孙波
- 作品数：25 被引量：114H指数：6
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院消化内科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌HpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建及免疫原性检测被引量：4
- 2004年
- 目的 构建含幽门螺杆菌 (H .pylori)hpaA基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 应用PCR方法从H .pylori标准菌株基因组DNA中扩增hpaA基因 ,克隆入 pUCmT载体 ,检测hpaA基因序列 ,经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,通过PCR和酶切反应鉴定。重组载体pIRES hpaA转化入减毒鼠伤寒沙门菌LB5 0 0 0 ,抽提质粒 ,再转化入SL72 0 7,反复传代 ,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。重组载体pIRES hpaA通过脂质体法转染COS 7细胞 ,SDS PAGE及Western印迹法检测pIRES hpaA表达HpaA蛋白的免疫原性。结果 成功扩增出长约 75 0bp的hpaA基因 ,测序结果表明扩增出的hpaA基因与H .pylorihpaA序列一致 ,PCR和酶切鉴定结果证实hpaA基因克隆入真核表达载体pIRES,成功构建了含hpaA基因的幽门螺杆菌核酸疫苗pIRES hpaA ,并成功构建了幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗 ,重组核酸疫苗稳定 ,Western印迹法检测到了特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的H .pylorihpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗 ,为进一步探索其免疫作用奠定了基础。
- 徐灿李兆申屠振兴杜奕奇孙波杨哗龚燕芳金晶许国铭
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗鼠伤寒沙门菌
- 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗的构建及鉴定
- 2004年
- 目的 构建幽门螺杆菌 (Hp)中性粒细胞激活蛋白 (HP NAP)DNA疫苗。 方法 扩增全长napA(编码HP NAP) ,将其与克隆载体 pBT连接 ,经测序及同源性分析后 ,将相应片段亚克隆入真核表达载体pIRES ,经双酶切及PCR鉴定。 结果 PCR扩增一 4 35bp产物 ,核苷酸序列测定及BLAST分析表明 ,所克隆序列与基因库中Hp悉尼株 (SS1)napA核苷酸及蛋白质的同源性均为 98%。ANTHEPROT软件预测其蛋白质具有良好的疏水性和抗原性。经PCR及双酶切鉴定 ,证实成功构建携带napA的重组真核表达质粒 pIRES napA。结论 成功构建并鉴定了HP NAP重组DNA疫苗 ,为进一步研究其免疫原性及研制口服DNA疫苗奠定了基础。
- 杨骅孙波满晓华龚燕芳屠振兴李兆申
- 关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗
- 幽门螺杆菌与胃癌被引量：5
- 2003年
- 幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌的发生密切相关,其分子机制非常复杂,可能通过多个途径的调节而发生。动物模型的建立为阐明Hp感染在胃癌发生中的作用奠定了基础。本文就近年来该领域流行病学、动物模型、分子发病机制等研究作一综述。
- 孙波杨骅屠振兴李兆申
- 关键词：幽门螺杆菌感染胃癌发病机制动物模型流行病学
- 携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白活减毒鼠伤寒沙门菌口服重组DNA疫苗株的构建被引量：3
- 2004年
- 目的:构建携带人幽门螺杆菌(H pylori)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)基因(napA)的重组活减毒鼠伤寒沙门菌口服DNA 疫苗. 方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并同源性分析后,将其亚克隆入真核表达载体pIRES,鉴定正确后将重组质粒转化活减毒鼠伤寒沙门菌. 结果:重组质粒经PCR及双酶切,证实成功构建了携带HP-NAP基因的重组真核表达质粒pIRES-napA,后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL7207.所克隆435bp napA与GenBank中SS1-napA核苷酸和蛋白质的同源性均为98%. 结论:成功构建并鉴定了携带HP-NA2P基因的重组活减毒鼠伤寒沙门菌口服DNA疫苗,为多价抗H pylori口服DNA疫苗的研制奠定了基础.
- 孙波何苗杨骅金晶满晓华龚燕芳屠振兴杜奕奇李兆申
- 关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白
- 10年住院患者死亡疾病谱分析
- 目的通过对我院1993～2002年住院患者死亡病案的调查分析,了解本院住院患者死亡病例的死因构成和特点,为不同年龄阶段疾病的防治重点提供参考依据。方法由我院专职人员采用回顾性调查方法,对我院1993～2002年住院死亡病...
- 拓西平苗振春李峰刘勇周俊贾丽艳朱嘉琦赵勇孙波
- 文献传递
- 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白核酸疫苗实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 构建幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(Hp -NAP)口服DNA疫苗,初步评价其免疫治疗作用,为Hp疫苗研制奠定基础。方法 PCR扩增全长Hp- NAP基因(napA) ,测序并同源性分析后,亚克隆入真核表达载体pIRES ,双酶切并PCR鉴定。将重组质粒pIRES- napA转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,口服接种长期感染Hp之BALB/c小鼠,观察疗效。结果 PCR扩增出一4 35bp产物,序列分析表明,所克隆序列与GenBank中SS1 napA核苷酸及蛋白质同源性均>98%。PCR及双酶切证实,成功构建了携带napA的重组减毒鼠伤寒沙门菌DNA疫苗。疫苗接种后4周,治疗组3/ 4小鼠快速尿素酶检测阴性,对照组均阳性(P =0 .0 4 76 ) ;治疗组血清抗Hp NAP抗体效价明显升高。结论 成功构建了具有较好免疫治疗作用的Hp -NAP口服重组DNA疫苗,为进一步研制多价抗HpDNA疫苗奠定了基础。
- 孙波杨骅李兆申龚燕芳屠振兴许国铭
- 关键词：中性粒细胞激活蛋白NAP减毒鼠伤寒沙门菌亚克隆PCR扩增
- 携带幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建被引量：2
- 2005年
- 目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)技术从基因组DNA扩增ureB基因,克隆入pUCmT载体,检测ureB基因序列,经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应进行鉴定。重组载体pIRES ureB转入减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,再次转入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES ureB转染COS 7细胞,SDS PAGE Western 印迹法检测pIRES ureB表达蛋白的免疫原性。结果 扩增出长约1700 bp的ureB基因,测序结果表明扩增出的ureB基因与基因库Hp ureB序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实ureB基因克隆入真核表达载体pIRES,并成功构建了Hp ureB基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,重组核酸疫苗稳定,并且Western印迹法检测到特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的Hp UreB减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,为进一步探索其体内的免疫作用奠定了基础。
- 徐灿李兆申屠振兴杜奕奇龚燕芳金晶满晓华孙波杨哗许国铭
- 关键词：减毒鼠伤寒沙门菌幽门螺杆菌尿素酶B亚单位WESTERN印迹法COS-7细胞DNA扩增免疫反应性
- 新兵上消化道疾病与军事训练、心理应激特征关系的调查被引量：26
- 2003年
- 目的 :为了解新兵上消化道疾病与军事训练、心理应激的关系 ,进而为防治官兵消化道疾病提供理论依据。方法 :以新兵军事训练为背景 ,采用快速尿素酶试验判断Hp感染情况 ,胃镜检查同时取胃黏膜活检及B超检查 ,了解 15 0名入伍 1个月新兵消化道疾病发病状况 ,并运用SCL 90问卷调查进行心理相关分析。结果 :SCL 90≥ 16 0组严重胃病的发生率约为 31 9%(15 /47) ,显著高于SCL 90 <16 0组 16 8%(16 /95 ,χ2 =4 186 ,P <0 0 5 )。有消化道症状新兵SCL 90积分为 170 0 0± 4 2 0 6 ,与无症状组的 136 90±30 5 6比较 ,差异亦非常显著 (t =5 4 2 2 ,P <0 0 1)。表明Hp感染可能与其他因素一起 ,促发新兵中较高的胃肠道疾病的发生率。结论 :军事训练和心理应激可能引发或加重胃肠道疾病。
- 许涛孙波邹晓平李兆申
- 关键词：新兵上消化道疾病军事训练心理应激HP感染
- 铝碳酸镁等药物对大鼠非固醇类抗炎药性胃粘膜损害的预防作用被引量：12
- 2000年
- 目的 :探讨铝碳酸镁 (胃达喜 )对非固醇类抗炎药 (NSAIDs)性胃粘膜损害的预防作用。 方法 :以吲哚美辛 (消炎痛 )复制大鼠 NSAIDs性胃粘膜损伤模型 ,以光镜和扫描电镜观察粘膜损伤状况 ;观察预防应用铝碳酸镁、西咪替丁 (泰胃美 )和硫糖铝 (舒克菲 )后模型动物胃粘膜形态学改变 ,同时测定胃粘膜血流 (GMBF) ,6 -酮 -前列环素 F1α(6 - keto- PGF1α) ,血栓素 B2(TXB2 )水平。 结果 :吲哚美辛引起明显胃粘膜损害 ,伴 GMBF减少 ,6 - keto- PGF1α及 TXB2 水平下降 (P<0 .0 1) ,成功制备了大鼠 NSAIDs性胃粘膜损伤模型。预防应用铝碳酸镁等 3种药后吲哚美辛所致胃粘膜损害减轻 (P<0 .0 1) ,GMBF增加 (P<0 .0 1) ,6 - keto- PGF1α,TXB2 抑制减弱。 结论 :预防应用粘膜保护剂铝碳酸镁等药物可减轻 NSAIDs性胃粘膜损伤。
- 孙波李兆申
- 关键词：铝碳酸镁胃粘膜损伤
- 新兵军事训练时神经内分泌激素水平的变化被引量：11
- 2004年
- 目的 :研究军事训练应激过程中新兵神经内分泌激素水平与心理状态的关系。方法 :随机选取陆军某部 15 0名新兵 ,于训练第 15天空腹抽血检测血清皮质醇和β 内啡肽 (β EP)浓度 ,同时行SCL 90精神问卷调查。结果 :血清皮质醇浓度均值为 384 84± 10 5 0 7nmol/L ,β EP浓度为 2 3 10± 12 5 0ng/L。SCL 90≥ 16 0组血清皮质醇的均值为 4 10 13± 99 4 1nmol/L ,显著高于SCL 90 <16 0组 (373 19± 10 2 78nmol/L ,P <0 0 5 ) ,且SCL 90总积分与皮质醇浓度存在正相关关系 (r =0 179,P <0 0 5 ) ,两组 β EP浓度差异不显著。结论 :血清皮质醇水平的变化可在一定程度上反映新兵军事训练引起的心理应激强度。
- 许涛李松华孙波邹晓平李川云严进
- 关键词：新兵军事训练神经内分泌激素Β-内啡肽心理应激
