吕富双
- 作品数：32 被引量：142H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划国家科技部专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测被引量：1
- 2003年
- 为进一步提高RT PCR检测西部马脑炎病毒 (WEE)病毒基因组方法的敏感性 ,采用半套式PCR扩增病毒基因组特异序列。首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA ,然后以此cDNA为模板 ,进行扩增。对扩增后电泳检查无可见DNA条带的产物进行半套式PCR ;与此同时对扩增的循环数、Mg++浓度和退火温度等条件进行了优化 ,以进一步提高扩增的特异性。结果第一轮PCR未扩出特异性片段的WEE病毒稀释度 ,其半套式扩增出特定大小的DNA产物 ;同时优化的条件提高了扩增产物的特异性。扩增产物约为 190bp的单一DNA片段 ,其大小与预期的相一致。结果表明采用半套式RT PCR方法检测WEE病毒的基因组序列的敏感性可提高 10
- 赵月峨于曼邓永强杨保安吕富双祝庆余秦鄂德
- 关键词：基因组序列
- 固液电蚊香的研制与应用
- 1992年
- 固液电蚊香是利用固液态转化技术,将液态杀虫剂SR—生物丙烯菊脂在固控剂作用下,转化为固态储存,在电加热器上加热后又迅速由固念转为液态,并挥发至空间,发挥驱杀蚊虫之效,断电冷却后又转为固态。本文介绍该电蚊香对库蚊、伊蚊和按蚊等6种蚊虫的击倒作用和致死效果以及对现场人群的保护效果,并且和4种电驱蚊片和4种液体蚊香击倒活性进行了比较。
- 缪武阳舒国欣吕富双崔旺才
- 关键词：蚊虫
- 4株SARS冠状病毒基因组5’端序列的分析与比较被引量：1
- 2003年
- 利用5′RACE试剂盒对从中国不同地区、不同SARS患者体中分离的SARS-CoV基因组5′端序列进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆至T easy vector。扩增片段的序列测定结果表明:所分离的4株SARS-CoV基因组5′端非编码区的核苷酸序列和其他国家和地区报道的序列基本一致,而且所形成二级结构也完全相同,但与已知普通冠状病毒的差别较大。同时发现在依赖于RNA的RNA聚合酶起始密码子上游-197 nt处有冠状病毒典型的转录调控核心保守序列5′-CUAAAC-3′。
- 常国辉彭文明刘伯华范宝昌刘洪邓永强吕富双杨保安秦鄂德祝庆余
- 关键词：SARS冠状病毒基因组
- 复方萘酚喹对比格犬的长期毒性
- 2003年
- 目的 :观察犬连续口服复方萘酚喹的毒性剂量、损伤的靶器官、可逆性及安全剂量范围。方法 :给比格犬口服复方萘酚喹 1 7.5 ,87.5或 1 4 0mg/(kg·d) ,每天 1次 ,连服 1 4d。给药结束后 ,各组活杀 2 /3,留 1 /3继续观察2 8d。观测了临床症状和生理指标 ,血液学 8项、血生化 1 3项、尿 8项、心电图、眼底、骨髓和组织病理学。结果 :主要毒性反应见于 1 4 0mg/(kg·d)组 ,给药后 5 /6只犬出现恶心、呕吐等消化系统症状 ,部分动物出现阵发性抽搐 ,几分钟后自行缓解。该组给药后GOT ,GPT明显升高 ,心电图Q_T间期延长 ,骨髓红系受到抑制 ,组织学检查可见肝细胞损伤明显。 87.5mg/(kg·d)组各种毒性反应均较大剂量组轻 ,所有毒性反应于停药后自行恢复。 1 7.5mg/(kg·d)组未见明显毒副作用。结论 :1 4 0mg/(kg·d)为重度中毒剂量 ,87.5mg/(kg·d)为中度中毒剂量 ,1 7.5mg/(kg·d)为安全剂量。毒性靶器官是肝脏和骨髓 。
- 王京燕邬伯安徐在海孙国章张敏王翠娥刘超吕富双孙志伟洪松芳乌增炎叶洪金
- 关键词：抗疟药萘酚喹青蒿素毒性
- 汉坦病毒G2膜蛋白基因在毕赤酵母中克隆表达的研究
- 侯佩强艾宪准楚贻康石长胜刘玮红祝庆余吴劲松吕富双苏波贺利华
- 该课题设计能扩增出目的的基因G2的引物、经PCR扩增目的基因，G2基因和pGEM-T Easy Vector连接，转化E.coli DH5a株；克隆、提取质粒T-G2，分别用SnaBI和NotI酶切下G2，与经同样两步酶...
- 关键词：
- 关键词：汉坦病毒毕赤酵母克隆表达肾综合征出血热
- 部分国产艾滋病病毒抗体检测试剂临床应用质量评价被引量：12
- 1999年
- 目的 为掌握国产艾滋病病毒（ＨＩＶ） 抗体筛选酶免试剂的实际应用状况，对８ 种主要的国产ＨＩＶ抗体筛选酶免试剂进行了临床应用质量评价。方法 以一种进口ＨＩＶ 抗体筛选酶免试剂为参比，用８ 种考评试剂对２００ 份标本进行了统一的检测。２００ 份标本包括１００ 份经过确认的ＨＩＶ抗体阳性、阴性、可疑标本和１００ 份新疆吸毒人群的血清标本。结果 参比试剂可以检出全部７４ 份阳性标本，敏感性为１００ ％ ，而考评试剂有６ ～１８ 份不等的假阴性结果，敏感性为８１．１％ ～９１．９％ 。假阴性结果主要发生于来自吸毒人群的ＨＩＶ 抗体弱阳性标本。考评试剂的特异性相对较好，在１０７ 份阴性标本中，参比试剂将２ 份错判为阳性，特异性为９８ ．１ ％ ，考评试剂有０～８ 份标本错判为阳性，特异性为９２．５ ％ ～１００％ 。结论 考评试剂的主要问题是敏感性低，这可能与检测原理是间接法、抗原组成不全面、反应条件不合理等因素有关。
- 李敬云鲍作义吕富双王宏霞
- 关键词：艾滋病病毒抗体
- 基因芯片技术检测10种烈性RNA病毒被引量：8
- 2006年
- 目的利用基因芯片技术检测包括披膜病毒科甲病毒属、黄病毒科黄病毒属、布尼亚病毒科汉坦病毒属及SARS病毒等10种烈性RNA病毒。方法设计了甲病毒属的属保守区通用引物和黄病毒属的通用引物,与布尼亚病毒及SARS病毒的引物一起用于扩增靶核酸。另外,在通用引物所能扩增的区域内设计每种病毒的特异引物,利用该引物通过PCR反应制备cDNA克隆探针,在判定其特异性后,制备氨基化探针。对探针浓度、杂交温度、杂交时间、不同杂交液及杂交后芯片的洗涤方法进行了优化。结果核酸探针浓度为0·3μg/μl时,可获得杂交信号;在杂交液终浓度含20%甲酰胺、杂交60℃、1·5h的条件下,可分别获得以上10种病毒的特异杂交信号。利用多重PCR扩增靶序列时,可获得2种或4种混合病原体的特异性杂交信号。结论利用基因芯片技术检测病毒性病原体是可行的,关键在于设计合适的引物及探针序列。
- 杨银辉杨瑞馥常国辉司炳银翟俊辉吕富双周东生韩伟国祝庆余
- 关键词：寡核苷酸序列分析
- 新分离的冠状病毒与严重急性呼吸综合征病原关系的研究被引量：16
- 2003年
- 目的 确定新分离的冠状病毒与目前流行的严重急性呼吸综合征的病原关系。方法 以用细胞培养法从严重急性呼吸综合征病例标本中分离出的冠状病毒为抗原 ,通过免疫荧光染色及中和试验测定严重急性呼吸综合征患者血清中抗新分离的冠状病毒的抗体 ,分析确定新冠状病毒与严重急性呼吸综合征的病原关系。结果 在临床确诊的 1 1 3份严重急性呼吸综合征患者血清标本中 ,99份检测出有抗新冠状病毒的抗体。 1 0对双份血清检测结果显示 ,后采集的血清抗体效价均比发病初期采集的明显增高 ,最高的升高 1 2 8倍。中和试验结果证明 ,病人血清抗体能够中和新分离的冠状病毒。结论 新分离的冠状病毒与此次流行的严重急性呼吸综合征密切相关 。
- 祝庆余秦鄂德于曼司炳银杨保安刘洪吕富双常国辉彭文明范宝昌邓永强韩伟国石玉玲李林海张泮河赵秋敏曹务春
- 关键词：严重急性呼吸综合征SARS新冠状病毒
- SARS病毒抗体间接免疫荧光检测方法的建立被引量：14
- 2003年
- 目的 建立快速检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中特异抗体的间接免疫荧光方法 ,为SARS的临床确诊提供参考依据。方法 用本实验室新分离的SARS冠状病毒BJ0 1和GZ0 1株感染Vero E6细胞 ,待 2 5 %细胞出现病变时 ,用胰蛋白酶消化细胞后以 2× 10 7/ml浓度 4 0 μl的细胞滴到 10孔镀膜的玻片上 ,CO2 温箱培养 4h后丙酮固定。利用制备的抗原片通过间接免疫荧光检测了从北京和广州地区采集的 15 4例临床诊断为SARS的患者和 14例非SARS呼吸系统疾病和 10 0份健康人血清。结果 成功地建立了检测SARS冠状病毒抗体的间接免疫荧光染色方法 ,并对 15 4例临床诊断为SARS的患者的血清标本进行检测 ;SARS冠状病毒抗体阳性 14 2例 ,阳性率为 92 3% ,而 14例非SARS呼吸系统疾病患者和 10 0名健康人血清检测均为阴性。结论 本方法具有良好的特异性和灵敏度 。
- 司炳银杨保安于曼刘洪吕富双韩伟国张雨石玉玲李林海秦鄂德祝庆余
- 关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒间接免疫荧光
- 单克隆抗体夹心ELISA检测SARS病毒抗原的探索
- 目的：探索单克隆抗体(McAb)夹心-ELISA方法检测SARS-CoV抗原的效果.
方法:利用夹心-ELISA法比较McAb及其组合捕捉及标记SARS-CoV抗原的效果,采用过碘酸钠法标记HRP,用优化后的条...
- 李佳明杨保安杨银辉常国辉刘洪吕富双尉继征祝庆余
- 关键词：单克隆抗体急性呼吸综合症冠状病毒免疫诊断
- 文献传递
