宋海峰
- 作品数：183 被引量：416H指数：9
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- rsTRAIL药代动力学及药效学研究
- 2012年
- 目的:研究rsTRAIL在动物体内的组织分布、药代动力学和抗肿瘤作用。方法:采用同位素标记示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法研究rsTRAIL在荷瘤小鼠体内的组织分布及粪尿排泄,采用ELISA法测定猕猴血清中rsTRAIL浓度。结果:荷瘤小鼠iv给药后尿液和肺中酸沉放射性最高,皮下肿瘤放射性分布较低,而脑和骨髓最低。猕猴iv注射高、中、低3个剂量(1,5和25 mg.kg-1)rsTRAIL后,AUC0～t分别为(3.7±0.1),(19.7±0.8)和(103.9±5.2)μg.h-1.mL-1,末端t1/2分别为(28.3±1.0),(31.0±0.7)和(33.2±0.9)min。裸鼠肿瘤模型显示该药具有良好的抗肿瘤作用,抑瘤率达到86%。结论:猕猴iv注射不同剂量rsTRAIL后,在给药剂量范围内基本呈线性药代动力学;荷瘤小鼠iv给药后主要经尿排泄,不易通过血脑屏障。rsTRAIL具有良好的体内外抗肿瘤活性。
- 董立厚孙效欧伦陈方王清清宋海峰
- 关键词：肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体药代动力学
- 靶向人表皮生长因子受体3的人源Fab抗体构建及鉴定
- 2015年
- 目的:制备靶向人表皮生长因子受体3(HER3)的全人源Fab型抗体,并对其亲和力及生物学活性进行鉴定。方法:用Bsp QⅠ限制性内切酶分别将靶向HER3的全人源抗体的完整轻链、重链的可变区全长和CH1恒定区插入载体p3457,构建重组质粒;通过将轻、重链质粒瞬时共转染293E悬浮细胞进行表达,并利用镍柱纯化得到Fab型抗体蛋白;采用ELISA鉴定其与HER3胞外区是否结合,Forte Bio实验鉴定其亲和力,CCK8检测其对MDA-MB-453细胞增殖能力的影响。结果:分别获得表达轻链全长、重链可变区全长及CH1恒定区的HER3抗体重组质粒,并通过瞬时共转染293E悬浮细胞获得分泌型HER3 Fab抗体;ELISA实验证明其可与HER3胞外区蛋白直接结合;Forte Bio实验证明Fab型抗体与人源HER3胞外区蛋白具有一定的亲和力(KD=1.08×10-8mol/L);体外增殖实验表明,该抗体可显著抑制MDA-MB-453体外增殖。结论:通过293E悬浮细胞表达、镍柱亲和纯化,获得具有较高亲和力和功能活性的HER3 Fab型抗体,为HER3高表达型癌症的诊断、治疗提供物质基础。
- 张晶刘玉杰万德有刘蕴慧王芳武逸熏付洁宋海峰
- 关键词：FAB抗体
- 肉苁蓉抗应激药理作用及机制研究进展被引量：5
- 2009年
- 应激是机体的一种适应性反应,会影响免疫系统和神经内分泌系统的正常功能。肉苁蓉是临床常用的中药之一,研究发现其能有效减缓应激的发生和加速应激的消除,减轻机体的损伤。本文结合中药药理筛选理论及其模型,介绍肉苁蓉通过增强和改善免疫系统功能、清除体内自由基、保护和调节神经内分泌系统、调节机体代谢等作用,减轻应激所导致的机体损伤的药理学作用及其机制研究进展。
- 张钰哲杨玲玲宋海峰杜一民
- 关键词：肉苁蓉免疫系统自由基神经内分泌
- 重组人生长激素在健康猕猴体内的比较药代动力学被引量：1
- 2012年
- 目的:比较两种国产重组人生长激素在健康猕猴体内的药代动力学,评价两种药物的相似性。方法:采用交叉自身比较设计,8只健康成年猕猴分别单次皮下注射受试品和参比品0.35 IU·kg-1;采用酶联免疫吸附分析法检测血清中药物浓度,统计矩方法计算各主要药代动力学参数;采用3P97软件参考生物等效性标准对参数进行评价。结果:方法的特异性、灵敏度、精密度和准确度均符合药代动力学研究要求。受试品与参比品的血药浓度-时间曲线基本一致,主要药代动力学参数AUC0～12 h分别为(512±102)和(476±71)μg·h·L-1;AUC0～∞分别为(538±115)和(494±77)μg·h·L-1;Cmax分别为(108±18)和(96±23)μg·L-1;t1/2分别为(2.8±0.7)和(2.2±0.7)h;MRT分别为(4.2±0.8)和(4.0±0.8)h;CLs/Fsc分别为(0.047±0.014)和(0.060±0.013)L·h-1·kg-1;Vd/Fsc分别为(0.194±0.04)和(0.24±0.06)L·kg-1。以AUC0～∞计算,受试品与参比品比较,相对生物利用度F为(109±15)%。受试品相对于参比品的生物等效性用AUC0～12 h,AUC0～∞和Cmax的90%可信区间评价分别为89.2%～114.3%8,7.4%～112.7%和98.5%～124.4%,均符合生物等效性判断标准。结论:受试品与参比品药代动力学参数评价结果满足生物等效接受标准;两种重组人生长激素在猕猴体内呈现相同的药代动力学特征。
- 欧伦王清清孙效陈方董立厚邹佳宋海峰
- 关键词：重组人生长激素酶联免疫吸附分析药代动力学
- 肿瘤坏死因子-α单克隆抗体注射剂在中国健康成年志愿者中抗药抗体产生及其影响因素分析被引量：1
- 2017年
- 目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体药物在中国健康成年受试者中抗药抗体(ADA)产生的比率,分析其影响因素。方法按随机、平行、双盲、对照的研究方法设计,3项试验共计纳入164例中国健康成年志愿者。试验1:56例中国健康成年受试者随机分成A、B、C、D、E、F组,其中A组6例,其他每组10例,分别予以单次腹部皮下注射10,20,35,50,65,75 mg的试验药物L00653;试验2:60例中国健康成年志愿者随机分成6个剂量组,每组10例,分别予以单次腹部皮下注射5,15,30,50,75,100 mg的试验药物L02151。试验3:48例中国健康成年志愿者随机分成4组,每组12例,组内按1∶1对照以静脉滴注方式分别给予试验药物L00048或原研药。用配体结合分析法检测ADA水平。结果 164例受试者全部完成试验。试验1:A、B、C、D、E、F组的阳性率分别为17.00%,20.00%,40.00%,30.00%,0,30.00%,组间ADA阳性率与给药剂量比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。试验2:5,15,30,50,75,100 mg剂量组的阳性率分别为100.00%,100.00%,100.00%,100.00%,100.00%,70.00%,组间ADA阳性率与给药剂量比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。试验3:仅2例ADA检测阳性。结论 TNF-α单克隆抗体药物在人体内ADA的产生与单抗自身来源和结构有关,与药物剂量无密切关系。
- 徐炳锋王艺瞳刘畅王茜谢新瑶宋海峰方翼
- 反义硫代寡核苷酸增强细胞毒药物抗乳腺癌活性的体外研究
- 2006年
- 目的研究以HER2mRNA为靶点的反义硫代脱氧寡核苷酸(SODNs)HA6722单用及与紫杉醇合用时对HER2过表达乳腺癌细胞株MDAMB453体外增殖的抑制作用。方法选择HER2过表达的MDAMB453细胞与HER2低表达的MDAMB231细胞,MTT法观察HA6722单用及与紫杉醇合用时对两种肿瘤细胞增殖的影响;以末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果HA6722及紫杉醇单用均可以剂量依赖方式抑制MDAMB453细胞的体外增殖,IC50值分别为47.6±7.9nmol·L1(n=3,mean±s)和19.4±4.1nmol·L-1(n=3,mean±s)。加用低剂量的HA6722可增强紫杉醇对MDAMB453细胞的抑制作用,IC50值由合用前的19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1(n=3,P<0.05)。联合应用时,在IC50浓度下二者之间的联合指数(CI)为0.81±0.43(n=3),其对MDAMB453细胞的相互作用表现为正性协同作用。结论反义寡核苷酸HA6722与细胞毒药物紫杉醇合用对HER2过表达乳腺癌细胞的体外增殖抑制具有协同作用。
- 孙君重夏绍友李留树宋海峰朱建华李秋文赵晖宋三泰
- 关键词：反义寡核苷酸紫杉醇
- 反义寡核苷酸,含它们的药物组合及其用于治疗癌症的用途
- 本发明涉及靶向HER-2基因的反义寡核苷酸，含它们的药物组合物及其用于治疗癌症的用途。
- 宋海峰杨栓平汤仲明朱宝珍
- 文献传递
- 两种注射用重组人生长激素的比较药代动力学研究
- 目的:比较研究两种注射用重组人生长激素(rHuGH)制剂的药代动力学特点差异,并进行生物等效性分析。方法:采用交叉自身比较设计。8只猕猴分别先后皮下注射受试品和参比品,用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定猕猴血浆中rH...
- 李娜欧伦尚明美孙效刘秀文宋海峰
- 关键词：重组人生长激素猕猴酶联免疫吸附分析药代动力学生物等效性
- 文献传递
- 离子对试剂及其在多肽及蛋白质分离分析中的应用被引量：3
- 2011年
- 离子对试剂是实现反相离子对色谱(Reversed-phase Ion-pair Chromatogra-phy,RPIC)快速灵敏和高分辨的关键因素。离子对试剂的正确选择和适当的添加,对多肽及蛋白质的分离分析有着显著影响。本文介绍了RPIC的基本原理及其在蛋白多肽分析中的应用前景,并详细阐述了常用离子对试剂的种类、特点及应用。
- 王明媚向慎思王清清宋海峰
- 关键词：离子对试剂反相离子对色谱多肽蛋白质纯化
- 密码子优化的人成纤维细胞生长因子-21在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2010年
- 目的在毕赤酵母中表达密码子优化的人成纤维细胞生长因子-21(hFGF-21),为探讨hFGF-21在糖尿病治疗方面的作用奠定基础。方法经密码子优化合成hFGF-21基因,构建表达载体pPICZαA-hFGF-21,电转化毕赤酵母GS115,斑点免疫印迹法筛选工程菌株,甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,并对诱导条件进行优化。结果重组表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确。筛选出5株阳性菌株,诱导上清经SDS-PAGE分析,可见相对分子质量约为25000的目的蛋白条带,目的蛋白的表达量约为6μg/L。Westernblot显示该蛋白具有良好的反应原性。诱导96h和培养液pH值为4.0时,目的蛋白的表达量最高,甲醇浓度对表达量无影响。结论已成功构建了密码子优化的hFGF-21真核表达载体,并在毕赤酵母GS115中分泌表达了hFGF-21。
- 马忠辉赵巧香高新王诗鸿宋海峰杨焕民
- 关键词：毕赤酵母电转化
