郭军堂
- 作品数：31 被引量：68H指数：6
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- β-synuclein对SH-SY5Y细胞酪氨酸羟化酶表达的影响
- 2015年
- 目的探讨β-synuclein对酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。方法采用流式细胞技术检测稳定表达β-synuclein神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞(实验组)与神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞(对照组)内活性氧类物质(ROS)的含量。采用原位免疫荧光法、免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹法检测实验组与对照组细胞内TH的表达情况。结果流式细胞仪显示实验组的ROS峰值较对照组左移。原位免疫荧光法、免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹法检测结果显示TH在实验组中的表达水平较对照组低(P均<0.05)。结论β-synuclein可能抑制TH的表达。
- 倪明杨璐樊秀双满建梅郭军堂
- 关键词：帕金森病酪氨酸羟化酶
- 真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1的构建及鉴定
- 2014年
- 目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP及目的基因Nurr1的真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1,并检测其在293T细胞中的表达。方法:采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从大鼠黑质中获取Nurrl基因,连接T载体测序正确后与真核空载体pIRES2-EGFP一起,经Nhe1和Xho1双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pIRES2-EGFP-Nurr1;真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1测序正确后采用脂质体法将其转染293T细胞,倒置荧光显微镜下观察转染效率,PCR检测Nurr1基因mRNA水平的表达情况,免疫印迹试验(Western Blot)检测Nurr1蛋白的表达水平。结果:酶切及测序鉴定证实成功构建了重组真核表达载体pIRES2-EGFP-Nurr1;293T细胞转染pIRES2-EGFP-Nurr1后可以高度表达绿色荧光,有效转录Nurr1基因并正确的高表达Nurr1蛋白。结论:成功构建Nurr1真核表达载体且在293T细胞中高水平表达,为进一步转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),基因治疗帕金森病奠定基础。
- 王晓晓付文玉郭军堂庄文欣林志娟
- 关键词：真核表达载体
- COX-2在胃癌组织中的表达及与Hp感染的关系被引量：6
- 2010年
- 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)的表达与胃癌发生的关系及幽门螺杆菌(Hp)感染对COX-2表达的影响,为研究Hp感染致胃癌的机制及以COX-2为靶标的胃癌防治提供理论依据。方法采用免疫组织化学染色法(SP法)检测对照组10例正常胃黏膜及实验组50例胃癌组织中COX-2的表达情况,用快速尿素酶诊断法和13C呼气试验两种方法检测胃癌患者Hp感染状况,分析它们在不同组织中的表达及与胃癌的关系。结果胃癌组织COX-2的阳性表达率明显高于正常胃黏膜(P<0.001);COX-2的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。有Hp感染的胃癌组织中COX-2的阳性表达率明显高于未感染者(P<0.05)。结论 COX-2参与胃癌的发生发展且与胃癌的侵袭、转移及预后有一定的关系;Hp感染可能上调胃癌组织中COX-2的表达。
- 刘江月徐洪平张代娟刘同美崔晓栋郭军堂
- 关键词：胃肿瘤COX-2HP感染免疫组织化学
- 新形势下的病理生理学教学改革被引量：2
- 2015年
- 病理生理学是基础医学与临床医学之间的桥梁学科,学好这门课程对医学生具有重要意义。实施病理生理学教学改革,提高教学效果,是每一位病理生理学教学工作者的目标和动力。
- 高伟郭军堂
- 关键词：病理生理学教学改革
- 青心酮防治动脉粥样硬化与TLR4信号转导途径的关系被引量：2
- 2009年
- 目的观察青心酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化病变的影响及其与平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞Toll样受体4T(oll-like receptor4,TLR4)信号转导途径的关系。方法取小鼠胸主动脉,进行平滑肌细胞、内皮细胞的原代培养,巨噬细胞RAW 264.7细胞株传代培养。实验分4组,即空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的培养基,不加入任何药物),脂多糖组L(PS组)(加入等数量的培养基3h,再加入LPS10ng.mL-1刺激8h),DHAP组(先加入溶有DHAP 1×10-7mol.L-1的培养基培养3h,再加入LPS 10ng.mL-1刺激8h),辛伐他汀对照组(先加入溶有辛伐他汀5×10-7m ol.L-1的培养基培养3h,再加入LPS 10ng.mL-1刺激8h)。收集各组细胞蛋白,应用Western-blot检测TLR4蛋白含量。收集上清液,用ELISA法检测TNF-α。取8周龄雄性ApoE(-/-)小鼠20只,随机分成两组,每组10只,模型对照组建立小鼠AS模型,青心酮治疗组经胃管灌注青心酮10mg.kg-1.d-1。所有实验小鼠均饲以"西方类型膳食"饲料喂养12周。剪取主动脉根部行石蜡切片及HE染色,观察主动脉粥样硬化的病变情况。结果青心酮组血管平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞TLR4蛋白含量均明显低于未处理组(P<0.01),但高于空白对照组;与辛伐他汀组比较无显著性差异;青心酮组TNF-α含量明显低于未处理组(P<0.01),但高于空白对照组;与辛伐他汀组比较,具有显著性差异(P<0.01);青心酮组AS病灶形成减少。结论青心酮能够在一定程度上减少AS病灶的形成,可能是通过TLR4信号转导途径发挥作用的。
- 张代娟刘同美刘江月崔晓栋郭军堂王建英叶笃筠
- 关键词：青心酮动脉粥样硬化TOLL样受体4载脂蛋白E基因敲除小鼠
- 稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株的构建
- 2013年
- 目的构建稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株。方法利用脂质体转染技术将质粒pcD-NA3.1-β-synuclein转染SH-SY5Y细胞,通过Zeocin进行抗性筛选。采用原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western blot杂交检测β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达情况;通过MTT比色法检测β-synuclein稳定表达对SH-SY5Y细胞增殖的影响。结果原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western blot检测结果显示β-synuclein在SH-SY5Y细胞中的表达水平较对照组明显升高;稳定表达β-synuclein的细胞增殖程度较对照组明显增高(P<0.05)。结论β-synuclein在SH-SY5Y细胞中稳定表达,为后续的研究提供有用的细胞模型。为进一步研究β-sy-nuclein对帕金森病发病神经保护作用的研究奠定了良好的基础。
- 王桂芬周英泽陈安琪郭军堂
- 关键词：帕金森病
- 清洁级Wistar大鼠标准指标被引量：11
- 2003年
- 目的 :建立清洁级 Wistar大鼠的正常生理、血常规及生化指标。方法 :分别选取 6周龄、 12周龄、18周龄和 3 0周龄的清洁级 Wistar大鼠 ,雌雄各 2 0只。测量动物的主要生理指标 (生长曲线、体重回归方程、脏器系数和大、小肠长度 )、血常规及生化指示。结果 :雄性动物的体重增长趋势比雌性动物高 ;随着年龄的增长 ;脏器系数逐渐降低。相同年龄段动物的 WBC、GR%、AL T、AL P、L DL-CHOL雄性比雌性明显偏高 ( P<0 .0 1) ;而 TP、 AL B、 TRIG比雌性动物明显偏低 ( P<0 .0 1)
- 高虹朱华黄澜张兵林刘亚莉郭军堂朱金桂秦川
- 关键词：清洁级WISTAR大鼠生理指标血常规生化指标动物实验
- 青心酮对载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉粥样硬化形成及斑块中主要细胞的TLR4表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察青心酮对小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块中平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞Toll样受体4表达(Toll-like receptor 4,TLR4)的影响,及对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化病变的影响。方法取小鼠胸主动脉,进行平滑肌细胞、内皮细胞的原代培养,RAW264.7(小鼠巨噬细胞)细胞株传代培养。实验分4组:空白对照组,脂多糖(LPS)组,青心酮组,辛伐他汀组。收集各组细胞总mRNA及蛋白,应用RT-PCR及Western-blot方法检测TLR4 mRNA及蛋白。取30只8周龄雄性ApoE(-/-)小鼠,随机分成3组:模型组(n=10),每天生理盐水灌胃;青心酮治疗组(n=10)经胃管灌注青心酮10mg·kg-1·d-1,辛伐他汀治疗组(n=10)经胃管灌注辛伐他汀10mg·kg-1·d-1。所有实验小鼠均饲以"西方类型膳食"饲料12周。剪取主动脉根部切片及HE染色观察主动脉粥样硬化病变情况。结果1×10-7mol·L-1青心酮组血管平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞TLR4 mRNA和蛋白含量明显低于未处理组(P<0.01);与辛伐他汀组比较无显著性差异;青心酮组AS病灶形成减少。结论青心酮可下调LPS活化的小鼠平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞TLR4mRNA和蛋白的表达,在一定程度上能减少AS病灶的形成,可能通过TLR4途径发挥其作用。
- 张代娟刘同美刘江月崔晓栋郭军堂王建英叶笃筠
- 关键词：青心酮TOLL样受体4
- 2型糖尿病大血管病变与内脂素的关系探讨及降糖调脂灵的干预作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察降糖调脂灵保护2型糖尿病大血管病变与内脂素的关系。方法 10只健康成年♂Wistar大鼠作为正常对照组,喂以标准饲料不做处理;50只健康♂大鼠通过高糖高脂饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病,随机选取30只成模大鼠分为3组:糖尿病模型组(n=10,灌胃,等量生理盐水)、二甲双胍组(n=10,灌胃,二甲双胍200 mg·kg 1·d 1)、降糖调脂灵组(n=10,灌胃,降糖调脂灵浓缩液5 mL·kg 1·d 1),继续喂以高糖高脂饲料。12周后取血测血糖、血脂、单核细胞趋化因子和细胞间黏附分子的含量;Western-blot法检测血清内脂素表达水平;光镜观察主动脉壁情况,透射电镜观察主动脉超微结构改变。结果降糖调脂灵组血糖、血脂、单核细胞趋化因子和细胞间黏附分子的含量降低,内脂素表达减少,主动脉内皮细胞损坏减轻。结论降糖调脂灵保护T2DM大血管病变,可能与抑制内脂素表达,降低血糖、血脂,减轻炎症反应有关。
- 刘江月张代娟王建英侯建平刘同美郭军堂
- 关键词：2型糖尿病大血管病变
- 开展以病理生理学为中心的医学综合实验竞赛的实践与探索
- 目的:病理生理学是基础医学和临床医学的"桥梁",但其内容抽象难懂.如何把抽象的理论形象化,把复杂的问题简单化,把枯燥的内容趣味化,是亟需解决的问题.方法:为解决这一问题,我们尝试联合生理学、生化及人体机能学、生化、诊断实...
- 崔晓栋郭军堂刘江月张代娟高伟
