李芳 作品数:25 被引量:45 H指数:4 供职机构: 湖南农业大学园艺园林学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 湖南省研究生科研创新项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 轻工技术与工程 更多>>
抗柑橘衰退病RNAi载体的构建及遗传转化 柑橘衰退病(citrus tristeza virus,CTV)是世界性的柑橘病害,对我国柑橘产业的危害越来越严重。p23基因是柑橘衰退病的沉默抑制子之,在感病植株内的积累与感病程度相关。本研究拟利用p23基因,通过RN... 李芳 戴素明 杨莉 邓子牛关键词:柑橘 甜橙 柑橘衰退病 RNAI 文献传递 JERF1提高水稻抗旱性的分子机理研究 干旱、低温和盐碱等非生物胁迫严重影响着植物的生长和发育。在长期的进化过程中植物形成多种适应机制以应答不同的生物胁迫和非生物胁迫,其中转录因子激活或者抑制基因的表达是植物适应逆境胁迫的重要方式之一。ERF类转录因子是一类植... 李芳关键词:水稻 抗旱性 文献传递 不同栽培基质下水生植物的适应性 被引量:1 2008年 设泥炭栽培、水苔藓栽培和地栽3种处理,对再力花、海寿花、溪荪和轮叶石胡荽在3种基质栽培处理下的适应性进行了比较.结果表明:3种处理下,再力花、海寿花和轮叶石胡荽的植株地上部、地下部生物量均以地栽处理最高,植株根冠比均以地栽处理最低;溪荪在3种处理下的适应性没有表现出明显差异;4种植物在3个处理下的根系活跃吸收面积率变化趋势相似,基本在40%~50%波动,没有明显差异;4种植物在泥炭栽培和水苔藓栽培基质下都有一定的适应性. 丁华侨 李芳 陈甜甜 常乐 吴铁明关键词:水生植物 栽培基质 适应性 高职涉农专业大学生农业科技素质培育研究 当前,我国经济发展进入新常态,正从高速增长转向中高速增长,如何在经济增速放缓背景下继续强化农业基础地位、提高农业生产力,促进农民持续增收,是必须破解的一个重大课题。农业科学技术是提高农业生产力的关键因素,高职大学生的农业... 李芳关键词:农业科技 涉农专业 高职大学生 文献传递 柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化 被引量:1 2016年 【目的】构建柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)含p23的RNAi载体,以获得具有抗性的柑橘转基因植株。【方法】基于转化病毒基因介导抗性,根据NCBI公布的CTV基因组序列,查找p23保守序列,设计并克隆两条不同长度的片段。对两条片段和植物表达载体p BI 121进行双酶切和连接来构建RNAi载体。初步预测所构建的载体发生RNAi抗病毒的可行性。利用农杆菌介导的瞬时表达技术将含RNAi载体的农杆菌注射入CTV指示植物墨西哥莱蒙的叶片,利用GUS组织化学染色法观察叶片中载体发生瞬时表达的情况。发生瞬时表达的叶片接种CTV T36基因型,利用酶联免疫反应(ELISA)检测病毒含量。同时,提取叶片的RNA并反转录为c DNA,利用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测CTV p20,通过该基因的表达量反映叶片中的病毒含量。通过农杆菌介导的遗传转化将RNAi载体转入大红甜橙实生苗上胚轴节间茎段,抗生素筛选得到的芽嫁接至枳橙实生试管苗。提取大红甜橙叶片的DNA,通过PCR扩增确定其是否为转基因阳性;目的基因检测为阳性的植株二次嫁接至温室保存的酸橙实生苗;根据插入的p23基因序列设计q-PCR引物,检测转基因植株中p23的表达情况。取CTV T36基因型寄主的带皮芽,用腹接法接种大红甜橙转基因植株。取接种后新萌发枝梢上的叶片,用检测瞬时表达叶片同样的方法分析植株的抗病性。对于第1次接种后未检测出病毒感染的植株,进行第2次接种并检测分析。【结果】克隆得到CTV p23 513 bp的长片段和291 bp的短片段,与载体p BI121连接后成功构建含发夹结构的来自病原且能靶向目的基因的RNAi载体,命名为p23-RNAi。注射p23-RNAi的墨西哥莱蒙叶片经GUS染色后能够产生蓝色斑点,表明农杆菌p23-RNAi可以在叶片中发生瞬时表达;接种CTV后第15和30天,瞬时表达p23-RNAi的墨西哥莱蒙叶片ELISA检测结果均为阴性,同时q-PCR检测 李芳 邓子牛 赵亚 李大志 戴素明关键词:柑橘衰退病毒 RNAI 莸属(Caryopteris)植物研究进展 被引量:8 2008年 莸属植物约15种,分布于亚洲中部和东部,尤以中国最多.文章对中国莸属植物的资源分布、形态特征及生物学特性、观赏特性、园林应用形式、繁殖和栽培管理等方面的研究和利用现状进行综述.鉴于莸属植物生态效益和绿化美化价值日益受到重视,对其观赏价值开发和利用提出展望. 陈翠林 李芳 王丽 张海英 吴铁明关键词:园林应用 繁殖技术 生物学特性 AP2/EREBP转录因子及其在植物抗逆中的作用 被引量:9 2008年 近年来,转录因子在植物防卫反应和逆境胁迫应答中的应用越来越广泛,综述了AP2/EREBP转录因子的结构特征及其在植物抗逆作用中的研究进展。 李芳 李先文 黎定军关键词:AP2/EREBP 转录因子 植物抗逆性 柑橘类病毒CVd-Ⅲ的检测及鉴定 被引量:2 2009年 Total RNA was isolated from phloem of young shoots and retro-transcripted to cDNA by RT-PCR(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) with specific primer pair of CVd-Ⅲ (citrus viroid-Ⅲ), the results of molecular detection indicated that the CVd-Ⅲ specific bands, about 300 bp, were detected in 27 of the 49 samples collected from different counties in Hunan Province and 1 sample presented by Catania University. All the amplified cDNA fragments were cloned and sequences, sequence analysis compared with the reported CVd-Ⅲ sequences in GenBank showed that: sequences of 21 samples were the same and completely identical with CVd-Ⅲb (AF184147); however, the sequences of the other 6 samples and presented sample were diversified from the reported CVd-Ⅲ sequences in GenBank. 马先锋 李芳 胡春华 韩健 戴素明 曾柏全 邓子牛关键词:类病毒 柑橘 编码蛋白 致病因子 植物病害 病毒类型 一种植物叶片切片的制作方法 一种植物叶片切片的制作方法,在制片过程中,添加非离子表面活性剂吐温‑20的水溶液。制片所使用的非离子表面活性剂吐温‑20的水溶液,吐温‑20的体积浓度<0.1%,用量为50μl~100μl。本发明通过添加非离子表面活性剂... 邓子牛 赵亚 马先锋 戴素明 符红艳 李芳文献传递 珍珠辣椒罐头胀罐原因的研究 对正常与胀罐珍珠辣椒罐头及珍珠辣椒中的微生物数量与种类组成进行了分析。查明引起珍珠辣椒罐头胀罐的原因菌主要是乳酸菌类与酵母。此外,还对分得的残存微生物进行了耐热性测定与药敏试验,为确定杀菌工艺提供了依据。 仓道平 周传云 李芳 龙春朋文献传递