江文正
- 作品数：133 被引量：431H指数：9
- 供职机构：华东师范大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 抗HIV-1 gp41单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控表达及活性检测被引量：1
- 2004年
- 目的 获得抗HIV 1gp4 1单链抗体与葡萄球菌外毒素A融合表达的重组导向毒素蛋白。方法 人工合成能广泛识别HIV 1gp4 1的单链抗体 (ScFv4 1)基因和金黄色葡萄球菌外毒素A(SEA)基因 ,将SEA基因第 2 2 7位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT ,并对两基因进行密码子优化。以大肠杆菌温控型表达质粒pBV2 2 0为载体 ,分别构建单表达ScFv4 1的质粒pBV 4 1和SEA与ScFv4 1融合表达的质粒pBV SL4 1,转化大肠杆菌感受态细胞 ,通过提高温度诱导表达 ,表达产物经分子筛层析折叠复性后 ,检测单链抗体结合活性及重组导向毒素介导的细胞毒淋巴细胞 (CTL)杀伤活性。结果 表达质粒pBV 4 1和pBV SL4 1分别在E .coliBL2 1(DE3)plys中 4 4℃诱导 6h、4 2℃诱导 7h得到较高表达 ,经SDS PAGE、薄层扫描分析表明 ,目的蛋白分别占菌体总蛋白的14 .35 9%和 2 3.4 82 % ,目的蛋白经复性后可与HIV 1抗原条发生良好的结合反应 ,并且SL4 1可激活外周血淋巴细胞 (PBMC)并介导其杀伤稳定表达HIV 1gp16 0蛋白的靶细胞。结论 成功得到ScFv4 1与SEA融合表达蛋白SL4 1,为研制抗HIV 1重组导向毒素奠定基础。
- 王宏金宁一徐一鸣金洪涛张立树江文正
- 关键词：活性检测淋巴细胞
- 人LIGHT胞外段基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:构建人LIGHT胞外段基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:从人外周血单核细胞来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,通过RT-PCR得到LIGHT胞外段基因,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果:RT-PCR扩增出了大小为543bp的LIGHT胞外段基因,经测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出Mr约为41000的蛋白。结论:成功地克隆了人LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌中进行了表达为进一步研究LIGHT的功能打下了基础。
- 郝文丽江文正闻洁君樊燕钱旻
- 关键词：LIGHT基因克隆原核表达大肠杆菌
- NK细胞对自身T淋巴细胞杀伤作用的研究
- 研究背景:NK细胞是机体天然免疫和适应性免疫系统中一种重要的免疫细胞,它通过杀伤病毒感染细胞或肿瘤细胞,在抗病毒免疫和免疫监视中发挥重要作用。随着对NK细胞本质的认识不断深入,越多越多的证据证明NK细胞具有极强的免疫调节...
- 江文正龙凤英孔晓波陈冉
- 关键词：NKT淋巴细胞脱颗粒杀伤
- 文献传递
- 颗粒酶K对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响及其机制的研究
- 研究背景:目前已有文献和本实验室前期的研究结果发现,颗粒酶K(GzmK)可以通过激活蛋白酶激活受体(PAR)参与炎症反应。蛋白酶激活受体是G-蛋白偶联受体,能够被蛋白酶水解而激活。已有大量的证据表明PAR在包括乳腺癌、卵...
- 孔晓波陈冉史亚茹李贞龙张姜江文正
- 关键词：细胞增殖细胞迁移蛋白酶激活受体
- 文献传递
- 表达可溶性PD-1的嵌合抗原受体CAR基因及应用
- 本申请公开了一种表达可溶性PD‑1的嵌合抗原受体CAR基因及应用。所述CAR基因包括依次顺序连接的抗原结合结构域基因、跨膜结构域基因、胞内结构域基因和可溶性PD‑1基因，所述可溶性PD‑1为PD‑1的胞外段区域，优选的，...
- 江文正王熙何聪刘明耀席在喜
- 文献传递
- 共表达中国株HIV-1gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒研究被引量：2
- 2003年
- 目的 构建共表达中国株HIV 1gp12 0与人白细胞介素 6 (IL 6 )的重组鸡痘病毒。方法分别将HIV 1gp12 0基因和hIL 6基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI P7.5和P7.5串联启动子下游 ,构建重组鸡痘病毒表达质粒pUTA GP IL6。利用脂质体法将重组质粒和鸡痘病毒2 82E4株共转染鸡胚成纤维细胞。经BUdR加压筛选 3次后 ,重组病毒分别用PCR、间接免疫荧光试验和Westernblot进行鉴定 ,并进行小鼠免疫研究。结果 重组病毒基因组中可扩增出 1.4kb大小片段 ,重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质 ,表达产物的Westernblot分析表明重组病毒可表达gp12 0和hIL 6蛋白。重组病毒可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答。结论 成功构建了共表达中国株HIV 1gp12 0与hIL 6的重组鸡痘病毒 ,为研制HIV 1基因工程活载体疫苗提供有益的资料。
- 江文正金宁一李子健张立树王宏金洪涛
- 关键词：重组鸡痘病毒
- 一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途
- 本发明涉及一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途，具体地，本发明提供了一种表达靶向HLA结合域的第一CAR和靶向肿瘤抗原的第二CAR。本发明的工程化免疫细胞可选择性杀伤肿瘤细胞，还可保护正常细胞免受杀伤作用。
- 江文正陶雷胡雪菲苏琼
- 文献传递
- 人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达被引量：2
- 2003年
- 目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实。结果:获得了HIV-2ROD gag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中的分泌表达,表达产物可被HIV-2抗血清识别,分子量约为57kD。结论:pPIC9-gag重组质粒在甲醇营养型酵母菌中可经甲醇诱导产生HIV-2ROD gag蛋白,该蛋白具有强免疫学活性。
- 李子健金宁一江文正张应玖张立树孙兆增
- 关键词：HIV-2毕赤酵母
- HIV-1外膜蛋白与IFNα在重组鸡痘病毒中的共表达及特性分析被引量：1
- 2004年
- 江文正金宁一李子健张立树韩文瑜
- 关键词：IFNΑ重组鸡痘病毒共表达
- 嵌合抗原受体NK细胞及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种嵌合抗原受体NK细胞及其制备方法和应用，涉及CAR‑NK细胞治疗技术领域。本发明公开的嵌合抗原受体NK细胞表达靶向肿瘤相关抗原的嵌合抗原受体且所述嵌合抗原受体NK细胞的GPR97基因被敲除或其表达受到抑制...
- 江文正高尧鑫
