郝文丽
- 作品数：14 被引量：49H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：上海市青年科技启明星计划中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人LIGHT胞外段基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:构建人LIGHT胞外段基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:从人外周血单核细胞来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,通过RT-PCR得到LIGHT胞外段基因,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果:RT-PCR扩增出了大小为543bp的LIGHT胞外段基因,经测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出Mr约为41000的蛋白。结论:成功地克隆了人LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌中进行了表达为进一步研究LIGHT的功能打下了基础。
- 郝文丽江文正闻洁君樊燕钱旻
- 关键词：LIGHT基因克隆原核表达大肠杆菌
- 朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测
- 2016年
- 为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。
- 张腾龙薄乐英那郝文丽武智勇王雄孟轲音万家余陈志宝
- 关键词：朊病毒生物标记可视化
- LIGHT表达质粒增强HIV-1 Nef核酸疫苗免疫原性的研究
- 研究背景:核酸疫苗的免疫效果在不同动物个体中差异较大,某些肿瘤及病毒的T、B细胞表位抗原性弱,难以诱导有效的T、B细胞免疫应答,提高核酸疫苗的免疫效果已成为研究热点。基因佐剂是将编码某些细胞因子及T、B细胞表面共刺激分子...
- 闻洁君郝文丽樊燕杜佳妮龙凤英江文正
- 关键词：HIV-1NEF核酸疫苗LIGHT免疫佐剂
- 文献传递
- 一种人LIGHT-Fc融合蛋白的制备方法
- 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统制备人LIGHT-Fc融合蛋白的方法，步骤包括(1)构建重组表达质粒pPIC9K-LIGHT-Fc；(2)表达人LIGHT-Fc融合蛋白酵母工程菌的制备及筛选；(3)人LIGHT-Fc...
- 江文正郝文丽闻洁君樊燕杜佳妮
- 文献传递
- 黄芩苷对小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的保护作用研究被引量：2
- 2014年
- 目的:研究黄芩苷(Baicalin)对金黄色葡萄球菌肺炎小鼠的保护作用。方法:建立体内金葡菌感染肺炎小鼠模型,检测通过黄芩苷治疗后模型小鼠死亡率、肺湿/干重比例、菌落定植数以及肺泡灌洗液内细胞因子的变化。结果:黄芩苷能够显著降低金葡菌肺炎小鼠的死亡率,小鼠肺脏金葡菌的定植数量及肺脏湿重/干重比;肺泡灌洗液分析试验结果表明,黄芩苷治疗显著减少肺泡灌洗液中主要炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。结论:黄芩苷可有效治疗小鼠金葡菌肺炎,同时为创新性抗感染药物的研发奠定坚实的基础。
- 朱淼李琳张腾龙博乐郝文丽陈志宝
- 关键词：黄芩苷金黄色葡萄球菌菌落数细胞因子
- 人LIGHT基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达研究
- 肿瘤坏死因子超家族成员可诱导多种生物学效应,包括细胞的生长、分化以及死亡。其家族成员在炎症反应的调节、对感染的免疫反应以及组织的自稳态中都起到了重要的作用。LIGHT是TNF家族具有特殊作用的成员之一,它不仅可以调节肿瘤...
- 郝文丽
- 关键词：LIGHT原核表达大肠杆菌毕赤酵母
- 文献传递
- HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究被引量：2
- 2010年
- 目的:构建HIV-1 Nef基因的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,初步优化其表达条件。方法:利用特异性引物PCR扩增获得HIV-1 Nef基因片段,PCR产物经限制性内切酶双酶切后连接载体pET24a(+),构建重组质粒pET24a(+)-Nef。经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白,优化表达条件,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物。结果:PCR扩增获得618bpDNA片段,酶切鉴定结果表明HIV Nef基因已克隆入原核表达载体pET24a(+)中,测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组菌诱导后可表达相对分子质量(Mr)符合预期的融合蛋白。0.1mmol/LIPTG在37℃诱导6h为最佳表达条件,重组蛋白表达量可由15.8%增加到43.9%。结论:在大肠杆菌中成功地表达了HIV Nef蛋白,并初步获得了最优化的表达条件。
- 闻洁君江文正郝文丽杜佳妮樊燕钱旻
- 关键词：NEF蛋白原核表达
- 人LIGHT-Fc融合蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定
- 2015年
- 目的利用酵母表达系统制备人LIGHT-Fc融合蛋白。方法利用基因工程方法构建含人LIGHT胞外段基因和人Ig G4 Fc基因的重组质粒p PIC9K-LIGHT-Fc,经SalⅠ线性化后电转化感受态酵母菌GS115,PCR鉴定重组转化子。将阳性重组转化子经甲醇诱导表达后,RT-PCR法检测目的基因的转录水平,SDS-PAGE及Western blot法进行表达产物的鉴定。结果表达质粒p PIC9K-LIGHT-Fc经酶切及测序鉴定,证明构建正确。10个重组子均为Mut+型阳性转化子,经甲醇诱导后可扩增出特异性目的基因片段。表达的重组LIGHT-Fc融合蛋白相对分子质量约45 000,可与鼠抗人LIGHT多克隆抗体发生特异性结合。结论人LIGHT-Fc融合蛋白在毕赤酵母中已成功获得了表达,为进一步开展其生物学功能的研究奠定了基础。
- 郝文丽赵勇任华江文正
- 关键词：LIGHT毕赤酵母基因表达
- 复合因素建立亚健康小鼠模型被引量：3
- 2015年
- 目的:复合因素建立与临床症状相似的亚健康小鼠模型。方法:采用强迫游泳、睡眠剥夺、装管束缚、夹鼠尾应激建立亚健康小鼠模型,通过小鼠外观、行为学数据及病理检测鉴定模型是否成功。结果:造模结束后,模型组小鼠外观、体重、自主活动量、避暗次数、绝望时间、力竭游泳时间与对照组小鼠相比差异显著(P<0.05),病理结果显示模型组小鼠未见异常。结论:复合因素成功建立亚健康小鼠模型。
- 郝文丽陈志宝赵蕊薄乐张腾龙
- 关键词：小鼠
- 枸杞多糖对亚健康小鼠改善作用的研究
- 亚健康（sub-health）已成为危害人类健康的重大隐患之一，严重影响人类的生活，因此，寻找一种科学、可行的途径来改善亚健康症状成为该领域的研究热点。中医药在治疗亚健康方面显示出独特的优势。本实验采用强迫游泳、睡眠剥夺...
- 郝文丽
- 关键词：亚健康枸杞多糖抗氧化免疫抗疲劳
- 文献传递
