周桓
- 作品数：25 被引量：62H指数：5
- 供职机构：江南大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省临床免疫学重点实验室基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Menin通过PI3K/Akt信号通路抑制胃癌AGS细胞的生长被引量：3
- 2015年
- 目的 :探讨多发性内分泌腺瘤病1型(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN 1)基因编码蛋白menin对人胃癌AGS细胞生长的影响,及其可能的作用机制。方法:将携带有MEN1基因的重组腺病毒Ad-MEN1感染人胃癌AGS细胞,然后采用蛋白质印迹法和免疫荧光法检测Ad-MEN1感染后对AGS细胞中menin表达水平的影响;分别采用MTT和FCM法检测menin过表达对AGS细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响;再用蛋白质印迹法检测磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路相关蛋白及其磷酸化水平的变化。结果:蛋白质印迹法和免疫荧光检测结果显示,menin蛋白在Ad-MEN1感染后的AGS细胞中表达水平明显增加(P<0.05),重组腺病毒Ad-MEN1在AGS细胞中的感染复数为60时,感染效率最佳,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)。DNA合成前期(G0/G1期)细胞所占比例上升,合成期(S期)细胞所占比例下降(P值均<0.05)。然而,menin高表达对AGS细胞的凋亡没有明显的作用(P>0.05)。Menin过表达后,AGS细胞中磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)和NF-κB p65的表达明显下调(P值均<0.05)。结论:Menin高表达可以抑制人胃癌AGS细胞的生长,其机制可能与抑制P13K/Akt和NF-κB信号转导通路有关。
- 任峰胡瑜周桓陈敏黄朝晖华东
- 关键词：腺病毒感染信号转导
- 一种批量检测用采样管架
- 本实用新型提供了一种批量检测用采样管架，其能解决批量检测时采样管需逐一打开的技术问题。一种批量检测用采样管架，包括架体，架体排布有管孔，其特征在于，还包括上盖，上盖能够与架体扣合，软垫安装于上盖的顶壁内侧，薄膜卷套装于支...
- 任峰周桓过琴陈敏
- 文献传递
- Oct-4的表达与结直肠癌的发生及患者预后的相关性研究被引量：1
- 2015年
- 目的 研究结直肠癌演变过程中Oct-4表达的变化,探讨Oct-4的表达与结直肠癌患者预后的相关性.方法 收集结直肠癌、配对的远端正常肠组织、结肠息肉组织,定量PCR（qRT-PCR）、流式细胞术（FCM）、免疫组织化学（IHC）检测不同组织中Oct-4表达水平.收集结直肠癌患者临床资料,统计学分析Oct-4的表达与临床参数的相关性.Kaplan-Meier曲线法分析Oct-4的表达与患者生存期的相关性.结果 qRT-PCR结果显示,Oct-4 mRNA在正常组织、结肠息肉组织和恶性结直肠组织的相对表达量分别为（0.23±0.16） ×10^-5、（1.19±0.76）×10^-5、（3.79±1.94） ×10^-5,组间差异具有统计学意义（F=8.633,P=0.001）.IHC检测正常组织、结肠息肉组织和恶性结直肠组织Oct-4阳性率分别为4.43％、12.68％、40.51％,差异具有统计学意义（x2=66.311,P＜0.001）.Oct-4的表达与结直肠癌的病理分期（x2=7.248,P=0.007）、淋巴结转移（x2 =4.888,P=0.027）、远处转移（x2=5.732,P=0.017）、TNM分期（x2=4.174,P=0.041）相关.Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Oct-4表达阳性患者的中位生存期（37.0个月）显著短于阴性患者（76.0个月）,差异具有统计学意义（x2=14.050,P=0.001）.结论 Oct-4的表达在结直肠癌演变过程中逐步升高,Oct-4的异常表达可能在结直肠癌演变过程中发挥一定作用,有望作为结直肠癌临床诊断、病情评估、预后判断的重要标志分子.
- 周桓胡瑜任峰茆勇齐晓薇张学光
- 关键词：结直肠肿瘤结肠息肉OCT-4
- CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞介导Th1细胞分化的研究
- 2006年
- 目的:探讨CD40配基化的肿瘤特异性DCs在介导Th1细胞分化中的作用。方法:采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs,并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备DCs瘤苗;3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应;ELISA测定细胞培养上清中IL-10、IFN-γ、IL-12的含量;胞内染色和流式细胞术检测经成熟DCs活化的T细胞中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T的比例。结果:体外刺激T细胞增殖能力在CD40配基化DCs组最高(P<0.05),CD40配基化DCs能更有效地促进活化T细胞分泌IFN-γ和介导CD4+IFN-γ+T细胞的分化(P<0.05),同时,CD40配基化DCs分泌IL-12的量也明显高于TNF-α组(P<0.05)。结论:CD40配基化的肿瘤特异性DCs体外能有效介导Th1细胞的分化。
- 陈成朱一蓓瞿秋霞周桓王勤於葛华李文香张学光
- 关键词：树突状细胞CD40TH1细胞
- 激发型4-1BB单抗联合凋亡肿瘤细胞负载的树突状细胞在恶性肿瘤免疫治疗中的作用被引量：4
- 2006年
- 目的:研究激发型4-1BB单抗(2A)联合凋亡肿瘤细胞负载的DC(AP-DC)疫苗在小鼠B细胞淋巴瘤免疫治疗中的作用。方法:凋亡小鼠B细胞淋巴瘤细胞A20负载的DC用来制备AP-DC。A20荷瘤小鼠分别被注射AP-DC、2A单抗或二者联合。观察肿瘤生长情况及小鼠生存期。流式细胞术检测免疫治疗后荷瘤鼠脾脏T细胞的表型和胞浆内细胞因子;3H-TdR掺入试验检测T细胞体外增殖能力;ELISA法检测荷瘤鼠血清和脾脏T细胞培养上清中IL-2、IFN-γ和IL-10含量。结果:应用激发型4-1BB单抗2A或AP-DC疫苗对荷瘤小鼠开展免疫治疗,可抑制肿瘤生长,延长荷瘤鼠生存期,获得12.5%或25%的肿瘤完全缓解率。但二者联合应用,治疗效果更好,可获得62.5%的肿瘤完全缓解率,并且荷瘤鼠可长期生存。联合治疗后荷瘤鼠脾脏T细胞体外增殖更为显著,CD4+IFN-γ+T细胞的比例也明显增加。IL-2和IFN-γ的分泌水平在联合治疗荷瘤鼠的血清和脾脏T细胞的培养上清中升高更明显,而IL-10的分泌则降低。结论:激发型4-1BB单抗和AP-DC在肿瘤免疫治疗中有协同作用。
- 李敏陈成古涛周桓张烽朱一蓓於葛华张学光顾宗江
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫治疗
- 重组人sCD40L功能性片段在大肠杆菌中的表达
- 2005年
- 目的克隆sCD40L功能性片段(E107L261)基因并在大肠杆菌体系进行表达。方法从CD40L胞外段全长基因通过PCR方法扩增出sCD40L功能性片段(E107L261)的基因,并在其N端融合6个组氨酸(His);经PCR、酶以及DNA测序证实;将融合得到的sCD40L基因插入pET30a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达体系进行诱导表达。结果构建了pET30asCD40L原核表达载体;将转化菌BL21(DE3)诱导表达后经SDSPAGE电泳以及WesternBlotting鉴定显示在18kd处有sCD40L功能性片段(E107L261)的高效表达。结论sCD40L功能性片段基因的克隆及其表达为进一步研制其同源三聚体形式的功能性重组蛋白奠定了基础。
- 周璇黄勇郑璐庄羽美周桓张学光
- 关键词：CD40配体大肠杆菌
- 4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞凋亡
- 2005年
- 为研究4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞(DC)凋亡的作用,采用rmGM-CSF联合rmIL-4诱导小鼠骨髓细胞分化为未成熟树突状细胞(imDC),分别经rmTNF-α、4-1BB激发型单克隆抗体(2A)或TNF-α联合2A激发DC成熟。未成熟或成熟DC分别与不同浓度的肿瘤培养上清混合培养。流式细胞仪测定DC表面CD80、CD86的表达,3H-TdR掺入法测定DC激发T细胞活化增殖能力;JAM法测定未成熟或成熟DC与肿瘤上清混合培养后DNA片断形成率。结果显示:经2A或TNF-α刺激后,DC激发T细胞活化的能力显著提高;5%、10%、20%、50%小鼠肿瘤细胞株A20或B16培养上清与未成熟DC共育24h后,DNA片断形成率分别为16%、29%、41%、51%和20%、27%、37%、58%,且该效应具有时间依赖性;DC经2A或TNF-α激发48h后,不同浓度肿瘤培养上清诱导DNA片断形成率显著降低。因此,肿瘤细胞可以通过分泌可溶性因子诱导未成熟DC凋亡;4-1BBmAb能促进DC的发育成熟,并能有效地抑制肿瘤细胞培养上清诱导的DC凋亡。
- 周桓席泓陈成马倩茹张学光顾宗江
- 关键词：树突状细胞凋亡
- 鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定
- 2011年
- 目的:鼠抗人4-1BB分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BB分子的转基因细胞293T/4-1BB为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以293T/4-1BB为阳性抗体筛选细胞,293T/mock为阴性抗体筛选细胞,经免疫荧光标记和流式细胞术(FCM)分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人4-1BB分子mAb的杂交瘤细胞株;采用W estern b lot、间接免疫荧光法、竞争结合抑制试验、3H掺入和细胞凋亡分析等方法对mAb进行生物学特性的鉴定。结果:成功获得3株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤细胞株,命名为1G5、4B11和9F11。对mAb的生物学功能的研究结果表明,3株mAb均能识别活化T细胞和单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)表达的4-1BB分子。mAb 4B11能有效地激发T细胞体外增殖、抑制其凋亡,并能促进Mo-DC体外扩增,上调CD80、CD83、CD86和CD1α的表达。结论:获得的3株分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤,所分泌的抗体具有特异性地识别人4-1BB分子;其中4B11 mAb具有激发T细胞增殖及促进Mo-DC体外扩增与成熟的作用,为激发型4-1BB mAb。
- 周桓张光波董秋明於葛华徐颖张学光
- 关键词：4-1BB杂交瘤共刺激信号单克隆抗体
- 免疫治疗后荷瘤小鼠树突状细胞的功能评价
- 2006年
- 目的评价免疫治疗后荷瘤小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)体外激发T细胞增殖及分泌细胞因子的功能。方法采用腹腔注射激发型4-1BB抗体联合DC主动免疫治疗荷瘤小鼠3。H-TdR掺入试验检测免疫治疗后荷瘤小鼠骨髓来源DC体外激发T细胞增殖的能力,ELISA法检测DC刺激T细胞分泌IL-2、IFN-γ及IL-10的水平。结果荷瘤小鼠骨髓前体细胞产生的DC激发T细胞增殖及分泌IL-2、IFN-γ的能力下降,但经过免疫治疗后,这类DC激发T细胞增殖及分泌IL-2、IFN-γ的能力均得到改善,而且免疫治疗效果越好,改善就明显。结论荷瘤小鼠经免疫治疗后,其骨髓前体细胞来源DC的免疫功能得到改善。
- 李敏陈成古涛周桓张烽朱一蓓於葛华张学光顾宗江
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫治疗
- 结直肠癌演进过程中CD133分子表达的临床意义及调控机制
- 结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在恶性肿瘤中已上升至第三位，死亡率居恶性肿瘤死因的第二位。在我国，随着经济的发展和饮食结构的改变，结直肠癌的发病率逐年攀升，已成为危害人民健康的常见疾病之一。虽然近年来对结直肠癌的...
- 周桓
- 关键词：结直肠癌肿瘤干细胞基因调控
- 文献传递
