张传生
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 旋毛虫p49基因的克隆、序列分析及表达被引量：5
- 2002年
- 目的 获得旋毛虫排泄分泌抗原(excretory antigen,ES)p49基因的克隆、测序及表达。 方法 通过RT-PCR,从旋毛虫幼虫总RNA中扩增得到特异片段,利用TA克隆将PCR产物克隆入pUC-T载体中并进行测序及同源性比较,并定向克隆到表达载体pEG-4T-3中,转化感受态细胞,诱导表达。 结果 RT-PCR扩增得到p49基因,其核苷酸序列与已发表的p49基因序列一致;BLAST分析表明其与旋毛虫p49基因、43 KDa分泌性糖蛋白同源性均为99％。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,重组蛋白诱导表达在67 KDa处有一新蛋白带。 结论 提取旋毛虫幼虫总RNA,用RT-PCR方法克隆并表达了p49基因。
- 温艳甘绍伯劳为德高虹张传生刘思国
- 关键词：旋毛虫基因克隆基因表达
- 旋毛虫ES抗原基因的克隆和序列分析被引量：11
- 2002年
- 目的 完成旋毛虫ES抗原 (Excretory -secretoryAntigen)中 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因的克隆和测序 ,并与已发表的该两种基因的相关序列比较、分析。方法 通过RT -PCR ,从旋毛虫幼虫总RNA中扩增得到特异性片段 ,利用TA克隆将PCR产物克隆入 pUC -T载体中并进行测序及同源性比较。 结果 RT -PCR扩增得到 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因 ,序列分析表明 ,其核苷酸序列与已发表的 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原的同源性均为 99%。结论 成功提取了旋毛虫幼虫的总RNA ,并用PT -PCR方法克隆了 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因 ,这为两基因的表达及在医学、兽医学中应用研究奠定了基础。
- 温艳劳为德刘思国高虹张传生甘绍伯
- 关键词：旋毛虫基因克隆免疫学基因序列
- 牛乳腺核基质附着区多重顺式作用序列表明其功能的多样性(英文)
- 2003年
- 高等真核细胞的染色体DNA通过基质结合区 (MAR)不时地与核基质特异性结合而组织成一种空间环状结构。为了研究以DNA套环形式附着于核基质上的DNA序列的特性 ,从处于泌乳期的乳腺组织中克隆了多个MARDNA序列。体外结合实验表明 ,这些序列能够同核基质蛋白共结合成不溶性的复合物 ,这些复合物可较容易的通过离心去除。其中 ,两个MAR序列中包含有TG 、CA 和GA 阻断以及ATTA基序。这两个序列中含有多个复制 转录因子的结合位点、增强子基序、多个完全的和非完全的反向重复序列以及潜在的DNA弯曲核心序列样结构。同一DNA序列中存在不同元件的组合可能说明在控制一系列细胞的发育过程中 ,它们可能发挥有正的或负的调控元件的功能。
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- 关键词：基质转录因子
- 位点特异性重组酶Cre的克隆、表达、纯化及体外活性鉴定
- 2002年
- 克隆了Cre基因 ,分别构建了真核表达载体 pEF EBFP Cre和 pGEX Cre,在大肠杆菌中表达了Cre重组酶 ,并证明了重组酶的删除特性 。
- 高虹张传生魏影允胡国法劳为德
- 关键词：克隆纯化体外活性CRE/LOXP系统原核表达CRE基因
- 嵌合分子VEGI^+的构建、表达及其抗血管生成和抗肿瘤活性被引量：3
- 2003年
- 血管内皮细胞生长抑制因子VEGI是肿瘤坏死因子超家族新成员 ,通过诱导内皮细胞凋亡而抑制肿瘤生长。通过PCR方法将CTTHWGFTLC与VEGI2 3- 1 74氨基酸相连 ,构成嵌合分子VEGI+。原核表达的VEGI+经过纯化后 ,以非重折叠的沉淀形式进行活性实验 ,VEGI+能够抑制鸡胚尿囊膜血管新生 ,对于Lewis肺癌小鼠移植瘤 ,5mg L组抑瘤率 99.7% ,1 0mg L组抑瘤率96% ,2 5mg L组抑瘤率 83%。实验说明VEGI+通过抑制血管新生对移植瘤的早期发展起抑制作用。
- 高虹刘思国刘思金魏影允胡国法张传生劳为德
- 关键词：嵌合分子抗肿瘤活性VEGI基质金属蛋白酶抗血管生成
