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人LIGHT胞外段基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2: 2009年; 目的:构建人LIGHT胞外段基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:从人外周血单核细胞来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,通过RT-PCR得到LIGHT胞外段基因,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果:RT-PCR扩增出了大小为543bp的LIGHT胞外段基因,经测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出Mr约为41000的蛋白。结论:成功地克隆了人LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌中进行了表达为进一步研究LIGHT的功能打下了基础。; 郝文丽江文正闻洁君樊燕钱旻; 关键词：LIGHT 基因克隆原核表达大肠杆菌

LIGHT表达质粒增强HIV-1 Nef核酸疫苗免疫原性的研究: 研究背景:核酸疫苗的免疫效果在不同动物个体中差异较大,某些肿瘤及病毒的T、B细胞表位抗原性弱,难以诱导有效的T、B细胞免疫应答,提高核酸疫苗的免疫效果已成为研究热点。基因佐剂是将编码某些细胞因子及T、B细胞表面共刺激分子...; 闻洁君郝文丽樊燕杜佳妮龙凤英江文正; 关键词：HIV-1 NEF 核酸疫苗 LIGHT 免疫佐剂; 文献传递

一种人LIGHT-Fc融合蛋白的制备方法: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统制备人LIGHT-Fc融合蛋白的方法，步骤包括(1)构建重组表达质粒pPIC9K-LIGHT-Fc；(2)表达人LIGHT-Fc融合蛋白酵母工程菌的制备及筛选；(3)人LIGHT-Fc...; 江文正郝文丽闻洁君樊燕杜佳妮; 文献传递

小鼠B7-DC基因沉默对树突状细胞诱导的抗乙肝病毒免疫的研究: 乙型肝炎病毒是一种非细胞裂解性病毒,它是引起急、慢性肝炎的主要病原。研究发现,在慢性乙肝患者体内的CD8+ T细胞的增殖和效应能力很弱,提示了增强病毒特异性T细胞的反应能力可能是控制慢性乙肝病毒持续感染的一条途径。目前,...; 樊燕; 关键词：树突状细胞疫苗免疫治疗乙型肝炎病毒

HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究被引量：2: 2010年; 目的:构建HIV-1 Nef基因的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,初步优化其表达条件。方法:利用特异性引物PCR扩增获得HIV-1 Nef基因片段,PCR产物经限制性内切酶双酶切后连接载体pET24a(+),构建重组质粒pET24a(+)-Nef。经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白,优化表达条件,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物。结果:PCR扩增获得618bpDNA片段,酶切鉴定结果表明HIV Nef基因已克隆入原核表达载体pET24a(+)中,测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组菌诱导后可表达相对分子质量(Mr)符合预期的融合蛋白。0.1mmol/LIPTG在37℃诱导6h为最佳表达条件,重组蛋白表达量可由15.8%增加到43.9%。结论:在大肠杆菌中成功地表达了HIV Nef蛋白,并初步获得了最优化的表达条件。; 闻洁君江文正郝文丽杜佳妮樊燕钱旻; 关键词：NEF蛋白原核表达

B7-H1基因沉默对树突状细胞诱导的抗乙肝病毒免疫的影响: 本研究利用RNA干扰的方法沉默树突状细胞中具有负向调节作用的分子B7-H1基因的表达，研究了它对Dc疫苗抗病毒效果的影响。结果显示，B7-H1特异性的siRNA负载HBV表面抗原的优势表位肽后可诱导更强的CTL活性，HB...; 江丈正樊燕张亚丽闻洁君; 关键词：树突状细胞 HRV B7-H1 乙肝病毒 DC疫苗; 文献传递

小鼠LIGHT胞外段基因原核表达质粒的构建及表达被引量：1: 2008年; 目的构建含有LIGHT胞外段的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。方法从由小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增LIGHT胞外段,克隆至原核表达载体pET-24a(+)中,构建重组表达质粒pET24-LIGHTECD。重组质粒经酶切鉴定及序列测定后,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果RT-PCR扩增出了525bp LIGHT胞外段的cDNA,经测序证实其序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出相对分子质量为20000的LIGHT胞外段蛋白。结论成功地克隆了小鼠LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌中进行了表达,为进一步研究LIGHT的功能打下了基础。; 张亚丽江文正樊燕钱旻; 关键词：LIGHT 基因克隆原核表达

一种抑制小鼠B7-DC基因表达的shRNA真核表达载体的构建方法: 本发明公开了一种抑制小鼠B7-DC基因表达的shRNA真核表达载体的构建方法，其构建流程是：根据Genebank提供的小鼠B7-DC的基因序列，选取编码区第361～379位核苷酸序列为靶序列设计并合成引物，通过引物退火，...; 江文正樊燕闻洁君郝文丽; 文献传递

一种抑制小鼠B7－DC基因表达的shRNA真核表达载体的构建方法: 本发明公开了一种抑制小鼠B7－DC基因表达的shRNA真核表达载体的构建方法，其构建流程是：根据Genebank提供的小鼠B7－DC的基因序列，选取编码区第361～379位核苷酸序列为靶序列设计并合成引物，通过引物退火，...; 江文正樊燕闻洁君郝文丽; 文献传递

小鼠B7-DC胞外段原核表达载体的构建及表达: 2008年; 目的:构建小鼠B7-DC胞外段基因的原核表达载体,并在E.coli BL21中诱导表达。方法:从小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(DC)中提取总RNA,经RT-PCR扩增B7-DC胞外段,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达质粒pET32a(+)-B7-DCECD。重组质粒经双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coli BL21,经IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果:获得全长为582bp的小鼠B7-DC胞外段基因,经测序证实其序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出Mr约为41000的B7-DC胞外段蛋白。结论:成功地构建了小鼠B7-DC胞外段基因原核表达载体,并在E.coli BL21中进行表达,为进一步研究B7-DC的功能奠定实验基础。; 樊燕江文正张亚丽闻洁君郝文丽钱旻; 关键词：基因克隆原核表达

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樊燕