成勇
- 作品数：99 被引量：347H指数：9
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 犬全身皮下气肿的诊疗
- 2009年
- 张信军李建基杨跃飞鞠辉明王亨成勇
- 关键词：皮下气肿诊疗皮下组织X线摄影手术治疗
- 脂质体LTX介导高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)条件的优化被引量：3
- 2011年
- 探讨获得外源基因高效转染山羊胎儿成纤维细胞(gFFCs)的方法,为筛选出体细胞核移植的供核细胞,制备转基因山羊提供技术基础。该研究以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,采用脂质体LipofectaminTM LTX+PLUSTMReagent介导,对细胞接种量、质粒DNA用量、脂质体与质粒DNA比例、脂质体-DNA复合物与细胞作用时间进行优化,荧光显微镜下统计转染后24 h的转染效率。结果显示:在24孔培养板中,每孔接种细胞6×104个,24 h后进行转染,质粒DNA每孔0.6μg,脂质体与质粒DNA比例为4.5∶1.0,脂质体-DNA复合物与细胞作用时间为6 h时,转染效率最高,达到81.2%。
- 丰秀静曹少先孟春花王慧利钱勇王锋成勇
- 关键词：转染效率脂质体绿色荧光蛋白
- 以乳腺上皮细胞为供核细胞生产克隆羊
- 利用电转染方法将人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得刚性克隆细胞株,经诱导的细胞株上清液用Western-blot方法检测.以转基因阳性细胞株为核供体细胞,进行山羊体细胞核移植....
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：转基因山羊核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白体细胞核移植
- 文献传递
- 山羊同步发情和超排后取卵时间的研究被引量：3
- 1994年
- 间隔９～１４ｄ分２次进行ＰＧＦ＿（２α）处理，以调整母羊的性周期。处理后的同步率分别为４７．６４％和６５．８８％。用ＰＭＳＧ或ＦＳＨ对４１９只母羊进行超排，总有效率７５．８１％，有效羊平均每只获卵７．６４枚。超排母羊发情后２０～３０ｈ回收的卵母细胞，可用率８５．９３％。用于山羊细胞核移植中的受体卵母细胞，适宜的回收时间为超排母羊发情后（２７±１）ｈ。在进行山羊原代细胞核移植时，以８～１６细胞期、桑椹期至囊胚期的分裂球或内细胞团细胞作供核的胚胎，适宜的获取时间为超排母羊发情交配后９６～１４４ｈ。
- 穆宗尧王杏龙邹贤刚杜福良成国祥王玉阁李光三徐少甫杜淼成勇
- 关键词：山羊同步发情超数排卵卵母细胞
- 突变靶基因xylE转基因小鼠被引量：4
- 1997年
- 本研究以ｐＥＳｎｘ穿梭质粒为载体，选用恶臭假单孢杆菌ＴＯＬ质粒上的ｘｙｌＥ基因作为突变靶基因组构建的重组构件，经微注射导入ＩＣＲ小鼠５４９枚受精卵雄原核，将存活的３５２枚卵移入２４只假孕鼠输卵管内，７只妊娠，共产仔４１只，其中７只死胎，出生后死亡４只，３０只存活。注射卵存活率为６４％（３５２／５４９），出生率为１１．６％（４１／３５２）。存活鼠经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，整合率为５７％（１７／３０）。在整合阳性鼠中选择了杂交信号较强的２只当代公鼠，通过回收载体和转化试验，结果表明整合基因完整，具有转化的功能，由此，建立了突变靶基因ｘｙｌＥ转基因小鼠模型。
- 陈建泉成国祥成勇徐少甫黄建印木泉
- 关键词：靶基因突变E基因转基因小鼠孕鼠假孕
- 由胎儿成纤维细胞而来的克隆山羊(Capra hircus)被引量：55
- 1999年
- 哺乳动物的克隆是国内外科学家研究的热点问题 .用体外培养的胎儿成纤维细胞作供体细胞不仅可以研究发育生物学中发育与分化的理论问题 ,而且与早期胚胎细胞作供体细胞相比 ,大大增加了供体细胞的数量 .初步实验结果如下 :( 1 )分别用早期胚胎细胞分裂球和体外培养传 6代的山羊胎儿成纤维细胞作供体细胞 ,进行核移植 ,重构卵体内培养 5d后 ,其分裂率前者为 5 5 % ,后者为 77% ;发育率前者为 35 % ,后者为 31 % ,经统计分析 ,无显著差异 .( 2 )得到了由传代培养的山羊胎儿成纤维细胞而来的克隆山羊 ,这是我国首次获得的胎儿体细胞克隆哺乳动物 .为今后进行成年动物的体细胞克隆 ,从而深入研究动物发育过程中的核质关系创造了条件 。
- 王玉阁邹贤刚成国祥成勇陈建泉刘洁张靖溥张旭晨劳为德张锁林徐少甫杜淼
- 关键词：山羊胎儿成纤维细胞转基因动物
- TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析被引量：1
- 2022年
- 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生“双肌”症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满足市场动物肉品质消费的需求。为了获得“双肌”表型的MSTN基因突变克隆山羊,本研究在山羊MSTN基因第一外显子序列设计并构建TALENs表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经嘌呤霉素筛选获得抗性细胞株,通过PCR检测和基因测序筛选MSTN基因突变细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植,并鉴定MSTN基因突变类型;通过组织切片分析MSTN基因突变山羊肌肉组织形态结构,监测不同月龄克隆山羊体重并分析其不同生长发育阶段的体重增长趋势。结果表明,共获得109株MSTN基因突变细胞株,突变效率达到79.0%(109/138),其中46株为双等位基因突变,占细胞株总数的33.3%(46/138)。选取4株生长状态较好的MSTN基因突变细胞株(1株为双等位基因纯合突变,3株为非纯合突变)进行体细胞核移植至12只受体山羊,30 d时B超检查出受孕母羊4只,受孕率为33.3%(4/12),妊娠到期分娩2只克隆山羊,测序结果表明M-1克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因未产生突变,另一个等位基因缺失3 bp;M-2克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因产生1 bp碱基插入,另一个等位基因缺失13 bp,两种突变均造成MSTN在突变位点之后的蛋白序列丢失。此外,M-1克隆山羊肌纤维排列紧密且粗大,每月体重均高于普通野生型山羊,但与普通野生型山羊生长趋势一致,且能够健康发育至成年。本研究利用TALENs技术成功介导山羊MSTN基因定点修饰,并获得MSTN基因突变的山羊胎儿成纤维细胞,将其作为供核细胞成功生产MSTN基因突变克隆山羊,为培育“双肌”表型山羊新品系奠定了技术基础,也为将�
- 宋绍征何正义成勇于宝利张婷李丹
- 关键词：肌肉生长抑制素基因突变山羊体细胞核移植
- 利用乳腺上皮细胞生产转fat-l基因克隆羊的研究
- 本研究以转基因乳腺上皮细胞为供核细胞进行了7次核移植实验，共超排了28只供体山羊，将165枚卵移植到17只受体中，到期1只受体出生了1只转fat-1基因克隆羊，另有1只受体待产。在9只妊娠的受体中，有5只羊在妊娠至中后期...
- 袁玉国于宝利杨廷佳安礼友成勇
- 关键词：核移植乳腺上皮细胞
- CRISPR/Cas9介导兔MSTN基因靶向敲除研究
- 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子,属于转化生长因子β(transforming growthfactorβ,TGF-β)超家族成员。目前已研究过的不同哺乳物种间的MSTN基因结构...
- 张婷陆睿梅珺琰吴岱君何正义成勇
- 关键词：MSTN基因体外转录显微注射
- 文献传递
- 犬猫消化道异物梗阻的X-线诊断与治疗体会
- 消化系统异物梗阻是小动物临床上一种常见疾病，主要指动物误将不能消化的异物或块状食物吞入消化道内，引起消化道的部分或完全性梗阻，从而影响机体消化机能甚至危及动物生命。本研究接诊犬猫消化系统异物梗阻类疾病56例，经X线摄影确...
- 张信军李建基王亨杨跃飞成勇
- 关键词：宠物猫宠物犬
- 文献传递
