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荧光假单胞菌短链脱氢酶的克隆、表达及酶学性质分析: 2011年; 为了研究荧光假单胞菌中短链脱氢酶的生理角色和催化特性,从荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens GIM1.49基因组DNA克隆表达了一个短链脱氢酶的编码基因pfd,并分析了该基因产物的酶学性质。基因pfd全长684 bp,编码227个氨基酸,推算分子量为24.2 kDa。将携带短链脱氢酶基因的重组质粒pET28b-pfd转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,得到了28 kDa的表达产物。重组荧光假单胞菌短链脱氢酶(PFD)能氧化4-氯-3-羟基丁酸乙酯、1-苯乙醇、苯甲醇、仲丁醇和还原4-氯-乙酰乙酸乙酯、2-溴-苯乙酮、4-溴-苯乙酮等底物。以4-氯-3-羟基丁酸乙酯为底物时活力最高,Km值为186.40 mmol/L,Vmax为89.56 U/mg。氧化4-氯-3-羟基丁酸乙酯时,最适反应温度和pH分别为12℃和10.5,倾向于利用NAD+作辅酶;而还原4-氯-乙酰乙酸乙酯时,最适温度和pH为24℃和8.8,倾向于利用NADPH作辅酶。重组PFD能耐受50%(V/V)的甲醇等有机助溶剂,Ca2+(1 mmol/L)和EDTA(5 mmol/L)对其酶活有一定的促进作用。上述结果表明,重组PFD是一个新型的短链脱氢酶,其代谢角色推测与卤代次级醇的氧化降解有关。; 薛群应向贤杨池汪钊; 关键词：荧光假单胞菌酶学性质

L-异亮氨酸产生菌的代谢改造与发酵控制策略被引量：2: 2012年; L-异亮氨酸是人体必须氨基酸,广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。本文综述了谷氨酸棒杆菌和大肠杆菌合成L-异亮氨酸的调控机制,重点阐述了代谢工程技术在L-异亮氨酸产生菌改造中的应用,并讨论了L-异亮氨酸发酵中的主要影响因素.; 杨池应向贤熊斌宋清清汪钊; 关键词：L-异亮氨酸代谢工程发酵条件

红串红球菌及其在微生物催化制备手性芳香醇中的应用: 本发明提供了一株新菌株——红串红球菌(Rhodococcus erythropolis)WZ010，及其在选择性氧化混旋芳香醇制备R-型芳香醇和不对称还原芳香酮生成S-型芳香醇中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心...; 应向贤汪钊杨池熊斌

一种基于NAD(P)H荧光的醇脱氢酶的筛选鉴定方法: 本发明提供了一种基于NAD(P)H荧光的醇脱氢酶的快速筛选鉴定方法，所述方法基于醇脱氢酶以NAD(H)或NADP(H)为辅酶的特性，以96孔微孔板为反应容器，在反应体系中加入待测样本对醇进行氧化，在醇氧化的同时把不发射荧...; 应向贤汪钊杨池熊斌; 文献传递

系统生物学技术在氨基酸生产菌种改良中的应用被引量：1: 2011年; 氨基酸是蛋白质的基本组成单位,广泛应用于医药、食品、添加剂、化妆品、科学研究等领域。氨基酸发酵是当今的主要氨基酸生产方式,而如何构建优良的菌种是氨基酸发酵所面临的核心挑战之一。基因组学、转录组学、蛋白质组学及代谢组学等技术的出现及快速发展,为氨基酸生产菌种的选育和代谢控制提供了新的机遇。本文综述了以多组学技术为核心的系统生物学技术及其在氨基酸生产菌种改良上的应用,并讨论了其发展前景。; 薛群应向贤杨池汪钊; 关键词：系统生物学菌种改良

醇脱氢酶的快速筛选及分子改造: 醇脱氢酶广泛地存在于细菌、酵母和霉菌等微生物中,在胞内代谢中具有重要的生理意义,催化醇的氧化或酮、醛的还原。醇脱氢酶作为一类重要的生物催化剂,可通过选择性氧化或不对称还原制备药物中间体—手性醇。本论文建立了一种醇脱氢酶的...; 杨池; 关键词：醇脱氢酶定点突变; 文献传递

红串红球菌及其在微生物催化制备手性芳香醇中的应用: 本发明提供了一株新菌株——红串红球菌(Rhodococcus erythropolis)WZ010，及其在选择性氧化混旋芳香醇制备R-型芳香醇和不对称还原芳香酮生成S-型芳香醇中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心...; 应向贤汪钊杨池熊斌; 文献传递

地表地芽孢杆菌短链脱氢酶的克隆表达及酶学性质分析: 为了研究地表地芽孢杆菌中短链脱氢酶的催化特性,从地表地芽孢杆菌Geobacillus subterraneus基因组DNA克隆表达了一个短链脱氢酶的编码基因gsd,并分析了该基因产物的酶学性质.基因gsd全长555 bp...; 应向贤薛群杨池汪钊

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杨池