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孙晓林

作品数:3 被引量:4H指数:1
供职机构:哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室更多>>
发文基金:哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇克隆
  • 2篇蛋白
  • 2篇生物标记
  • 2篇生物标记物
  • 2篇标记物
  • 2篇纯化
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇原核表达
  • 1篇人乳
  • 1篇人乳腺珠蛋白
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺癌
  • 1篇乳腺珠蛋白
  • 1篇珠蛋白
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞肺癌
  • 1篇腺癌
  • 1篇小细胞
  • 1篇小细胞肺癌

机构

  • 3篇哈尔滨医科大...
  • 1篇上海交通大学

作者

  • 3篇孙晓林
  • 3篇唐晓波
  • 3篇李梅
  • 3篇李淑珍
  • 2篇于华实
  • 2篇张天竹
  • 1篇唐佳昕

传媒

  • 2篇国际免疫学杂...
  • 1篇哈尔滨医科大...

年份

  • 2篇2013
  • 1篇2012
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
乳腺癌相关的乳腺珠蛋白基因的克隆、表达及纯化被引量:3
2012年
目的克隆人乳腺珠蛋白(hMAM)基因,原核表达重组蛋白并纯化,为建立一种新的乳腺癌诊断方法奠定基础。方法从人乳腺癌组织中提取总RNA,经RT-PCR合成cDNA,设计特异性的引物,用PCR的方法扩增出目的片段,构建PET-32A-hMAM和PGEX-4T1-hMAM表达载体,在BL21菌中表达hMAM重组蛋白,纯化,并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果经RT-PCR、PCR扩增后得到一条207bp的DNA片段,构建载体后DNA测序,结果与预期序列一致。表达和纯化的融合蛋白相对分子质量大约为28000,与预期结果一致。结论成功克隆hMAM基因,并获得高纯度的hMAM重组蛋白,为进一步开发hMAM诊断试剂打下基础。
李梅张天竹孙晓林于华实李淑珍唐晓波
关键词:乳腺癌人乳腺珠蛋白克隆纯化
非小细胞肺癌生物标记物角蛋白19基因的克隆、表达及纯化被引量:1
2013年
目的克隆人角蛋白19(CK19)基因,原核表达重组蛋白并纯化,为建立一种新的非小细胞肺癌诊断方法奠定基础。方法从宫颈癌HeLa细胞株中提取总RNA,经RT—PCR合成eDNA,设计特异性的引物,用PCR的方法扩增目的片段,构建pET.32a—CK19和pGEX-4T1-CK19表达载体,在BL21大肠杆菌中表达CK19重组蛋白纯化,并进行SDS—PAGE及Westernblot鉴定。结果经PCR扩增后得到一条420bp的DNA片段,构建载体后DNA测序,结果与预期序列一致。初步结果鉴定表明,表达和纯化的融合蛋白,与预期结果一致。结论成功克隆CK19基因,并获得高纯度的CK19融合蛋白,为进一步制备体外诊断试剂打下基础。
孙晓林李梅唐佳昕李淑珍唐晓波
关键词:非小细胞肺癌克隆纯化
肿瘤型丙酮酸激酶的原核表达及单克隆抗体的制备
2013年
目的利用原核表达系统表达重组肿瘤型丙酮酸激酶(TU M2-PK),并制备TU M2-PK的单克隆抗体(mAb)。方法提取卵巢癌细胞株SKOV3的RNA,通过逆转录、PCR扩增TU M2-PK基因,将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签PGEX-4T-1载体连接,转化DH5α菌进行基因克隆并测序鉴定。进一步构建表达体系,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,最终在BL21菌中表达TU M2-PK融合蛋白(分别含有His、GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。获得的蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,进行杂交瘤细胞的筛选。采用间接ELISA法测小鼠血清及细胞上清TU M2-PK抗体效价,Western blot分析mAb特异性。结果成功构建pET-32a-TU M2-PK、pGEX-4t-1-TU M2-PK工程质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫小鼠,筛选获得两株稳定分泌TUM2-PK抗体的杂交瘤细胞株。分别命名为6A11、7C11,Western blot实验显示,两株均可以与重组蛋白特异性结合,并且能识别子宫颈癌细胞株(Hela)、胃腺癌细胞(SGC-7901)、肝癌细胞(HepG2)中的天然蛋白。结论成功制备了TU M2-PK蛋白及其单克隆抗体,为进一步开发TU M2-PK诊断试剂打下基础。
张天竹李淑珍李梅于华实孙晓林唐晓波
关键词:M2-PK原核表达单克隆抗体生物标记物
共1页<1>
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