董立厚
- 作品数：34 被引量：44H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划上海市科委科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新型HPV治疗性疫苗抗肿瘤作用及机理研究
- 近年来,经生殖道传播和感染人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)呈逐年上升趋势。HPV感染,尤其是高危型(主要包括16、18型等)感染是引起阴道、宫颈尖锐湿疣并最终导致阴道癌、宫颈癌的主要病因,...
- 董立厚
- 关键词：人乳头瘤病毒治疗性疫苗融合蛋白抗肿瘤
- 文献传递
- ELISA法测定食蟹猴血清中抗BLyS抗体的抗药抗体被引量：5
- 2016年
- 目的:建立测定食蟹猴血清中抗BLyS抗体抗药抗体(ADA)的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法并进行验证,用于测定该药的抗药抗体。方法:在96孔板中包被治疗药物,以捕获食蟹猴血清中的抗药抗体,之后加入生物素标记的治疗药物与被捕获的抗药抗体结合,最后用链霉亲和素-辣根过氧化物酶偶联试剂作为检测试剂。以羊抗人的IgG作为对照品,对食蟹猴血清中的抗药抗体进行半定量。结果:筛选判断阈值信噪比(SNR)为1.158,批内批间精密度小于20%,样品复孔A值变异小于20%,确证判断阈值为38.4%游离药物抑制率。抗BLyS抗体连续给药13周食蟹猴体内产生抗药抗体。结论:成功建立、验证并应用该方法测定了抗BLy S抗体的抗药抗体,为该药申请临床实验报批提供数据支持。
- 高柳村李黎王绪甲陈方董立厚欧伦宋海峰
- 关键词：酶联免疫吸附分析
- 两种基于RAJI细胞的抗CD20单抗新型定量方法的比较及在药物代谢动力学中的应用被引量：2
- 2009年
- 建立和比较基于RAJI细胞的流式细胞法(Flow cytometry assay,FCA)和细胞放射免疫法(Immuno-radiametric assay,IRA)测定重组抗CD20人源化单克隆抗体(r-anti-CD20zumAb)的浓度。两种方法均利用标记后抗体和被检测抗体竞争性结合RAJI细胞表面的CD20抗原,由标记后抗体的荧光或放射性变化而间接反应检测抗体的浓度。FCA和IRA定量范围分别为0.1～100mg/L和0.04～20mg/L,FCA的日内及日间精密度分别小于4.0%和3.0%,准确度为-1.7%～1.1%,IRA的日内及日间精密度值均小于7.0%,准确度为-8.9%～13.2%。方法学确证研究表明,两种方法均具有良好的特异性、灵敏度、精密度和准确度。血浆样品分析结果显示,两种方法具有良好的一致性,是检测猕猴血浆中人源化单克隆抗体浓度的理想方法。
- 董增祥王清清陈立慧侯盛董立厚王诗鸿欧伦刘秀文宋海峰
- 关键词：流式细胞法放射免疫法药物代谢
- 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的药代动力学和组织分布被引量：1
- 2010年
- 目的研究重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTRAIL)的药代动力学和组织分布。方法恒河猴单次静脉滴注rhTRAIL1,5和25mg.kg-1及iv5mg·kg-1后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定rhTRAIL在恒河猴体内的血药浓度,并采用放射性核素示踪技术结合三氯乙酸(TCA)沉淀和分子排阻高效液相色谱法测定[125I]rhTRAIL在荷瘤裸鼠组织内的含量。结果恒河猴单次静脉滴注rhTRAIL1,5和25mg·kg-1后,各剂量组的药代参数除cmax和AUC以外,均无显著差异,表现出线性动力学性质。恒河猴每天给药1次,连续7d,药物在体内没有蓄积。恒河猴静脉滴注和iv给药对药物的体内清除过程无明显影响。[125I]标记rhTRAIL后的放化纯度大于98%。荷瘤裸鼠iv给予[125I]rhTRAIL后,在各组织广泛分布,总放射性在肿瘤组织中于给药后2h达到高峰,在其他大部分组织中于给药后10min达高峰。给药后10min及2,8和24h,肿瘤/血清的酸沉放射性比值分别为0.07±0.01,0.62±0.17,0.78±0.57和1.66±0.50;给药后24h,肿瘤组织的放射性浓度高于其他组织和血清。结论在研究剂量范围内,rhTRAIL在恒河猴体内表现为线性动力学。[125I]rhTRAIL给药后在荷瘤裸鼠中广泛分布,在肿瘤组织中分布浓度较高,并主要经肾脏排泄。
- 王诗鸿董立厚王清清欧伦陈方雒蓬轶宋海峰刘秀文
- 关键词：药代动力学
- 2种重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白的临床生物等效性评价
- 2017年
- 目的:比较2种生产基地来源的注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFRIIFc)在中国健康志愿者体内药动学(pharmacokinetics,PK)特征,并评价二者的相似性。方法:24名男性健康受试者进行随机、开放、双周期两制剂交叉试验,采用经方法学验证的酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测血清中药物浓度。Win Nonlin软件非房室模型计算PK参数,并参照生物等效性标准评价受试品(T)与参照品(R)的主要PK参数相似性。结果:本研究建立的测定人血清中TNFRII-Fc浓度的ELISA方法学指数均符合生物制品PK研究的要求。T与R的AUC0-480 h分别为(356.00±55.00)与(396.61±69.66)μg·h·mL^(-1);相对生物利用度F(T/R)为89.90%;Cmax分别为(1.70±0.50)与(1.90±0.50)μg·mL^(-1);各末端相相关PK参数相似。T的AUC0-480 h与Cmax90%置信区间分别落入R的84.10%~96.30%与78.50%~95.30%范围内。结论:研究涉及剂量下,2种产地来源的TNFRII-Fc的临床PK行为相似,可达生物等效。
- 董立厚韩敏樊晓东谢新遥王变珍陈方邹佳付洁陈方青欧伦宋海峰
- 关键词：肿瘤坏死因子受体融合蛋白酶联免疫吸附分析药动学生物等效性
- 注射用重组人淋巴毒素α衍生物在中国晚期肿瘤患者体内的药代动力学研究
- 2018年
- 目的评价注射用重组人淋巴毒素α衍生物(rhL Tα)在中国晚期肿瘤患者中多次给药的药代动力学特征。方法 12例晚期食管鳞癌患者和12例晚期胃癌患者分别接受10μg·m^(-2)或20μg·m^(-2)rhL Tα连续5 d静脉滴注给药,每个剂量组各12例受试者。用酶联免疫吸附法分别测定第1,5天血浆中LTα的浓度,用Winonlin 5.2软件计算主要药代动力学参数。结果第1,5天主要药代动力学参数如下,10μg·m^(-2):AUC_(0-t)分别为(9473.40±6976.95)和(9390.14±6494.89)pg·mL^(-1)·min,AUC_(0-inf)分别为(10324.26±7611.415)和(10163.09±6795.82)pg·mL^(-1)·min,C_(max)分别为(156.92±106.57)和(174.44±100.62)pg·mL^(-1),t_(max)分别为(53.42±14.87)和(54.17±17.43)min,t_(1/2)分别为(17.78±5.91)和(20.43±5.35)min,CL分别为(128.44±128.63)和(120.68±106.06)L·h^(-1)·m^(-2),V_d分别为(126.63±115.60)和(129.98±127.04)L·m^(-2);20μg·m^(-2):AUC_(0-t)分别为(26458.97±16064.90)和(25314.11±9587.38)pg·mL^(-1)·min,AUC_(0-inf)分别为(27531.84±16562.03)和(27297.33±10295.65)pg·mL^(-1)·min,C_(max)分别为(467.73±288.74)和(473.14±200.79)pg·mL^(-1),t_(max)分别为(60.91±8.31)和(60.50±3.69)min,t_(1/2)分别为(30.12±6.79)和(28.20±6.53)min,CL分别为(69.69±56.21)和(55.94±27.51)L·h^(-1)·m^(-2),V_d分别为(88.25±86.02)和(73.23±36.97)L·m^(-2)。结论 rhL Tα多次给药后LTα暴露有增加的趋势,但多次给药后平均药物谷浓度C_(min)并不随给药次数增加而升高。rhLTα的药代动力学行为显示出肿瘤患者的异质性以及个体的差异性。
- 王炜董立厚宋海峰方翼王华
- 关键词：药代动力学多次给药肿瘤患者
- 核酸杂交酶联桥接分析系统定量分析寡核苷酸被引量：6
- 2012年
- 建立了基于核酸杂交及连接酶和核酸内切酶的酶联桥接分析(ELBA)系统,用于生物基质中反义寡核苷酸(ODN)药物的定量分析。对ELBA系统中的亲和素包被、俘获探针/检测探针浓度、T4DNA连接酶及S1核酸酶用量、碱性磷酸酶底物反应时间等条件进行了优化,确定使用中性亲和素包被的酶标板,俘获探针与检测探针浓度比为2∶3,S1酶为40U/孔,显色15min为最优条件,并考察了生物基质效应和稀释效应对方法的影响,建立了猕猴血浆中反义寡核苷酸的定量方法,并进行方法学确证,方法学定量范围为0.10～6.25nmol/L。本方法成功应用于反义硫代寡核苷酸药物在低剂量(1mg/kg)静脉滴注后的药代动力学研究,成为生物基质中寡核苷酸类药物定量分析的有效手段。
- 孙云娟付洁王清清周磊董立厚欧伦高新宋海峰
- 关键词：寡核苷酸药代动力学核酸杂交
- 新型宫颈癌治疗性疫苗肿瘤杀伤作用
- 2012年
- 目的研究新型治疗性疫苗NTV的体内外宫颈癌杀伤作用。方法采用51Cr释放法研究脾淋巴细胞对宫颈癌细胞TC-1的体外杀伤活性,将正常小鼠体内激活的免疫活性细胞输给荷瘤小鼠,采用过继性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)转移实验研究CTL的体内抗肿瘤作用。结果 CTL杀伤实验设置的效应细胞与靶细胞数量比分别为3:1、10:1及30:1,51Cr释放分析结果显示,疫苗NTV能够显著诱导脾淋巴细胞的肿瘤特异性杀伤作用,杀伤作用呈剂量依赖性变化,杀伤效率最高可达到53.5%;疫苗NTV在过继性CTL转移实验中的肿瘤抑制率为64.7%,上述结果均与阴性对照组有统计学差异(P<0.05)。结论疫苗NTV在体内外对宫颈癌细胞均具有良好的杀伤作用。
- 张卓梅宋海晶李娜邹佳季颖王清清陈方高新董立厚
- 关键词：治疗性疫苗融合蛋白
- 聚乙二醇修饰对艾塞纳肽在动物体内药代动力学行为影响研究
- 目的:研究聚乙二醇化(PEG)修饰对艾塞纳肽(Exendin-4)在猕猴体内的药代动力学行为影响,比较二者在大鼠体内的组织分布和排泄情况。方法:酶免疫吸附分析(EIA)法测定猕猴血清样品内PEG和非PEG化Exendin...
- 邹佳陈方尚明美董立厚欧伦孙效李娜刘秀文宋海峰
- 关键词：聚乙二醇修饰EXENDIN-4药代动力学
- 文献传递
- 基于SPR系统的TMP-Fc免疫原性分析方法建立与应用被引量：1
- 2017年
- 目的:利用Biacore 3000 Gx P系统建立并验证基于表面等离子体共振(SPR)技术的免疫原性分析方法,对2种重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白(TMP-Fc)在食蟹猴体内的免疫原性(IM)进行比较研究。方法:采用食蟹猴连续皮下注射候选药LMF(L,100,300,1 000μg·kg^(-1))或参照药romiplostim(R,300μg·kg^(-1))后采集血清样品,用验证的IM分析方法检测样品中的抗药抗体(ADA)。筛选阈值(CP)采用信噪比(S/N)进行计算;确证阈值(SCP)经免疫抑制试验确定;其他验证指标包括灵敏度、分析范围与Hook效应、药物耐受性与精密度。结果:候选药与参照药筛选阈值分别为CPL1.54和CPR1.41。确证阈值分别为SCPL37.6%和SCPR40.9%;配制于混合食蟹猴血清(PCMS)中的阳性质控(PC)浓度为1~64μg·mL^(-1),参数模型拟合良好,未见Hook效应。二者方法灵敏度分别为556和463 ng·mL^(-1)。药物耐受性数据表明样品S/N值随药物浓度升高而降低,其信号抑制比率(inhibition)反之升高。所有阴性质控(NC)、低浓度LPC与抗体血清rs PC样品变异系数(CV)均不高于25%。样品分析结果表明各给药组均有个体检出ADA,相同剂量下L和R的ADA阳性率均为50%;2种方法(anti-L,anti-R)对R的样品检测阳性个体及其检测时间点高度吻合。结论:本研究建立并验证了基于SPR系统的IM分析方法。方法符合生物制品IM研究要求,并成功应用于2种TMP-Fc生物样品的ADA检测。
- 谢新遥徐静芝罗宇欧伦高柳村高晨燕王海学付洁董立厚宋海峰
- 关键词：免疫原性
