王政
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
- 供职机构：浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- 构建以荧光共振能量转移技术为基础的生物学活性前列腺特异抗原检测器被引量：3
- 2005年
- 目的 构建可在体外应用荧光共振能量转移(FRET)技术检测具有酶活性的前列腺特异抗原(PSA)的生物检测器。方法 构建原核细胞表达质粒,从而在大肠杆菌中表达在供体和受体荧光蛋白之间以PSA特异性识别氨基酸序列SSYYSG连接的融合蛋白。将纯化的融合蛋白依次用糜蛋白酶、胰蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割,检测其荧光共振能量转移现象的变化。结果 糜蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割均可有效抑制融合蛋白的FRET现象,并表现出对时间和剂量的依赖关系。而胰蛋白酶在90min内未见FRET抑制现象。结论 本研究构建的FRET检测器可成功检测具有酶活性的PSA ,为活性PSA的检测提供一种可选择的途径。
- 齐小娟王政蔡朱男张斌余应年
- 关键词：荧光共振能量转移前列腺特异抗原荧光蛋白
- 1、MNNG诱发表面受体聚集与DNA损伤 2、FRET技术的建立
- 化学致癌物可以引起DNA损伤和非DNA损伤效应。非定标突变是指发生在非损伤DNA部位的突变，可被以上两种损伤效应所诱发。
然而机体能主动地对环境的刺激作出反应；突变的生成也并非完全是被动的过...
- 王政
- 关键词：DNA损伤TNFR
- 文献传递
- 低浓度MNNG诱发非DNA损伤依赖的细胞信号通路被引量：4
- 2003年
- 目的 :研究基因组 DNA损伤与细胞信号通路激活的关系以及低浓度 N-甲基 - N’-硝基 - N-亚硝基胍(MNNG)对细胞膜表面受体的影响。方法 :采用 ELISA法来检测蛋白激酶 A(PKA)的活性 ,不连续梯度密度离心法完成细胞脱核 ,以及免疫荧光法和激光共聚焦显微镜观察细胞表面受体聚集情况。结果 :0 .2 μmol/ L MNNG能在脱核细胞中引起 PKA活性升高 2 .3倍 ,并可在 5 min内引起 vero细胞表面生长因子受体和肿瘤坏死因子 α受体的聚集 ;在脱核细胞中 ,表面受体聚集现象与在完整细胞中一样。结论 :低浓度 MNNG对 PKA的激活和诱导细胞表面受体聚集均不依赖于基因组 DNA的损伤 ,表明细胞信号转导通路的起源可能位于细胞膜或者细胞质中。
- 王政王谷亮杨军高志华余应年
- 关键词：DNA损伤肿瘤坏死因子受体
- 低浓度MNNG激活转录因子被引量：7
- 2003年
- 目的 :为了进一步研究 N-甲基 - N’-硝基 - N-亚硝基胍 (MNNG)引起的非定标性突变的发生机制 ,观察了低浓度 MNNG对转录因子 NF- κB、CREB、AP- 1和 c- Myc的影响。方法 :采用分泌型碱性磷酸酶报告基因和瞬时转染实验检测转录因子活性。结果 :经 0 .2 μmol/L MNNG处理后 ,转录因子 CREB活性是溶剂对照组的 1.4倍 (P<0 .0 5 ) ,AP- 1和 NF- κB活性均为溶剂对照组的 1.3倍 (P<0 .0 5 ) ;而 c- Myc的活性在对照组和 MNNG处理组都较低。结论 :低浓度 MNNG可以激活转录因子 AP- 1、CREB和 NF- κB,对 c- Myc则无明显激活作用 ,提示一些转录因子的激活可能参与了 MNNG引起的非定标性突变发生过程。
- 王谷亮王政杨军余应年
- 关键词：转录因子信号传递
