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活体电穿孔法辅助HE4基因免疫小鼠制备单克隆抗体被引量：2: 2010年; 目的：采用电穿孔辅助DNA免疫方法制备小鼠抗人附睾蛋白4（HFA）单克隆抗体（mAb）并对其生物学特性进行鉴定。方法：利用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）从卵巢癌患者组织中获得人HFA基因编码序列，将其亚克隆至pPICZαA表达载体中并测序鉴定。采用活体电穿孔法免疫BALB／c小鼠。单抗制备采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合，经多次克隆化培养，筛选出特异分泌鼠抗人HFAmAb的杂交瘤细胞株。采用Westernblot，Ig亚型分析和mAb表位分析等对mAb的生物学特性进行鉴定。结果：获得2株持续、稳定分泌鼠抗人I-IFAmAb的杂交瘤细胞株，命名为1—7-C和3-12-C。ELISA和Westernblot结果均显示本实验获得的2株mAb能够特异识别有天然构象的HFA蛋白，2株mAb的Ig亚类均为IgM，轻链均为入链。结论：成功地构建了pPICZαA-HE4表达载体，并获得2株鼠抗人HFA杂交瘤，其所分泌的抗体能特异地识别HFA蛋白。; 栾好飞高新卞丽红付洁邱伟成董立厚范礼斌宋海峰; 关键词：卵巢癌 HE4 DNA免疫杂交瘤单克隆抗体

卵巢癌诊断用HE4抗体的制备: 卵巢癌是严重威胁广大妇女的恶疾，由于发病部位隐匿，早期症状不明显，卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤之首，70％～80％卵巢癌患者发现时已为晚期，五年生存率仅20％，而早期患者5年生存率可达70％～90％，所以提高卵巢癌早期诊断...; 栾好飞; 关键词：卵巢癌肿瘤标志物基因克隆真核表达载体; 文献传递

肝素酶DNA疫苗经电穿孔免疫在小鼠体内表达和基因组整合研究: 目的:研究肝素酶DNA疫苗经电穿孔免疫在小鼠体内的表达与基因组整合。方法:使用肌肉注射联合活体电穿孔技术将表达肝素酶基因的裸质粒DNA疫苗导入小鼠。免疫后不同时间点取各主要脏器提取组织总RNA。实时荧光定量PCR技术考察...; 付洁董周寰栾好飞高新李灵珍宋海峰; 关键词：实时荧光定量PCR 肝素酶电穿孔生物分布; 文献传递

基因免疫法制备小鼠抗人肝素酶多克隆抗体: 2009年; 目的:利用基因免疫的方法制备抗人肝素酶抗体。方法:用本室构建的表达肝素酶全长质粒pcDNA3.1(+)-HPA为基因免疫载体,免疫6～8周龄雄性BALB/c小鼠,使得质粒上的目的基因在动物体内表达,诱导动物体对DNA编码的外源蛋白产生抗体而获得肝素酶的抗血清,通过间接ELISA方法测定小鼠抗血清效价,Western印迹鉴定抗血清特异性。结果:获得了效价较高的小鼠抗血清,最高效价可达到1∶5×104;抗体特异性与标准品一致。结论:建立了一种制备肝素酶抗体的新方法。; 李素波高红伟栾好飞高新檀英霞王璇琳宋海峰宫锋; 关键词：基因免疫

电穿孔基因导入技术在临床前与临床试验中的应用: 2009年; 电穿孔基因作为非病毒递送手段之一,可安全、有效地将外源核酸导入靶组织或器官。近年来用电穿孔法进行基因治疗的报道不断增多,优势日趋显著。本文重点阐述了电穿孔在基因治疗中的优势、影响因素及在临床前和临床试验中应用。; 栾好飞付洁宋海峰; 关键词：电穿孔基因治疗临床前研究

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栾好飞