公共文化服务平台

基因芯片技术在微生物学研究中的作用被引量：4: 2011年; 基因芯片技术是20世纪90年代初新兴的分子生物学技术,具有高通量、高度并行性、灵敏度高、特异性强等优点。本文综述了基因芯片技术基本原理及其在微生物学方面的作用。; 李斌朱晓光张仁舟王承宇夏咸柱; 关键词：基因芯片微生物

利用基因芯片技术对新分离病毒的筛查与鉴定: 乙型脑炎是一种由蚊子传播的传染性疾病,一般病死率在5%—10%,在我国属于乙类传染病。乙型脑炎是由日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis virus,JEV)引起的,分类上属于黄病毒科(Flavivir...; 杨银辉朱晓光张永国刘伯华康晓平刘洪祝庆余; 文献传递

利用基因芯片技术对新分离病毒的筛查与鉴定: 目的:利用本研究室已建立的人类医学病毒属水平基因芯片筛查技术及主要虫媒病毒基因芯片检测技术,对2006年7月从山西临沂地区猪脑组织中分离到的未知病毒进行筛查与鉴定,确定其病原体。方法:状态从猪脑组织中分离到病原体,接种B...; 杨银辉朱晓光张永国刘伯华康晓平刘洪祝庆余; 关键词：基因芯片虫媒病毒细胞病变芯片检测; 文献传递

麻疹病毒属病毒检测基因芯片的建立被引量：7: 2010年; 目的建立主要麻疹病毒属病毒(麻疹病毒、犬瘟热病毒、小反刍兽疫病毒、牛瘟病毒、海豹瘟热病毒、海豚瘟热病毒等)种特异性检测基因芯片。方法应用生物信息学方法从GenBank获得麻疹病毒属病毒的全部基因组序列,以Primer Premier5.0软件设计针对上述病毒的寡核苷酸探针并制备基因芯片,以上述6种病毒及犬副流感病毒、VERO细胞及健康犬组织等验证寡核苷酸芯片的特异性,以细胞毒和临床病料检测基因芯片的灵敏度、特异性和重复性,芯片制备后低温放置3、6、12个月后检验其检测稳定性。结果基因芯片检测到麻疹病毒属病毒种特异性信号,无杂信号及交叉信号,芯片方法的灵敏度为10-2TCID50,是PCR的100倍,病料检测与PCR相符率为100%。结论初步建立了麻疹病毒属病毒种特异性基因芯片,该方法灵敏度高,特异性强,适用于麻疹病毒属的流行病学调查和种特异性鉴定。; 朱晓光李斌刘冰杨松涛高玉伟王铁成夏咸柱王承宇; 关键词：基因芯片种特异性

西尼罗病毒多表位基因的融合表达及其免疫保护作用研究被引量：1: 2007年; 目的研究西尼罗病毒（WNV）多表位基因的融合表达及其免疫保护作用。方法利用生物信息软件Biosun分析西尼罗全基因序列，确定表位基因片段并选择合适片段连接构成多表位基因。采用重叠PCR方法扩增该基因，构建多表位基因的原核重组表达载体pET-43a-M，进行融合表达和纯化。将表达蛋白加弗氏佐剂免疫小鼠并进行攻毒试验，观察其保护作用。结果分子克隆和构建了原核重组表达质粒pET-43a-M，表达和纯化了融合蛋白Nus-M，该蛋白免疫后的小鼠能够部分抵御西尼罗病毒的攻击。结论构建的西尼罗病毒多表位基因能够在原核细胞内表达，表达产物有较弱的免疫保护反应，为该病毒多表位抗原的串联及多表位疫苗研究提供了试验资料，但需要进一步改进。; 刘志国朱晓光杨保安刘伯华祝庆余; 关键词：西尼罗病毒多表位基因免疫保护

麻疹病毒属病毒种特异性探针的设计: 2010年; 目的设计能检测麻疹病毒、犬瘟热病毒、牛瘟病毒、海豹瘟热病毒、海豚瘟热病毒和小反刍兽疫病毒的基因芯片探针,制备芯片用于以上病毒的种特异性检测。方法在ncbi网站下载上述病毒全部基因组序列信息,利用生物学软件CLUSTAL W对从GenBank中获得的6种病毒所有序列进行比对,获得每种病毒有意义的特异序列,以此作为设计oligo探针的备选序列,利用生物软件Primer Premier 5.0设计探针。选择最优化探针,制备基因芯片,并进行特异性验证。结果获得6条长度均一,退火温度相近,特异性良好的种特异性寡核苷酸探针。结论利用GenBank数据库和生物学软件Primer Premier 5.0设计病毒检测基因芯片探针,是一种快速、有效的方法。; 朱晓光刘冰李斌孙远付玉杨松涛高玉伟王铁成夏咸柱王承宇; 关键词：种特异性探针基因芯片

应用两种基因组快速扩增方法进行病毒芯片杂交鉴定被引量：4: 2006年; 为了摸索均衡的病毒基因组扩增方法,建立高通量的病毒检测基因芯片技术平台,本研究以甲病毒属的辛德比斯病毒作为检测模型,分别以随机PCR扩增法和MDA(multipledisplacementamplification)扩增法扩增病毒基因组,并以两种扩增产物作为模板,扩增辛德比斯病毒的特异基因片段以初步验证基因组扩增的均衡性;然后将两种基因组扩增产物标记荧光染料后与基因芯片进行杂交;结果表明从两种基因组扩增产物中正确扩增出了辛德比斯的特定基因片段,作为探针可与基因芯片上的靶标基因特异性结合;基因组扩增产物与基因芯片进行杂交,可成功检测到甲病毒属的特异性信号,充分说明随机PCR扩增法和MDA扩增法扩增病毒基因组可用于病毒性病原体的基因芯片检测.; 康晓平刘洪杨银辉胡玉洋朱晓光祝庆余; 关键词：病毒芯片检测

13种虫媒病毒基因芯片检测方法的建立被引量：13: 2007年; 目的建立能对虫媒病毒进行属水平筛查及种水平鉴定的基因芯片技术,为虫媒病毒提供一种高通量的检测与鉴定技术。方法从GenBank获得13种虫媒病毒的全部基因组序列,利用Clustal X和BLAST等比对软件,设计针对这些虫媒病毒所在的3个属的通用寡核苷酸探针,用于病毒的属水平筛查。然后设计针对每种病毒的特异性寡核苷酸探针,用于每种病毒的检测鉴定。寡核苷酸探针长度均为70mer,将设计好的探针与GenBank上所有病毒基因组序列进行比对,验证其种属特异性,然后进行探针合成和基因芯片制备。所有病毒在BSL-3和BSL-2实验室进行培养,待检病毒核酸通过锚定随机PCR进行扩增,经荧光染料标记后与基因芯片杂交,利用激光共聚焦扫描仪扫描后进行结果分析。结果所检测的13种虫媒病毒均可获得种特异性及所在属的属特异性杂交信号,非特异性杂交信号不明显。分别用两种不同的病毒混合后,进行模拟混合病毒感染,也得到了相应的特异杂交信号。结论初步建立了13种虫媒病毒的基因芯片检测技术,可用于这些病毒的属水平筛查及种水平鉴定,并且可以进行混合感染标本的检测,为虫媒病毒的检测与鉴定提供了一种新的手段。; 朱晓光杨银辉康晓平刘洪胡玉洋曾海攀祝庆余; 关键词：寡核苷酸序列分析虫媒病毒

西尼罗病毒多表位基因免疫保护研究被引量：2: 2008年; 目的探讨西尼罗病毒多表位基因诱导体液及细胞免疫的可行性及其免疫攻毒保护作用。方法将西尼罗病毒多抗原表位基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-M。通过脂质体转染法将该多表位基因导入BHK细胞中,采用RT-PCR和IFA检测其在细胞内的瞬时表达。将重组质粒通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过间接免疫ELISA法、CTL杀伤功能检测和淋巴细胞增殖试验等,检测小鼠体内特异性体液免疫和细胞免疫的水平。在此基础上进行攻毒试验,分析重组质粒DNA对西尼罗病毒攻击的免疫保护作用。结果重组质粒pcDNA3.1-M能够在真核细胞内表达,采用IFA方法能在细胞内检测到西尼罗病毒特异性抗原。在抗原的刺激下,免疫后的小鼠脾淋巴细胞增殖显著,可诱导特异性CTL应答反应。攻毒试验显示,重组多表位基因能够对西尼罗病毒的攻击起到一定的保护作用,达到50%,中和抗体效价达到1∶50,应用免疫佐剂或应用重组蛋白加强免疫后,其保护率为62.5%,中和抗体效价达到1∶90。结论西尼罗病毒多表位基因可诱发特异性免疫应答,对西尼罗病毒感染具有保护作用,为其基因疫苗研制提供了一定的实验依据。; 刘志国朱晓光刘伯华祝庆余; 关键词：西尼罗病毒多表位基因 DNA免疫免疫保护

主要虫媒病毒基因芯片检测方法的建立: 虫媒病毒(Arbovirus)是指一类通过吸血昆虫叮咬敏感的脊椎动物而在人、畜间传播的病毒。其特点是病毒可在昆虫体内繁殖，但昆虫本身不发病，通过叮咬将病毒传播给人、畜，引起人畜患病。虫媒病毒分布在黄病毒科、披膜病毒科、布...; 朱晓光; 关键词：虫媒病毒基因芯片; 文献传递

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

朱晓光

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

朱晓光

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈