高志华
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低浓度MNNG诱发FL细胞应答反应的蛋白质组学研究
- 2003年
- 目的 :研究低浓度甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)对人羊膜 FL细胞蛋白质表达谱的影响 ,以助于阐明环境致癌物引起细胞早期应答反应的分子机制。方法 :FL细胞分别用 MNNG和 DMSO(溶剂对照 )处理后 ,提取细胞总蛋白 ,用双向凝胶电泳分离蛋白质组成分 ,银染染色后用相应的分析软件分析数字化的凝胶图像 ,找出在 MN-NG处理后表达有差异的蛋白斑点 ,用基质辅助的激光解吸 -飞行时间质谱 (MAL DI- TOF)鉴定。结果 :在 MNNG处理后有 6 0多个蛋白斑点出现质和量的变化 ,其中 18个蛋白斑点只能在 MNNG处理的细胞中检测到 ,13个蛋白斑点则在 MNNG处理后消失 ;同时检测到 30个蛋白斑点在表达量上有显著变化 ,其中 16个点表达升高 ,14个点则表达降低。通过数据库的检索 ,初步的鉴定了一批结构和功能各异的蛋白。结论 :在低浓度烷化剂攻击后 ,FL细胞中的蛋白表达谱发生了显著的变化。
- 金静华高志华杨军余应年
- 关键词：蛋白质组学
- 苯并[a]芘诱导的FL细胞锌指蛋白等表达的改变被引量：1
- 2003年
- 目的 :观察苯并 [a]芘诱发的细胞应答反应 ,探讨苯并 [a]芘引发的基因突变和致癌机制。方法 :应用双向凝胶电泳与相应软件分析苯并 [a]芘处理后细胞内蛋白质的表达谱 ,MAL DI- TOF(matrix assisted laser desorp-tion/ ionization- time of flight)质谱结合数据库检索鉴定差异表达的蛋白斑点。结果 :细胞经苯并 [a]芘处理后 ,可引起广泛的蛋白质表达的改变 ,其中以锌指蛋白和一些参与转录调控的蛋白多见。结论 :这些表达改变的锌指蛋白和转录调控因子参与了苯并 [a]芘诱发细胞的应答反应 ,提示可能参与苯并 [a]芘引发的基因突变和肿瘤形成。
- 高志华金静华杨军余应年
- 关键词：苯并[A]芘锌指蛋白凝胶电泳MALDI-TOF质谱
- 低浓度MNNG诱发非DNA损伤依赖的细胞信号通路被引量：4
- 2003年
- 目的 :研究基因组 DNA损伤与细胞信号通路激活的关系以及低浓度 N-甲基 - N’-硝基 - N-亚硝基胍(MNNG)对细胞膜表面受体的影响。方法 :采用 ELISA法来检测蛋白激酶 A(PKA)的活性 ,不连续梯度密度离心法完成细胞脱核 ,以及免疫荧光法和激光共聚焦显微镜观察细胞表面受体聚集情况。结果 :0 .2 μmol/ L MNNG能在脱核细胞中引起 PKA活性升高 2 .3倍 ,并可在 5 min内引起 vero细胞表面生长因子受体和肿瘤坏死因子 α受体的聚集 ;在脱核细胞中 ,表面受体聚集现象与在完整细胞中一样。结论 :低浓度 MNNG对 PKA的激活和诱导细胞表面受体聚集均不依赖于基因组 DNA的损伤 ,表明细胞信号转导通路的起源可能位于细胞膜或者细胞质中。
- 王政王谷亮杨军高志华余应年
- 关键词：DNA损伤肿瘤坏死因子受体
