公共文化服务平台

李淑珍: 作品数：19 被引量：25H指数：3; 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>; 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>

合作作者

电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5抗血清的制备及特性鉴定: 2010年; 目的制备电压门控型钾通道蛋白Kv 1.5的多克隆抗体,对其特性进行鉴定。方法利用生物信息学方法分析Kv 1.5蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择一段8个氨基酸序列,据此合成Kv 1.5多肽片段,并将其与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为免疫抗原,免疫新西兰白兔制备抗Kv 1.5抗血清。辛酸-硫酸铵法纯化抗血清,对纯化后的抗血清进行ELISA、Western blot鉴定。结果成功获得抗Kv 1.5合成肽的抗血清,该抗血清效价为1:64 000,可与Kv 1.5合成肽及天然Kv 1.5蛋白出现特异性反应,该抗血清识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为59 kD。同时,Western blot结果显示,所制备的抗血清能识别大鼠心脏天然Kv 1.5蛋白。结论合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗血清,并且制备的抗血清经ELISA、Western blot鉴定后特异性较好。; 于学薇李淑珍鄢成伟唐晓波; 关键词：KV1.5 合成肽多克隆抗体

高免疫原性骨桥蛋白的构建、表达及鉴定: 2013年; 目的重组及表达高免疫原性骨桥蛋白（OPN）的融合蛋白。方法使用Lasergene软件分析OPN基因，选取出免疫原性高的区域作为目的片段。提取总RNA，应用逆转录、PCR等技术扩增OPN基因目的片段，将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签的pGEX-4T-1载体连接。构建表达载体，诱导表达OPN融合蛋白（分别含有His，GST—Tag），并进行SDS—PAGE及Western blotting鉴定。结果扩增后获得一条351bp的DNA片段，经测序鉴定为目的片段序列，并实现了可溶性高表达，经Western blotting鉴定为高免疫原性OPN融合蛋白。结论采用原核表达经纯化后可获得高纯度高免疫原性的OPN融合蛋白，为进一步开发OPN诊断试剂打下基础。; 汤伟松孟琴刘亮李淑珍唐晓波; 关键词：骨桥蛋白肝癌

乳腺癌相关的乳腺珠蛋白基因的克隆、表达及纯化被引量：3: 2012年; 目的克隆人乳腺珠蛋白（hMAM）基因，原核表达重组蛋白并纯化，为建立一种新的乳腺癌诊断方法奠定基础。方法从人乳腺癌组织中提取总RNA，经RT-PCR合成cDNA，设计特异性的引物，用PCR的方法扩增出目的片段，构建PET-32A-hMAM和PGEX-4T1-hMAM表达载体，在BL21菌中表达hMAM重组蛋白，纯化，并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果经RT-PCR、PCR扩增后得到一条207bp的DNA片段，构建载体后DNA测序，结果与预期序列一致。表达和纯化的融合蛋白相对分子质量大约为28000，与预期结果一致。结论成功克隆hMAM基因，并获得高纯度的hMAM重组蛋白，为进一步开发hMAM诊断试剂打下基础。; 李梅张天竹孙晓林于华实李淑珍唐晓波; 关键词：乳腺癌人乳腺珠蛋白克隆纯化

药学分子生物学教学改革的研究被引量：2: 2011年; 药学分子生物学是当今生命科学研究中最重要的前沿学科之一,该学科促使药物研发提升到一个新的水平。为了培养更多的具备生物科学素养的高素质、创新型人才,哈尔滨医科大学药学院开展以优化、更新教学内容,探讨新的教学方法,引入新的教学手段,加大实践教学力度为内容的教学改革,并经过多年教改实践,积累了教学经验,锻炼了师资队伍,提高了教学质量,初步构建了一种适合新世纪药学人才培养需求的分子生物学教学体系。; 唐晓波李淑珍鄢成伟; 关键词：分子生物学教学改革教学体系

在药学分子生物学教学中加强与学生情感交流的重要性被引量：1: 2016年; 药学分子生物学是一门重要的药学专业课程，是现代生物学领域里最具活力的新兴学科，该学科促使药物研发提升到一个新的水平。为了更好地促使学生掌握知识，教师应采用合理的教学方法，用情感吸引和感染学生。本文从四个方面阐述了药学分子生物学教学中情感交流的重要性。; 李淑珍; 关键词：情感交流师生关系

抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测被引量：5: 2011年; 目的:构建和表达抗血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/抗CD3双特异单链抗体(bscVEGFR2×CD3),及亲和活性测定。方法:设计抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体基因序列,由公司合成并亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),筛选高效分泌表达bscVEGFR2×CD3的克隆株。表达产物经Ni-NTA柱纯化,120 g/L SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用流式细胞术(FCM)检测生物学活性。结果:bscVEGFR2×CD3重组表达载体测序证实序列正确。bscVEGFR2×CD3能够在CHO细胞中进行分泌表达,筛选出6株高表达克隆株。120 g/L SDS-PAGE显示相对分子质量(Mr)约56 000有1条带,与预期相符,Western blot证明anti-His抗体能与这条蛋白条带发生特异性结合。FCM检测bscVEGFR2×CD3能与CD3+jurkat细胞和VEGFR2+A375细胞特异性结合。结论:成功构建和表达抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体,该抗体具有与VEGFR2、CD3特异性结合的免疫学活性。; 戴丽娟鄢成伟李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波; 关键词：CD3 VEGFR2

抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 2008年; 目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-32a-PLA2G13(即PLA2G13-His)。PLA2G13-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb和鼠mAb。采用Western blot鉴定兔抗人PLA2G13 pAb的特异性。采用Western blot和Immunohistochemistry鉴定鼠抗人PLA2G13 mAb的特异性。结果:PLA2G13-GST和PLA2G13-His融合蛋白在均大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。Western blot鉴定表明,兔抗人PLA2G13 pAb可特异地识别HepG2细胞系中相对分子质量(Mr)约19700的蛋白,与文献报道中PLA2G13的实际Mr相符。通过筛选共获得8株可稳定分泌抗PLA2G13的杂交瘤细胞株,Western blot鉴定表明6株可识别重组人PLA2G13蛋白,免疫组织化学鉴定显示2株可特异性识别正常肝组织中的PLA2G13蛋白。结论:成功地制备了抗人PLA2G13兔pAb和鼠mAb,为进一步研究PLA2G13的功能提供了特异性检测工具。; 李淑珍刘莹陈苗柳晓兰唐小波高建恩朱大岭孙启鸿; 关键词：原核表达融合蛋白抗体制备

鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 2009年; 目的:制备CD20融合蛋白及制备CD20的单克隆抗体(mAb),并对其进行特性鉴定。方法:以人单核细胞cD-NA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CD20(即CD20-GST)和pET-32a-CD20(即CD20-His)。以融合蛋白CD20-GST为免疫源免疫BALB/c雌性小鼠制备(mAb),用间接ELISA法测定抗体的效价,Western blot、免疫荧光鉴定其特异性及免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。结果:CD20-GST和CD20-His蛋白在大肠杆菌中可高效表达,经纯化后可获得高纯度的CD20蛋白,经细胞融合得到1株稳定分泌CD20抗体的杂交瘤细胞株,Western blot和免疫组化显示抗CD20mAb与CD20蛋白具有良好的反应性。结论:成功制备高纯度CD20蛋白并以此为抗原制备了1株能够稳定分泌抗人CD20的鼠mAb的杂交瘤细胞株BD11F4,为进一步研究CD20对非霍奇金淋巴瘤的诊断治疗提供基础。; 包红霞吴春铃李淑珍唐晓波褚晓杰王爽张家宁朱大岭; 关键词：CD20 原核表达融合蛋白抗体制备

醛脱氢酶8A1融合蛋白的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2008年; 目的:重组表达醛脱氢酶8A1(aldehyde dehydrogenase 8 family member A1,ALDH8A1)蛋白,制备其多克隆抗体,并进行抗体的特异性鉴定,以及蛋白在组织和细胞内的定位。方法:以成人肝cDNA文库为模板,PCR扩增ALDH8A1目的片段,并构建重组表达载体pGEX-4T-1-ALDH8A1和pET-32a-ALDH8A1,经测序鉴定插入载体的DNA片段序列正确后,转化大肠杆菌BL21,诱导表达GST-ALDH8A1和His-AL-DH8A1融合蛋白。经Western blot确定其为目的蛋白后,纯化重组融合蛋白,并以GST-ALDH8A1免疫家兔制备抗人AL-DH8A1多克隆抗体。用His-ALDH8A1包板,ELISA法测定兔抗人ALDH8A1血清效价;Western blot鉴定兔抗人ALDH8A1血清在重组蛋白和天然蛋白中的反应特异性;免疫组化法确定ALDH8A1蛋白在组织和细胞中的定位。结果:成功构建重组表达载体pGEX-4T-1-ALDH8A1和pET-32a-ALDH8A1;获得包涵体形式表达的GST-ALDH8A1和可溶性形式表达的His-ALDH8A1融合蛋白;应用纯化的重组蛋白GST-AL-DH8A1免疫家兔,获得兔抗人ALDH8A1血清,ELISA测定抗血清的效价为1∶256000。Western blot结果显示,制备的AL-DH8A1兔多抗可特异地识别成人肝总蛋白以及293T、A549、HeLa、U937、HepG2细胞总蛋白中一个相对分子质量(Mr)约53000的ALDH8A1天然蛋白,与文献报道的ALDH8A1的Mr一致,表明ALDH8A1在正常肝组织与癌细胞中都有表达。免疫组化结果表明ALDH8A1蛋白定位于人肝癌细胞胞质中。结论:成功制备出兔抗人ALDH8A1多克隆抗体,此抗体可应用于ELISA,Western blot和免疫组化检测,为进一步研究ALDH8A1的功能奠定了基础。; 刘佳莹李淑珍李晓玲刘莹柳晓兰高建恩仲飞孙启鸿; 关键词：重组蛋白多克隆抗体

鳞状细胞癌抗原SCCA基因的构建、表达及鉴定被引量：1: 2013年; 目的:重组人鳞状细胞癌抗原(SCCA)的基因及表达融合蛋白,为下一步建立新的肝癌诊断方法奠定基础。方法:提取子宫颈癌细胞株(hela)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出SCCA基因,将其分别与PET-32a及PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆,并测序鉴定。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导转入工程质粒的BL21菌中表达SCCA融合蛋白(分别含有HIS,GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果:经RT-PCR、PCR扩增后成功获得一条450 bp的DNA片段,经测序鉴定与预期序列一致;并成功在大肠杆菌中实现了高表达,经Western blotting鉴定为SCCA融合蛋白。结论:成功获得SCCA目的基因并获得高纯度的SCCA融合蛋白,为进一步开发针对肝癌的SCCA诊断试剂打下基础,开辟诊断肝癌新途径。; 于华实孙晓琳张天竹李梅李淑珍唐晓波; 关键词：肝癌克隆

李淑珍

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

李淑珍

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈