 1gp12 0与人白细胞介素 6 (IL 6 )的重组鸡痘病毒。方法分别将HIV 1gp12 0基因和hIL 6基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI P7.5和P7.5串联启动子下游 ,构建重组鸡痘病毒表达质粒pUTA GP IL6。利用脂质体法将重组质粒和鸡痘病毒2 82E4株共转染鸡胚成纤维细胞。经BUdR加压筛选 3次后 ,重组病毒分别用PCR、间接免疫荧光试验和Westernblot进行鉴定 ,并进行小鼠免疫研究。结果 重组病毒基因组中可扩增出 1.4kb大小片段 ,重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质 ,表达产物的Westernblot分析表明重组病毒可表达gp12 0和hIL 6蛋白。重组病毒可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答。结论 成功构建了共表达中国株HIV 1gp12 0与hIL 6的重组鸡痘病毒 ,为研制HIV 1基因工程活载体疫苗提供有益的资料。
- 江文正金宁一李子健张立树王宏金洪涛
- 关键词：重组鸡痘病毒
- Apoptin与hIL-18基因对人结肠癌细胞的作用研究
- 本文研究了鸡贫血病毒VP3基因与hIL-18基因协同抗肿瘤作用,研究结果表明CAV VP3基因与人IL-18基因可能具有协同抗肿瘤作用.
- 连海金宁一米志强李霄解丽华徐敬龙金洪涛李萍
- 关键词：鸡贫血病毒人结肠癌细胞VP3基因
- 文献传递
- 抗HIV-1gp120单链抗体的原核表达与初步纯化被引量：4
- 2002年
- 目的 在原核细胞表达抗HIV-1gp120单链抗体基因,纯化后检测其活性。方法 将单链抗体基因插入pET28原核表达载体进行诱导表达,对包涵体进行变性复性处理后,利用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达的蛋白进行初步纯化,纯化后的单链抗体与gp120标准抗原膜条反应。结果 表达产物主要以包涵体形式存在,最高表达量占菌体总蛋白量的51％,金属螯合层析一步纯化后纯度超过85％。纯化后的单链抗体可以特异地识别gp120标准抗原。结论 在原核细胞表达的单链抗体,复性纯化后具有生物学活性。
- 金洪涛金宁一王宏伟江文正王宏
- 关键词：原核表达纯化
- Apoptin与hIL-18基因对人结肠癌细胞的作用研究
- 鸡贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)是一种诱导细胞凋亡的新病毒,而触发鸡贫血病毒诱导细胞凋亡的因子是鸡贫血病毒编码的蛋白(VP3蛋白),即凋亡素(apoptin)。凋亡素能诱导人急性骨髓白血病细...
- 连海金宁一米志强李霄解丽华徐敬龙金洪涛李萍
- 文献传递
- 中国株HIV-1核心蛋白Gag核酸疫苗的构建与表达被引量：5
- 2002年
- 目的 构建含HIV 1中国流行株B亚型核心蛋白Gag基因的真核表达质粒 ,并在体外进行表达和鉴定。方法 将Gag基因插入到核酸疫苗载体质粒pVAX1中 ,构建真核表达质粒 pVAXGAG。用脂质体法 ,将重组质粒转染入Hela细胞后进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示 ,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光。Westernblot和DotELISA分析显示 ,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的Gag蛋白。 结论构建的核酸疫苗可在体外进行表达 。
- 江文正金宁一李子健金洪涛
- 关键词：HIV-1核心蛋白核酸疫苗脂质体法
- HIV-1表面糖蛋白gp120 DNA疫苗质粒的构建与表达被引量：2
- 2002年
- 目的 构建含HIV-1表面糖蛋白基因的真核表达质粒,并在Hela细胞内表达。方法 在核酸疫苗载体质粒 pVAX1中插入gp120基因,构建真核表达质粒pVAXGP。在体外用脂质体法将重组质粒转染Hela细胞,并用间接免疫荧光试验、免疫印迹试验和Dot-ELISA对表达产物进行检测。结果 间接免疫荧光试验结果显示,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光。免疫印迹试验和Dot-ELISA结果均显示,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的gp120蛋白。结论 已成功地构建了真核表达质粒,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性。
- 江文正金宁一李子健金洪涛王宏韩文瑜
- 关键词：HIV-1DNA疫苗质粒艾滋病
