张智清
- 作品数：164 被引量：728H指数：10
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 人B7逆转录病毒基因转移体系的建立及在原代培养肾癌细胞中的表达
- 1998年
- Ｔ淋巴细胞的活化需要双信号刺激，关于Ｔ淋巴细胞共刺激信号的分子生物学机制目前尚未完全知晓，可能与抗原呈递细胞（ＡＰＣｓ）上的多种分子有关，而其中最引人注意的是Ｂ７分子［１］。为探讨Ｂ７基因在肾癌治疗中的作用。本实验建立了介导Ｂ７基因的逆转录病毒基因转...
- 郭应禄邢念增张智清张智清俞莉章朱丽华刘漓波
- 关键词：肾肿瘤肾癌细胞原代培养B7基因
- UroplakinII基因和启动子在人膀胱癌中的研究
- 郭应禄朱宏建张智清辛殿祺席志军叶雄俊臧桐张志文
- 本研究应用免疫组化法研究了UroplakinⅡ基因与膀胱癌细胞分化的关系，发现UroplakinⅡ基因与膀胱癌细胞分化成负相关关系。克隆并分析了人UroplakinⅡ启动子各部分功能，人UroplakinⅡ启动子长度为2...
- 关键词：
- 关键词：膀胱癌
- 带有EGF受体干扰序列的γ干扰素新分子抗肿瘤细胞增殖活性的提高被引量：4
- 1991年
- 利用基因工程技术,将天然IFN-γ分子的N端132个氨基酸与带有上皮生长因子(EGF)样多肽C端保守序列融合,构建了干扰素重组体IFN-γ132PGIX_(16).其中X_(16)由EGF样多肽C端16个氨基酸组成,PGI为连接肽序列。将此重组体基因插入表达载体pBV220P_RP_L串连启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,在cIts857基因的调节下,通过升温诱导表达.表达产物与其母体天然IFN-γ相比,不仅保持了较高的抗病毒活性,抗病毒滴度达530MU/L菌液,而且明显地提高了抗肿瘤细胞增殖活性.在EGF存在的条件下,干扰素重组体的抗鼻咽癌细胞CNE-2增殖活性明显高于其母体分子(p<0.01).提示重组体分子IFN-γ132PGIX_(16)同时具有EGF受体干扰活性.
- 王晓鸣金奇李玉英张智清赵明侯云德
- 关键词：IFN-Γ抗肿瘤细胞增殖活性
- 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...
- 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立
- 文献传递
- 甲状旁腺素相关蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- 采用ＲＴＰＣＲ方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白（Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｎｏｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＴＨｒＰ）ｃＤＮＡ，其核苷酸序列与国外发表资料相比，有６个核苷酸不同，其中仅９２位密码子的不同导致氨基酸变异，即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的ＰＴＨｒＰｃＤＮＡ插到原核表达载体ｐＥＴ３ａ的Ｔ７噬菌体启动子下游，转化大肠杆菌后得到高效表达，并经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。
- 刘红兵熊卫东安乃莉姚立红钭理强张智清
- 关键词：甲状旁腺素相关蛋白克隆
- 流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其重组毒株及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种流感病毒哺乳动物细胞高产毒株、其基因重组毒株及其制备和应用，所述毒株包括SEQ.NO.1、SEQ.NO.2、SEQ.NO.3、SEQ.NO.4、SEQ.NO.5、SEQ.NO.6、SEQ.NO.7、SEQ...
- 张智清董婕孙梅生徐红张立国吴昆昱齐立
- 文献传递
- 人肝癌特异性EB病毒载体-p^(EBAF)介导hGM-CSF基因的转移及表达被引量：3
- 2001年
- 目的 :探索人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (hGM -CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法 :构建 pEBAF/hGM -CSF基因克隆 ,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白 (AFP)的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC772 1,构建两转基因的细胞克隆HepG2 /hGM -CSF、SMMC772 1/hGM-CSF ,用MTT比色法测定细胞上清中hGM -CSF活性。结果 :HepG2 /hGM -CSF细胞上清hGM -CSF活性平均为 46 .5ng/ml/10 6/2 4h ,SMMC772 1细胞上清中无明显hGM -CSF活性。结论
- 李玉富张俊萍孙声桃李继昌李福胜张智清
- 关键词：基因治疗肝癌
- 逆转录病毒表达载体N2A／hGM－CSF的构建及其在COS－7细胞的初步表达被引量：1
- 1995年
- 用特异性核酸内切酶ＢａｍＨＩ剪切质粒ｐＣＤ／ｈＧＭ－ＣＳＦ，制备人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因片段，低融点胶回收后，连接至Ｎ２Ａ载体ＢｇｌⅡ位点，转化大肠杆菌ＤＨ５ａ，经快提质粒进行酶切鉴定和核酸打点杂交筛选出重组质粒Ｎ２Ａ／ｈＧＭ－ＣＳＦ。利用ＤＥＡＥ－葡聚糖介导该重组质粒转化ＣＯＳ－７细胞，收集４８ｈ培养上清液，免疫学和生物学活性检测表明该上清中表达产物具有天然ＧＭ－ＣＳＦ的活性，而用质粒Ｎ２Ａ转化ＣＯＳ－７细胞，培养上清中未检测出ＧＭ－ＣＳＦ活性。
- 陈庆华路秀华张智清毕秋娜李玉英侯云德
- 关键词：HGM-CSF集落刺激因子逆转录病毒COS-7细胞
- sTNFR-IgGFc融合基因在内皮细胞中的表达及其对小鼠关节炎模型的基因治疗研究被引量：5
- 2006年
- 可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)可以拮抗肿瘤坏死因子的活性,因此已被用来治疗与TNF相关的炎性疾病。本研究将sTNFR与IgGFc片段的融合蛋白基因克隆到真核表达载体pStar上,转染到人的内皮细胞中,获得了表达。表达的sTNFR-IgGFc能够拮抗TNFα对L929细胞的细胞毒活性。将该质粒DNA与脂质体混合,经尾静脉注射到Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠体内后,应用RT-PCR在鼠的肝脏检测到了sTNFR-IgGFc的表达,并显著地改善了治疗组小鼠关节炎症状和病理反应。这表明抗TNF基因治疗有可能作为治疗类风湿性关节炎的新的途径。
- 何婕姚立红陈爱君喻宏贾润清程从升郇丽芳张智清
- 一种重组人α1型干扰素突变体IFN-α1/86D的纯化与鉴定被引量：5
- 1993年
- 本文研究了重组人α1型干扰素突变体IFN-α1/86D在摇瓶培养和分批发酵培养的重组大肠杆菌DH5α株中的表达动态,并采用阳离子交换层析和抗α1型干扰素单克隆抗体亲和层析的两步流程对其进行了纯化,得到SDS-PAGE纯及高效液相层析(HPLC)纯的IFN-α1/86D产品,共比活性为2.3×10~7单位/毫克蛋白。N端氨基酸序列测定的结果表明,纯化产品的纯度在95％以上,但其N端不均一,产品中含有两种N端序列正确的IFN-α1/86D活性分子,即约75％为去Met分子和约25％为带Met分子。
- 周圆金冬雁张智清王伟黎志良迟捷李玉英侯云德
- 关键词：干扰素蛋白提纯抗病毒活性
