徐少甫
- 作品数：37 被引量：255H指数：9
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 山羊胚胎克隆的研究被引量：14
- 1995年
- 应用细胞核移植技术，把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞，并使之融合，成为Ｇ＿０代克隆卵。将Ｇ＿０代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养５ｄ，回收得到克隆胚，选择其中正常发育至８～１６细胞的克隆胚，将其胚胎细胞再移入成熟的去核卵母细胞，并进行电融合，构成Ｇ＿１代再克隆卵。１２９枚Ｇ＿０代克隆卵和１４３枚Ｇ＿１代再克隆卵移入同期发情的山羊输卵管，获得Ｇ＿０代克隆羊２只和Ｇ＿１代再克隆羊４只。介绍了产生克隆动物的各个技术环节以及这些环节与克隆动物出生率的关系。
- 成勇孙长美邹贤刚杜淼徐少甫
- 关键词：山羊胚胎移植无性繁殖系
- FSH和PMSG对不同生理状态下山羊超数排卵的效果被引量：9
- 1993年
- 近年来,胚胎移植技术在畜牧生产中的应用已得到普遍重视。在胚胎移植技术实施中,对供体母畜进行超数排卵为胚胎移植技术程序中不可缺少的一个环节。国内外对牛、绵羊、兔的超排已有较多的研究报道,而对山羊,尤其是对处于不同生理状态下的山羊进行超排未见系统报道。我们在进行核移植工程时用FSH和PMSG对不同生理状态下的2个品种山羊进行了超数排卵,现将结果报道如下。 材料和方法 1.试验羊 本试验以山东嘉祥青山羊和江苏丹阳白山羊为材料。选用健康、体况良好的母青山羊22头,体重15～25kg,年龄0.5～1.5岁;
- 王杏龙穆宗尧徐少甫成勇
- 关键词：山羊超数排卵促卵泡素孕马血清
- 乙基亚硝基脲诱发转基因小鼠体内基因突变及微核形成
- 2000年
- 目的 用致突变剂乙基亚硝基脲 (ENU)验证基于pUC 118NX质粒的转基因小鼠用于体内诱变研究的可行性。方法 用酶切、环化方法从经过和未经过ENU诱变处理的xylE ,C5 7BL 6J转基因小鼠脾脏组织DNA中重新分离pUC 118NX质粒 ,使其转化DH10B宿主菌并铺氨苄青霉素抗性平板培养后喷洒邻苯二酚溶液 ,通过菌落颜色不同筛选突变体 ,并对突变靶基因xylE测序分析以确定突变类型。同时取该转基因小鼠外周血及骨髓细胞 ,观察ENU对转基因小鼠微核形成率的影响。结果 转基因小鼠脾脏组织xylE基因自发突变率 <4 79× 10 - 5,经ENU( 5 0mg kg× 5 )处理后 ,脾组织基因诱发突变率为 19 83× 10 - 5,两者差异有显著性。ENU诱发小鼠脾组织基因突变的类型包括颠换( 5 0 % )、单 /双碱基插入 ( 3 7 5 % )和转换 ( 12 5 % )。经ENU( 5 0mg kg× 5 )处理后 ,转基因小鼠外周血细胞微核率 ( 7 6‰ )和骨髓细胞微核率 ( 8 8‰ )均明显高于溶剂对照组 ,表明ENU可诱发该转基因小鼠染色体畸变。结论 基于pUC 118NX质粒的xylE ,C5 7BL 6J转基因小鼠可用于同时测定体内基因突变和染色体畸变 ,有望成为一种新的评价化学物遗传毒性的检测系统。
- 曹洁印木泉陈建泉徐少甫
- 关键词：小鼠转基因微核DNA损伤
- 乙基亚硝基脲诱导转基因小鼠基因突变的研究被引量：2
- 2001年
- [目的 ]用乙基亚硝基脲 (ENU)进一步验证携带xylE基因的转基因小鼠在体内基因突变研究中的应用价值。 [方法 ]用ENU对转基因小鼠进行诱变处理 (i.p .5 0mg/(kg·d) ,连续 5d)后 ,从脾脏组织DNA中回收带有靶基因xylE的pESnx质粒 ,通过电穿孔法转化大肠杆菌 ,筛选突变体 ,检测突变率 ,并对突变靶基因进行测序分析以确定突变类型。 [结果 ] (1)ENU诱发转基因小鼠脾脏组织xylE基因的突变率为 1 2 48× 10 -4 ,显著高于自发突变率 ;(2 )ENU诱发基因突变的类型包括碱基的颠换、转换以及由于碱基的缺失或插入所引起的移码突变。 [结论 ]该转基因小鼠是检测体内基因突变的一种有效的动物模型。
- 郑怡文印木泉黄建杨志峰陈耀富陈建泉成国祥徐少甫
- 关键词：小鼠转基因致突变
- FSH对不同生理状态下山羊超数排卵的效果被引量：1
- 1996年
- ＦＳＨ对不同生理状态下山羊超数排卵的效果王杏龙，穆宗尧，徐少甫，邹贤刚，肖英达，杜淼（扬州大学农学院江苏扬州２２５００９）（中国科学院发育生物学研究所）前言近几年来，胚胎移植的试验研究在很多国家愈益蓬勃开展，取得了很多成就。只有能够得到足量的胚胎，才...
- 王杏龙穆宗尧徐少甫邹贤刚肖英达杜淼
- 关键词：山羊繁殖超数排卵FSH
- 转基因小鼠模型与生命科学研究被引量：3
- 1994年
- 转基因小鼠模型与生命科学研究成国祥，徐少甫（扬州大学农学院生物技术研究所）用实验手段将特定外源基因导入早期胚胎的细胞，由此整合到染色体上，并通过生殖细胞系传递给子代，这类整合外源基因的“新动物”被称为转基因动物。转基因动物体系打破了自然情况下的种间隔...
- 成国祥徐少甫
- 关键词：转基因小鼠动物模型生命科学
- 供体细胞核对山羊重构胚发育能力的影响被引量：1
- 1994年
- 选择不同品种的山羊交配所获的８细胞期至桑椹胚期的胚胎或重构胚发育至相同胚期的卵裂球，以ＬＲＨ注射后２６～２８ｈ回收的白山羊去核成熟卵作受体组建重构胚或再重构胚，经琼脂糖包埋，移入山羊输卵管内，培养５～６ｄ后观察发育状态。实验结果表明，杂种胚供核组建的重构胚和再重构胚发育能力明显优于纯种胚供核组建的重构胚和再重构胚，因此从细胞水平证明了杂种优势；母型ｍＲＮＡ对重构胚和再重构胚的发育起一定的调控作用。
- 穆宗尧成国祥王玉阁邹贤刚杜福良李光三徐少甫杜淼王杏龙成勇
- 关键词：山羊细胞核发育
- 显微注射外源DNA在早期胚胎中的命运被引量：9
- 1999年
- 应用显微注射法制备转基因动物时,外源DNA早期在胚胎的命运比较复杂,但对一些基本问题已有所了解。外源DNA在早期胚胎中发生着一系列的事件:染色体外重组,最终以线性DNA的形式整合入宿主基因组内;不同的细胞周期进行的微注射决定整合的频率及嵌合的比例,整合事件发生于第一个细胞周期S期,大多数呈现非嵌合现象。
- 陈建泉成国祥徐少甫
- 关键词：外源DNA显微注射胚胎
- 牛α-S1-酪蛋白-乙肝病毒表面抗原融合基因在转基因羊中的表达被引量：29
- 1997年
- 利用ＤＮＡ重组技术，将牛αＳ１酪蛋白调控区基因（１６ｋｂ的片段）与乙肝表面抗原基因拼接，构建了融合基因表达构件：λ１０６。构件经转基因技术转入山羊受精卵。待受精卵发育至成熟个体并分娩、泌乳，ＥＬＩＳＡ检测其乳汁中的ＨＢｓＡｇ，证明所构建的牛αＳ１酪蛋白基因表达构件是可以在羊乳腺中表达乙肝表面抗原基因。
- 张靖溥劳为德成勇成国祥徐少甫
- 关键词：转基因动物酪蛋白表面抗原基因
- 人乙肝病毒转基因小鼠肝脏形态观察和DNA图象分析初报被引量：3
- 1995年
- 观察了３２例２３～５５日龄人乙肝病毒转基因小鼠的肝脏形态，发现１７例小鼠的部分肝细胞巨大，核呈圆形、椭圆形或不规则形，核膜厚，核染色质粗大、浓染，核仁大而明显，核质比例大，肝小叶结构基本完整。其中的７例异常肝细胞所占比例较高，但未见典型的肝炎病变。ＤＮＡ图象分析显示，异常细胞核内ＤＮＡ含量增加，ＤＮＡ含量大于五倍体的细胞占各期细胞总数的比例达１２％～５６％。
- 万曙光励雁峰张萍萍万大方钱耕荪顾健人成国祥徐少甫
- 关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠
