侯云德
- 作品数：422 被引量：2,000H指数：22
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 一组通用性温控型大肠杆菌高效表达载体的组建及其应用
- 张智清侯云德李福胜金冬雁金奇李玉英
- 用原核细胞生产多肽药物的关键是要有高效的原核表达载体，使外源基因能转送到细菌细胞内并获得高效表达。我们采用DNA重组技术和人工合成DNA的方法组建了一组通用性较强的，可温控的，可表达非融合蛋白的高拷贝高效表达载体-pBV...
- 关键词：
- 关键词：大肠杆菌高效表达载体DNA重组
- 大肠杆菌M增强子样序列结构和功能的研究被引量：11
- 1997年
- 构建了以β-半乳精苷酶基因为报告基因,适用于原核增强序列研究的pAC载体.应用该载体进行的转录增强实验证明,一段已克隆的具有增强基因表达功能的大肠杆菌染色体M序列,对被调控基因的增强作用是发生在转录水平,其能使β-半乳糖苦酶基因特异性的mRNA转录增加6.5倍,与应用该载体测得的表达增强活性一致.通过构建一系列正、反向M序列缺失突变体并对其进行的研究表明,在靠近M序列5’端的340bp区域内存在3个相互作用、与增强活性密切相关的部位,分别位于M序列3’端上游770,610和470bp处.应用PCR技术对大肠杆菌染色体对应于M序列5’端上游207bp进行了克隆,研究显示M序列具有功能上的完整性.
- 谢明吴淑华栾向红徐云鹤万晓余潘卫侯云德
- 关键词：大肠杆菌染色体
- 人免疫缺损病毒1型gp41蛋白N端优势抗原表位相应肽段的化学合成
- 1992年
- 利用代表优势抗原表位的合成寡肽作为抗原,检测人免疫缺损病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)的血清抗体,是近年来在HIV检测方面的重要发展趋势。与病毒裂解物及基因工程表达产物等抗原相比,合成肽抗原在特异性、重复性及HIV-1与HIV-2的鉴别诊断等方面具有一定的优点。众多的研究资料表明,HIV穿膜蛋白gp41的N端显然含有比较保守的优势抗原表位,因此,目前文献中用于检测HIV抗体的合成肽多数都在这一区段内进行设计。
- 薛水星金冬雁王哲项文凯吴长龙邵一鸣曾毅侯云德
- 关键词：艾滋病毒多肽
- rhIFN-β1a cDNA在CHO细胞上的表达
- 2004年
- 目的 在CHO细胞上表达rhIFN βcDNA。 方法 利用脂质体技术 ,将含hIFN β基因的pRC CMV IFNβ DNA载体和pSV2dhfr DNA质粒按 3∶1的比例转染CHO k1dhfr 细胞 ,后者是选择性标记。筛选在缺乏胸腺嘧啶的选择培养基生长的单个细胞克隆 ,通过MTX加压扩增与dhfr基因共转染IFNβ基因。筛选的细胞株通过大规模培养 ,收集培养液经一系列的步骤纯化。结果 能够耐受 0 .6 μmol LMTX的细胞可产生IFN 10 5unitperday 10 6cells ,CHO细胞中表达的hIFN β纯化后的抗病毒比活性可达 2 .2× 10 8IU mg。结论 建立了适合表达人干扰素
- 李武平衣作安张成海王刚郑丽舒段招军吕宏亮侯云德
- 关键词：干扰素卵巢细胞
- 生物产业发展将给健康带来深刻的变化
- 2006年
- 生物医药产业给人类的健康带来的深刻影响．使得我们愈加关注国际上生物技术产业发展的根本趋势。据近期的生物技术产业的统计，现在全球大约有300多种正在研究的新药，治疗200多种疑难病，提供了几百种生物医药诊断制剂。随着人类基因组计划的完成，相继发现了大量的蛋白质药物的药靶，打破了过去化学制药和生物制药的界限，现在几乎所有的制药厂都采用了生物技术。
- 侯云德
- 关键词：生物技术产业健康人类基因组计划蛋白质药物化学制药
- 人乳头瘤病毒6b型H增强子样序列在大肠杆菌中增强基因转录和β-干扰素表达被引量：2
- 1998年
- 将人乳头瘤病毒６ｂ型（ＨＰＶ６ｂ）基因组上游调控区（ＵＲＲ）５４０ｂｐ的Ｓａｕ３Ａ－ＮａｒＩ片段（Ｈ序列），正反向插入β－干扰素表达载体Ｔｒｐ启动子上游，使β－ＩＦＮ表达明显增强，可使基因表达水平提高３．６倍（正向）和２．１倍（反向）。Ｈ序列正反向插入增强子检测载体不仅使β－半乳糖苷酶表达活性增加５－１０倍，还能使半乳糖苷酶ｍＲＮＡ量明显增高，证明Ｈ序列对被调控基因的增强作用是发生在转录水平。
- 李同据吴淑华韩峰薛水星王金涛刘哲伟杨佩英侯云德
- 关键词：干扰素基因转录人乳头瘤病毒
- 鸡减蛋综合征病毒(EDSV-76)基因组E1区结构特点分析被引量：5
- 1998年
- ＥＤＳＶ－７６病毒中国株ＡＡ－２经常规方法提取其病毒ＤＮＡ后，建立了限制性内切酶ＰｓｔＩ水解片段的全基因文库。对其中ＰｓｔＩ－Ｇ片段和ＰｓｔＩ－Ａ片段的正反链进行序列测定，获得ＥＤＳＶＥ１区（０－８．８ｍ．ｕ）的核苷酸序列。经分析，ＥＤＳＶＥ１区具有与其他腺病毒Ｅ１区类似的结构。以大于６０个氨基酸残基为标准，ＥＤＳＶＥ１区共有７个开放读码框架（ＯＲＦ），其中Ｒ１、Ｒ２、ＥｌｂｓＴ和Ｅ１ｂ１Ｔ由ｒ链编码，其余分布在Ｌ链上，而且一些与腺病毒复制、转录有关的基序在ＥＤＳＶＥ１区中也较为保守。
- 金奇曾力宇李茂祥殷震殷震
- 一种α1型干扰素基因新变种的发现、鉴定、表达及表达产物的纯化被引量：4
- 1992年
- 人α型干扰素(huIFN-α)基因家族包括IFN-αI和IFN-αII两个亚型家族.继1980年Nagata等,Maeda等首次建立人IFN-α基因无性繁殖系以来,迄今国外已从人基因组或cDNA中相继成功地分离克隆了IFN-α基因家族的20多个成员.但是,不同种族在干扰素基因方面是否存在差异,尚不清楚.因内仅侯云德等人于1982年从经病毒诱生的中国人脐血白细胞mRNA中经逆转录克隆到IFN-αI cDNA.本文利用DNA聚合酶链式反应(PCR)
- 黎孟枫陈晓燕金奇胡钢郭辉玉侯云德
- 关键词：干扰素PCR基因变种
- 表达人GM-CSF重组痘苗病毒抗肿瘤作用的实验研究
- 1998年
- 将ｈＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ插入含有Ｐ１１ｋ及Ｐ２５ｋ双向启动子的痘苗病毒载体ｐＪ１２０的Ｐ１１ｋ启动子下游，而Ｐ２５ｋ下游则为ＬａｃＺ基因，构建成表达质粒ｐＪ１２０／ＧＭ－ＣＳＦ。以此质粒与痘苗病毒天坛株共转染ＴＫ－１４３细胞，在ＢＵｄＲ存在下，利用蓝斑筛选及纯化获得重组病毒ＲＶＪ１２０／ＧＭ－ＣＳＦ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果均证实，重组病毒ＤＮＡ中ＧＭ－ＣＳＦ基因整合，ＴＦ１测活显示重组病毒可表达有活性的ＧＭ－ＣＳＦ，且分泌到上清中。将表达ＧＭ－ＣＳＦ的重组痘苗病毒体外感染肿瘤细胞制备的裂解物，接种于荷瘤大鼠，能明显地抑制大鼠Ｗａｌｋｅｒ实体瘤的生长。
- 刘红兵张智清姚立红侯云德
- 关键词：GM-CSF肿瘤治疗糖蛋白
- 两种基于pBV220载体的新型载体
- 本发明包括两种基于pBV220的原核高效表达载体，采用PRPL启动子，一个是在表达产物的氨基端携带有6组氨酸，便于对表达产物的快速纯化；另一个是在pBV220载体上克隆入四环素抗性基因，通过建立外源基因的5′端随机序列库...
- 李福胜张智清侯云德贡惠宇
- 文献传递
