兰泓
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：中国高等教育学会“十一五”教育科学研究规划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达被引量：2
- 2015年
- 通过限制性内切酶克隆法构建两个pET-28a-TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化。将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体和Apaf1抗体通过Western Blotting鉴定诱导蛋白。菌液PCR和测序证明经稀有密码子优化和未经稀有密码子优化的人源RNaseH-Apaf1序列成功重组到pET-28a-TAT载体中;经稀有密码子优化的重组质粒成功地在大肠杆菌宿主菌中表达RNaseH-Apaf1融合蛋白,并用Western Blotting检测到该融合蛋白。结果表明,稀有密码子可影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白的原核表达。
- 兰泓孔劭凡李慎涛张玉祥
- 关键词：稀有密码子原核表达
- 利用T7核酸外切酶和硫代磷酸化修饰引物克隆长片段基因的研究
- 2015年
- 目的采用不依赖连接反应的克隆法,利用T7核酸外切酶和硫代磷酸化修饰引物克隆Notch2长片段基因。方法将难以扩增的Notch2 c DNA的编码序列(7416 bp)人为分成3段,引物设计时对此3个片段和载体骨架的引物进行碱基硫代磷酸化修饰,用这些引物扩增Notch2的3个片段和载体骨架。然后用T7核酸外切酶分别处理PCR产物,产生4个具有3'互补突出末端的片段,并将此4个末端突出的片段退火复性,完成Notch2基因克隆。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示Notch2 3个片段和载体骨架的PCR产物大小与预期大小相符,经退火复性获得的克隆通过PCR、酶切和测序进行克隆鉴定,确定Notch2编码序列已经插入到pc DNA3.0-3*Flag载体中。结论利用T7核酸外切酶和引物的碱基磷酸化修饰进行的不依赖连接反应的克隆方法能够用于长片段基因的克隆。
- 兰泓张玉祥
- Notch家族蛋白质Notch1-4和CSL在胰腺癌细胞基因组结合位点的比较分析
- Notch家族是一类高度保守的蛋白,它在器官的发育、细胞的增殖、分化和凋亡都起到至关重要的作用。在哺乳动物中,Notch家族包含有4种受体(Notch1-4),Notch蛋白没有DNA结合域,需要经过CSL等转录因子发挥...
- 刘浩陈佳周萍李炳秋褚巧云兰泓张玉祥
- 关键词：转录因子CSL转录起始位点
- 文献传递
- Notch家族蛋白质Notch1-4和CSL在胰腺癌细胞基因组结合位点的比较分析
- Notch家族是一类高度保守的蛋白,它在器官的发育、细胞的增殖、分化和凋亡都起到至关重要的作用。在哺乳动物中,Notch家族包含有4种受体(Notch1-4),Notch蛋白没有DNA结合域,需要经过CSL等转录因子发挥...
- 刘浩陈佳周萍李炳秋褚巧云兰泓张玉祥
- 关键词：转录因子CSL转录起始位点
- Notch-1和CBF-1在人类胰腺癌基因组中转录共调控的靶基因特征分析
- 目的在人类胰腺癌细胞HPAC全基因组水平寻找Notch-1胞内结构域(Notch-1 intra-celluar domain,NICD)和CBF-1共同转录调控的靶基因,分析其的特征值,并提示Notch信号通路的潜在生...
- 王澜舸刘凤麟褚巧云兰泓周萍张玉祥
- 关键词：NOTCH信号通路
- 文献传递
- 基因克隆技术及其进展被引量：7
- 2015年
- 基因克隆技术，又称重组DNA技术，是将目的基因与具有自主复制能力的载体DNA进行体外重组，获得新的重组DNA后导入受体细胞中表达相应蛋白，以研究蛋白结构与功能及其与其他分子的相互作用。最近，随着非编码RNA的发现，这项技术也用于RNA的研究。基因克隆技术从发明到现在经历了三个发展阶段。
- 兰泓张玉祥
- 关键词：基因克隆技术重组DNA技术非编码RNA蛋白结构体外重组目的基因
- 三年制护理高等职业教育培养要求的调查分析被引量：3
- 2006年
- 通过对110名护理教育和临床护理人员进行问卷调查，明确了三年制护理高等职业教育应采用“应用型为主”的培养模式，并提出采取核心课程的设置模式，设置体现“应用型、技术型”特点的课程体系。改变传统的教学方法，以培养在临床与社区一线工作的护理人员。
- 兰泓陈嬿
- 关键词：课程设置调查问卷
- Notch-1和CBF-1在人类胰腺癌基因组中转录共调控的靶基因特征分析
- 目的在人类胰腺癌细胞HPAC全基因组水平寻找Notch-1胞内结构域(Notch-1 intra-celluar domain,NICD)和CBF-1共同转录调控的靶基因,分析其的特征值,并提示Notch信号通路的潜在生...
- 王澜舸刘凤麟褚巧云兰泓周萍张玉祥
- 关键词：NOTCH信号通路
- 吴阶平医学教学思想初探被引量：1
- 2008年
- 本文以《吴阶平文集》下卷为基本资料，从对吴阶平长达50余年的医学教育经历中，探讨了他的医学教学思想，尤其是对他的“教本领”与“学本领”以及改变课堂教学中“满堂灌”的教学方法等思想进行了分析提炼，并结合吴阶平创办北京第二医学院的教学实践，对其医学教学思想中的几个关键问题进行了初步探讨。
- 李效义于书彦兰泓许永照陈煤
- 从大学的职能谈世界一流大学被引量：2
- 2006年
- 大学有培养人才、发展科技和社会服务三大职能,其归根结底是服务于社会,促进社会的发展。哈佛大学、剑桥大学、牛津大学、耶鲁大学、普林斯顿大学等之所以能够被大家公认为世界一流大学,就在于它们能够很好地完善这三大职能。
- 兰泓陈嬿于书彦
- 关键词：大学职能社会
