张海淼
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目温州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 钨系列多金属氧酸哌啶配合物的合成
- 2008年
- 首次合成了2种新型有机-无机电荷转移配合物:(C5H10NH2)4S iW12O40,(C5H10NH2)4GeW12O40.并通过元素分析、红外光谱对新合成的化合物进行表征.红外数据表明,多阴离子仍保持原来的Keggin结构,其特征吸收峰有一定的红移或蓝移,说明哌啶分子与多阴离子之间有较强的相互作用.
- 周端文朱琳张海淼孙丽娜吴元明
- 关键词：哌啶多金属氧酸盐电荷转移配合物
- 人表皮生长因子融合蛋白的表达及纯化工艺的优化被引量：2
- 2010年
- 探讨了在大肠杆菌中生产小分子泛素样修饰蛋白与人表皮生长因子(SUMO-hEGF)的最佳表达及纯化条件。将重组表达载体pET3c-SUMO-hEGF转化到大肠杆菌BL21(AI)中,以阿拉伯糖为诱导剂,对诱导表达参数进行优化,并进一步通过离子交换层析,Ni-NTA亲和层析及分子筛层析等进行纯化分析。结果表明:SUMO-hEGF在BL21(AI)中的最佳诱导表达温度为37℃,诱导剂阿拉伯糖的最佳浓度为5.0g/L,最佳诱导表达时间为4h,表达量约为20.2%,Western blot分析证实,纯化后的蛋白是hEGF,为进一步开发hEGF基因工程药物奠定了基础。
- 张海淼刘孝菊田海山万晓珊邓林李校堃
- 关键词：人表皮生长因子阿拉伯糖纯化
- 成纤维细胞生长因子-21[Arg^(59)]突变体基因的克隆及融合蛋白的表达与纯化被引量：2
- 2010年
- 目的:对野生型成纤维细胞生长因子-21(FGF21)进行突变改造及表达与纯化,为后续蛋白质体外偶联(Pull-down)实验及建立人源肝癌裸鼠模型奠定基础。方法:采用PCR定点突变方法,将FGF21cDNA第59位赖氨酸密码子突变为精氨酸密码子,所得的突变体片段与SUMO分子伴侣相连后插入表达载体pET20b,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。对表达产物进行Ni-NTA柱亲和层析、酶切和除盐等纯化分析。结果:PCR扩增出约546bp的特异性片段,测序分析表明已成功引入突变;所构建的pET20b-SUMO-FGF21[Arg59]重组阳性克隆经PCR与双酶切鉴定及测序分析,与预期结果一致;SDS-PAGE显示表达产物相对分子质量约31500,且为可溶性;Western blotting分析证实:纯化后产物是成熟的FGF21[Arg59]突变体蛋白。结论:成功构建FGF21[Arg59]突变体基因,并经表达纯化得到成熟的FGF21[Arg59]突变体蛋白。
- 万晓珊赵宏鑫张耀方张海淼邵明龙王会岩李校堃
- 关键词：突变体纯化
