李玉英
- 作品数：24 被引量：135H指数：7
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 中国人促红细胞生成素基因组的克隆及其在COS-7细胞中的表达被引量：2
- 1994年
- 本文利用PCR技术,从正常人胎肝染色体DNA库中分离克隆了长度分别为506bp,465bp的中国人促红细胞生成素(EPO)基因组片段。506bp基因片段包括外显子2(信号肽),内含子2和外显子3;465bp片段包括外显子4,内含子4和外显子5。通过在引物中设置的酶切位点将两个克隆片段进行了正确的拼接,从而得到了约1.0kb的EPO次全基因组片段,它包括除信号肽中第2,3,4位氨基酸外的所有编码区及两个内含子序列。 所克隆的次全EPO基因组插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了3种不同的转移载体质粒,分别转染导入COS-7细胞后,3种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。本工作证明仅含有内含子2,4序列,去除负调控区和氧敏感区序列的人次全EPO基因组可以在COS-7细胞中获得表达。
- 黄利文韩峰郑秋君马学军陈广南李玉英蒋盘宏吴淑华侯云德
- 关键词：聚合酶链反应EPO
- 复方干扰素抗病毒合剂及其制作技术和用途
- 复方干扰素抗病毒合剂是基于发现黄芪与干扰素的抗感冒病毒及其它病毒有明显的协同作用而研制的一种广谱抗病毒合剂,其中主要成分为黄芪提取液,重组人α2b型干扰素和保护剂。0.3%黄芪与10万单位干扰素联合应用可产生约25万单位...
- 张丽兰侯云德洪涛李玉英马国良钱止维
- 文献传递
- 抗肿瘤的脑啡肽-干扰素融合蛋白及其制法
- 一种新型、高效的抗肿瘤脑啡肽-干扰素融合蛋白，它是由氨基端的脑啡肽五肽部分(Try-Gly-Gly-Phe-Met)和羧基端的干扰素部分，通过中间连接肽三肽(Ser-Gly-Ser)进行连接，总分子量为21kD。其中脑啡...
- 黎孟枫张沁曾庆侯云德张智清李玉英
- 文献传递
- 一组通用性温控型大肠杆菌高效表达载体的组建及其应用
- 张智清侯云德李福胜金冬雁金奇李玉英
- 用原核细胞生产多肽药物的关键是要有高效的原核表达载体，使外源基因能转送到细菌细胞内并获得高效表达。我们采用DNA重组技术和人工合成DNA的方法组建了一组通用性较强的，可温控的，可表达非融合蛋白的高拷贝高效表达载体-pBV...
- 关键词：
- 关键词：大肠杆菌高效表达载体DNA重组
- 丙型肝炎病毒核壳蛋白抗原的化学合成及其在血清学诊断中的应用被引量：7
- 1992年
- 选取丙型肝炎病毒(HCV)核壳蛋白区两个可能含有优势抗原表位的19和16氨基酸的肽殴(C-19肽和C-16肽),利用固相多肽合成技术进行了化学合成。经用反相高压液相层析(HPLC)及脉冲液相多肽测序技术检定合成肽产品的纯度及序列后,以C-19和C-16肽作为包被抗原组装成检测HCV血清抗体的ELISA诊断试剂。用所组装的合成肽试剂检测中国药品生物制品检定所提供的HCV标准参比血清,并比较利用该试剂和美国Abbott实验室生产的HCV第二代EIA诊断试剂平行检测109份献血员血清的结果,表明C-19肽能够特异、重复、灵敏地检出HCV血清抗体,可以作为我国第一代HCV诊断试剂的合成肽抗原。
- 金冬雁李景源杨永平薛水星吴长龙刘崇柏李玉英侯云德
- 关键词：丙型肝炎病毒ELISA肝炎病毒
- 人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关被引量：1
- 1995年
- 采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性，以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明，ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明，ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体，而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显，说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性，与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。
- 陈望秋张笑冰迟捷李玉英段书敏张丽兰侯云德
- 关键词：Γ干扰素融合蛋白表皮生长因子受体抗肿瘤性
- 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子cDNA 5'端的修饰提高其在大肠杆菌的表达被引量：19
- 1993年
- 应用聚合酶链反应(PCR)法和人工合成的寡聚DNA引物,对人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的cDNA作了修饰。在不改变氨基酸的前提下,将一些G或C改成A或T,以避免形成不利的二级结构,并将一些密码子换成大肠杆菌喜用的密码子。修饰后的GMCSF cDNA在大肠杆菌的表达水平高于其母株。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明其表达量约占菌体总蛋白的20％,免疫学和生物学活性检测表明该表达产物具有天然GM-CSF的构型和生物学活性。部分纯化的重组人GM-CSF已用于维持依赖人GM-CSF的TF-1细胞系的生长。
- 张智清张颖路秀华王世骢邵魁马丽娟李玉英周圆姚立红贺秉坤侯云德
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 人γ干扰素突变体(rIFN-γ132-PGIL)的构建及其生物学活性的测定被引量：4
- 1989年
- 利用DNA重组技术,去掉人γ干扰素(IFNγ)基因3′端含编码多肽羧基(C)端11个氨基酸的核苷酸序列,与编码P,G,I,L的DNA序列相连接,构成IFNγ突变体(rIFN-γ132-PGIL)基因,将后者插入pBV220P_RP_L串连启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,在CIts857基因的调节下,通过升温诱导,获得了高效表达,表达量约占菌体可溶性蛋白的30％以上,抗病毒活性平均可达4.9×10^-8U/L,比母体菌株高10倍。SDS—PAGE结果表明,rIFN-γ132—PGIL分子量为17kd。
- 王晓鸣李玉英金奇张智清赵小侠侯云德
- 关键词：Γ干扰素生物学活性
- 带有EGF受体干扰序列的γ干扰素新分子抗肿瘤细胞增殖活性的提高被引量：4
- 1991年
- 利用基因工程技术,将天然IFN-γ分子的N端132个氨基酸与带有上皮生长因子(EGF)样多肽C端保守序列融合,构建了干扰素重组体IFN-γ132PGIX_(16).其中X_(16)由EGF样多肽C端16个氨基酸组成,PGI为连接肽序列。将此重组体基因插入表达载体pBV220P_RP_L串连启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,在cIts857基因的调节下,通过升温诱导表达.表达产物与其母体天然IFN-γ相比,不仅保持了较高的抗病毒活性,抗病毒滴度达530MU/L菌液,而且明显地提高了抗肿瘤细胞增殖活性.在EGF存在的条件下,干扰素重组体的抗鼻咽癌细胞CNE-2增殖活性明显高于其母体分子(p<0.01).提示重组体分子IFN-γ132PGIX_(16)同时具有EGF受体干扰活性.
- 王晓鸣金奇李玉英张智清赵明侯云德
- 关键词：IFN-Γ抗肿瘤细胞增殖活性
- 重组人α2a干扰素的高效表达与纯化被引量：14
- 1991年
- 构建了人α2a型干扰素的表达载体,并在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量平均为10~ IU/L菌液。还对其表达产物进行了纯化。经盐酸胍裂解菌体、硫酸铵沉淀、酸化处理,再经阴、阳离子交换层析和单克隆抗体亲和层析,使表达产物纯化了1072倍,比活性达1.2×IO~ IU/mg蛋白,达到序列纯,回收率达54％。表达产物N端21个氨基酸序列分析结果与IFN-α2a cDNA推导的序列相符合。
- 智刚周园李玉英张智清苏成芝侯云德
- 关键词：干扰素基因表达
