张宗霖 作品数:12 被引量:50 H指数:5 供职机构: 解放军第309医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 总后勤部科研项目 首都医学发展科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
中国人常见GJB2基因突变表达载体的构建及鉴定 被引量:6 2009年 目的:构建中国人常见GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白表达载体,寻找体外研究GJB2基因缺失突变致聋机制的有效途径。方法:用体外定点突变法构建235de1C、299-300delAT和176de116bp突变全序列与EGFP表达载体,以此为模板PCR扩增突变有效表达序列,将PCR产物连接到pMD19-T载体中,EcoRI/BamHI双酶切克隆载体,测序鉴定序列正确性后,将酶切产物插入pEGFP-N1载体中,脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白。结果:GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞质中。结论:成功构建了中国人常见GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp与EGFP的融合蛋白表达载体,为进一步研究其致聋机制奠定了基础。 张延平 张元丁 李丽娜 马磊 孙玉蕊 张宗霖 刘金伟 邓惠严 祝威关键词:突变 绿色荧光蛋白 部队中年干部咽喉反流病的流行病学研究 被引量:7 2012年 目的调查研究部队中年干部咽喉反流病(LPRD)的患病情况及影响因素,对开展针对性的防治工作及保证部队战斗力有重要意义。方法对参加2010年解放军309医院健康体检的部队中年干部,采用反流症状指数(RSI)评分表进行随机抽样问卷调查,以RSI≥13为LPRD可疑组,其余设为对照组,以RSI总分≥13为因变量,饮食及生活习惯为自变量进行Logistic回归分析,用Stata软件进行统计分析。结果 LPRD可疑组有307例,占11.7%(307/2616),对照组2309例,占88.3%(2309/2616)。Logistic回归分析结果显示吸烟、进食过饱、便秘对RSI评分异常起显著作用。结论进食过饱、便秘时用力排便等可通过兴奋迷走神经增加胃酸分泌量,诱发和增加食管下括约肌的一过性松弛,烟草中的尼古丁可降低食管下段括约肌压力,使其处于松弛状态,这些不良生活习惯是发生LPRD的重要危险因素。 李丽娜 张宗霖 张延平 赵宇静 周凤书 郝红霞 邓传福关键词:咽喉反流 流行病学 慢性咽炎患者咽分泌物中幽门螺杆菌的超高倍显微镜检测结果 被引量:9 2009年 目的探讨超高倍显微镜检测慢性咽炎患者咽部分泌物中幽门螺杆菌(HP)的分布情况。方法对慢性咽炎患者295例和正常对照30例,采用咽拭子均匀涂片,超高倍显微镜下观察,放大20 000倍,根据观察需要选择暗视野相差视野进行活体观察,由一名专业人员进行结果判定。卡方检验评价两组HP阳性率的差异。结果慢性咽炎患者中229例咽部分泌物中检测到幽门螺旋杆菌(77.63%,229/295),66例未发现HP(22.37%,66/295);正常对照组中,30例咽部分泌物中2例检测到幽门螺旋杆菌(6.67%,2/30),其余28例(93.33%,28/30)幽门螺旋杆菌阴性,经卡方检验χ2=6.670,P<0.05。结论幽门螺旋菌可能是慢性咽炎患者咽部一种被忽视的致病菌,超高倍显微镜有可能成为筛查咽部分泌物中幽门螺旋菌的一种新方法,幽门螺旋菌感染与喉咽反流的关系还需要进行进一步研究证实。 李丽娜 张延平 刘金伟 马磊 张宗霖 邓惠严 罗晓培 王亚英 周凤书关键词:显微镜 幽门螺旋杆菌 咽炎 正常人扩展高频测听结果报告 被引量:1 2001年 目的 :研究正常人扩展高频听敏度 ,观察扩展高频听力随年龄增加的细微变化。方法 :用意大利Amplaid - 4 6 0型听力计 ,频率范围 8~ 18kHz。测试正常人 12 8人、2 5 6耳 ,17~ 5 0岁 ,男 92人 ,女 36人 ,其中17~ 2 9岁 90人 ,30~ 5 0岁 38人 ,12 5Hz~ 8kHz纯音各频率听阈≤ 2 0dBHL ,声导抗测听正常。以 5岁为一年龄段分 5组进行分析。结果 :1 正常年轻人 (17~ 2 9岁 )高频听阈总的趋势是随频率提高 ,听阈逐渐增加 ,出现率逐渐下降 ,在 14kHz以上频率更为显著 ;2 正常人 17~ 19岁、2 0~ 2 4岁、2 5~ 2 9岁、30~ 34岁、35岁以上各年龄组间 12、14、16、18kHz听阈相比差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,随年龄增加听阈逐渐提高 ,高频听阈出现率逐渐下降 ,随频率增加各年龄组差距逐渐明显 ,14kHz以上频率最为明显。结论 :人耳的老化是一个逐渐的过程 ,随年龄增加听阈提高。频率越高受影响越明显。扩展高频纯音测听结果可反映耳蜗亚临床病理状态 ,有利于早期发现听觉感受器病变 。 张延平 周凤书 申行运 孙玉蕊 陈嵘 张宗霖 谢放平 陈桂芬关键词:听力 测听法 年龄因素 中国人常见非综合征性聋杂合子发病机制的实验研究 2009年 目的构建人野生型CX30红色荧光表达载体,将Cx26野生型和突变型分别与CX30共同转染HEK293细胞,为揭示Cx26--235delC的杂合突变患者的发病机制提供实验依据。方法构建pCx30--IREs2-DsRed—Express真核表达载体,将pcx30—IREs2-DsRed—ExPress分别与pCx26--EGFP或pCx26--235deIC--EGFP以1:1的比例用脂质体法转染HEK293细胞,转染48h后在激光共聚焦显微镜下观察结果,计算同时表达红色和绿色的细胞阳性率,卡方检验比较两组阳性率的差异。结果pCx30--IRES2--DsRed--Express与pCx26--EGFP共同转染HEK293细胞后,同时出现红色和绿色荧光的细胞占全部转染阳性细胞的27.32%(91/333)。pCx30—IRES2--DsRed--Express与pCx26--c235deIC--EGFP共同转染HEK293细胞后,同时表达红色与绿色信号的细胞占全部阳性细胞的2.19%(4/183),明显低于两种野生型质粒共同转染的阳性率,经卡方检验两者差异具有显著性意义(x2=52.89,P〈0.01)。结论Cx26发生C.235deIC突变后,丧失了与野生型Cx30形成异型性缝隙连掇gapjunctions,GJs)的能力,使异型性GJs的总数显著下降,导致耳蜗失去了重要的细胞间联系通道,推测可能与部分c.235delC杂合子耳聋的发生有关。 张延平 李丽娜 张宗霖 孙玉蕊 马磊 王戈 佟明望 毕欣欣关键词:突变 杂合子 耳聋 Van der Hoeve综合征一家系听力学调查 2003年 目的:报导— Van der Hoeve综合征家系并进行听力学检测。方法:对家系进行纯音测听、摄全身骨骼X线片,采集外周静脉血进行基因连锁分析。结果:家系4代24人,听力下降4例7耳,其中传导性聋3例5耳,混合性聋1例2耳。听力下降发生年龄最小5岁,随年龄增加,骨导听力逐渐下降,听力损失加重,出现混合性聋。其中有蓝色巩膜、骨折、传导性聋3人,蓝色巩膜、传导性聋3人,仅有蓝色巩膜1人。骨折幼年发病,多发生在四肢管状骨及锁骨,1例后遗畸形。结论:家系疾病连续多代遗传,符合单基因常染色体显性遗传,且外显率较高,属综合征性遗传性聋。 张延平 周凤书 黄德亮 张宗霖 孙玉蕊 黄尚志 谢放平 陈嵘关键词:VAN 听力学 基因连锁分析 外周静脉血 常染色体显性遗传 成骨不全 中国人常见GJB2基因突变片段TA克隆载体构建 2009年 目的应用TA克隆技术构建含中国人常见GJB2基因突变片段的载体,为构建突变绿色荧光蛋白融合载体提供基础。方法首先利用定点诱变法在体外构建235delC.299-300delAT和176del16bp绿色荧光蛋白非融合载体,以此为模板利用PCR扩增突变基因片段,然后将PCR扩增产物克隆到TA载体上,用限制性内切酶法和测序法鉴定重组质粒序列正确性。结果用限制性内切酶法和测序方法证实扩增片段为目的片段。结论成功地构建了235delC、299-300delAT和176del16bp突变基因片段TA克隆载体,为构建突变绿色荧光蛋白融合载体、进一步研究突变致聋机制奠定了基础。 张元丁 张延平 李丽娜 马磊 孙玉蕊 张宗霖 刘金伟 邓惠严 祝威关键词:突变 自制药物冰块对扁桃体切除术后早期止痛的临床观察 被引量:13 2003年 目的寻找一种扁桃体切除术后早期止痛的有效方法。方法60例扁桃体切除术后成年人(平均年龄24.5岁)随机分为两组,实验组和对照组。实验组病人术后含化由10%葡萄糖注射液250ml、去痛片0.5g、云南白药胶囊1粒和浓薄荷水混匀冷冻而成的药物冰块。对照组含化由10%葡萄糖注射液冷冻制成的冰块。记录最痛出现时间、最痛持续时间及术后在最痛时间内张口疼痛、吞咽疼痛和耳痛的得分等。数据用SSPS10.0统计软件进行分析。结果实验组最痛出现时间晚于对照组(P<0.01),张口疼痛和吞咽疼痛程度也比对照组轻(P<0.05)。结论 自制药物冰块能推迟扁桃体术后最痛高峰出现时间,减轻术后的张口疼痛和吞咽疼痛。药物冰块配置简单,安全无副作用,口含给药病人易接受,是扁桃体术后止痛的一种有效方法。 张宗霖 周凤书关键词:药物冰块 扁桃体切除术 止痛 青年人高频测听及其意义 被引量:13 2002年 张延平 周凤书 申行运 孙玉蕊 陈嵘 张宗霖 谢放平 陈桂芬关键词:青年人 纯音测听 听力损害 梅尼埃病 高频测听 装甲车行驶训练对动态姿态平衡的影响 被引量:2 2001年 目的研究装甲车训练对动态姿态平衡的影响。方法对 56名被试者在装甲车训练前后进行动态姿态平衡测试。结果装甲车训练后被试者的感觉整合测试 (sensoryorganizationtest)状态 1、2和 3的平衡分SOT1 (P <0 .0 5) ,SOT2 (P <0 .0 0 1 )和SOT3(P <0 .0 0 1 )有显著降低 ,状态 4和 6的平衡分SOT4(P <0 .0 0 1 )和SOT6(P <0 .0 0 1 )有显著增加 ;静态本体感觉分SEN1 (SOT2 /SOT1× 1 0 0 ,P <0 .0 1 )有显著降低 ,而视觉SEN2 (SOT4/SOT1× 1 0 0 ,P <0 .0 1 )和动态本体觉SEN5(SOT( 4 + 5+ 6) /SOT( 1 + 2 + 3)× 1 0 0 ,P <0 .0 1 )有显著增加 ;感觉整合测试状态 2和 3的运动策略分STRAT2 (P <0 .0 1 )和STRAT3(P <0 .0 0 1 )有显著降低。结论装甲车行驶训练对动态姿态平衡能力和感觉整合有影响。 古华光 裴静琛 周凤书 申行运 张延平 张宗霖关键词:装甲车