齐迎春
- 作品数：17 被引量：52H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：军队“十一五”科技攻关课题军队“十五”医药卫生科研基金“十一五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠肥厚心肌组织CaN Aβ基因沉默的实现及对细胞肥大抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的诱导钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)Aβ基因沉默,探索防治心肌肥厚的新方法。方法成年Wistar大鼠(30只)随机分为假手术组,"一肾一夹"模型组,CaN Aβ心包腔内干扰组,心包腔干扰阴性对照组,CaN Aβ舌下静脉干扰组,舌下静脉干扰阴性对照组。转染6d后,处死大鼠并取材,测定血浆常规肝肾功能、心肌酶指标,RT-PCR法检测心肌组织CaN Aβ、心房利钠因子(atrial natriuretic factor,ANF)及β-重链肌球蛋白(myosin heavy chain,β-MHC)基因mRNA水平,免疫荧光检测CaN Aβ蛋白表达。结果模型组心肌CaN Aβ、ANF、β-MHC基因mRNA水平高于假手术组(P<0.05);切取左心室前壁心外膜下薄层心肌组织,心包腔内干扰组CaN、ANF、β-MHC mRNA水平明显低于模型组及心包腔内阴性对照组(P<0.05);CaN Aβ蛋白免疫荧光显示心包腔内干扰组较模型组心外膜下心肌细胞荧光减弱;各手术组之间血浆GPT/GOT,Ua/Cr/UN,CK/CK-MB/LDH无明显差异。结论心包腔内注射辅以微泡+酶类的使用及超声导入,可改善质粒在动物水平心肌组织的转染效率,CaN Aβ干扰可抑制肥大相关基因ANF、β-MHC的表达,对心、肺、肝及肾等组织无明显损伤。
- 齐迎春谢晓华陈雯李朝晖
- 关键词：心肌肥大
- 内源性H_2S在大鼠骨骼肌缺血/再灌注所致心肌损伤中的变化及意义被引量：9
- 2009年
- 目的研究内源性血浆硫化氢（H2S）／心肌胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）体系在骨骼肌缺血／再灌注所致心肌损伤中的变化及作用：方法雄性Wistar大鼠62只，应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血／再灌注模型。按照缺血及再灌注不同时间点随机分为9组：①正常对照组（C组，8只）；②缺血2h组（I2组，4只）；③缺血4h组（I4组，8只）；④再灌注0．5h组（R0.5组，8只）；⑤再灌注2h组（R2组，8只）；⑥再灌注4h组（R4组，8只）；⑦再灌注6h组（R6组，8只）；⑧再灌注12h组（R12组，4只）；⑨再灌注24h组（R24组，6只）。各再灌注组均为缺血4h。观察各组大鼠心肌病理改变、血浆H2S、肌酸激酶同T酶（CK—MB）、肌钙蛋白T（TnT）水平的变化及心肌CSE活性的变化。结果光镜下观察可见，缺血4h后大鼠心肌细胞略肿胀，肌间隙可见少量红细胞漏出；再灌注4h及6h后，心肌细胞损伤改变最重；再灌注24h后，上述改变有所减轻。与正常对照组比较，缺血2h后，血浆CK—MB的水平即开始明显上升，血浆TnT的水平在缺血4h后明显上升（P〈0．05）。各缺血组血浆H2S的水平及心肌CSE的活性有下降趋势，但无明显统计学差异：与缺血4h组比较，再灌注0．5h后血浆CK—MB的水平明显升高，再灌注4h达高峰；血浆TnT的水平再灌注6h达高峰；血浆H2S的水平及心肌CSE的活性再灌注2h后则明显下降，再灌注4h达最低值；再灌注24h后，血浆H2S的水平及心肌CSE的活性逐渐回升，血浆CK—MB的水平明显下降（P〈0．05）。CK—MB、TnT水平的变化与血浆H：S水平的变化呈明显的负相关：结论骨骼肌缺血／再灌注可造成心肌损伤，缺血／再灌注4～6h，心肌损伤最重。内源性血浆H2S／心肌CSE体系的下调可能在骨骼肌再灌注期心肌损伤的病理生理改变中具有重要作用．
- 陈雯刘莉张颖齐迎春张海峰耿彬谢晓华
- 关键词：心肌损伤硫化氢
- 螺内酯对肢体缺血再灌注心肌损伤高迁移率族蛋白B1与Toll样受体4信号通路的影响被引量：3
- 2021年
- 目的研究醛固酮受体拮抗剂螺内酯减轻肢体缺血再灌注致心肌损伤的信号传导机制。方法选择24只雄性Wistar大鼠,按随机数字法分为对照组、缺血再灌注组(缺血4 h再灌注4 h)和螺内酯组(建模前,螺内酯每日20 mg/kg灌胃,连续6 d),每组8只。观察各组大鼠血浆肌钙蛋白I(cTnI)水平;血浆和心肌白细胞介素6(IL-6)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平变化,用实时荧光定量PCR技术测大鼠心肌HMGB1、Toll受体4(TLR4)基因相对表达,免疫组织化学染色观察大鼠心肌HMGB1、TLR4蛋白表达。结果与对照组比较,缺血再灌注组大鼠血浆cTnI、血浆IL-6和心肌IL-6、血浆HMGB1和心肌HMGB1水平明显升高(P<0.05),心肌HMGB1 mRNA和TLR4 mRNA相对表达显著上调(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,螺内酯组大鼠血浆cTnI、IL-6、HMGB1水平明显下降[(0.179±0.068)U/L vs(0.476±0.106)U/L,(102.05±15.17)ng/L vs(150.70±28.85)ng/L,(1.07±0.39)μg/L vs(2.48±0.68)μg/L,P<0.05],心肌IL-6、HMGB1水平明显降低[(66.26±20.44)pg/mg vs(117.02±21.44)pg/mg,(14.22±3.44)ng/mg vs(27.93±5.58)ng/mg,P<0.05],心肌HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA表达显著下调(P<0.05)。对照组大鼠心肌细胞可见少量散在HMGB1和TLR4棕黄色阳性颗粒,缺血再灌注组大鼠心肌细胞内可见较多HMGB1、TLR4棕黄色阳性颗粒,螺内酯组心肌细胞HMGB1、TLR4棕黄色阳性颗粒较缺血再灌注组明显减少。结论醛固酮受体拮抗剂螺内酯能减轻肢体缺血再灌注后心肌损伤及炎性反应,机制可能与抑制HMGB1-TLR4信号通路有关。
- 陈雯齐迎春王玉伟张颖李晓玲谢晓华
- 关键词：心肌再灌注损伤高迁移率族蛋白质类TOLL样受体4螺内酯
- 经心包腔途径转染提高大鼠体内心肌细胞转染的效率被引量：1
- 2012年
- 背景:如何获得安全、有效、广泛心肌组织的转染一直是国内外学者研究的热点。目的:探讨能够改善动物水平心肌组织非病毒载体的转染效率、增强基因导入靶向性的方法。方法:以β半乳糖苷酶质粒PLacZ作为报告基因,将Wistar大鼠随机分为5组:①空白组。②心包腔内组:心包腔注射质粒+微泡+酶混悬液,超声导入。③心包腔内阴性对照组:以生理盐水代替质粒干预。④舌下静脉组:舌下静脉注射质粒+微泡混悬液,超声导入。⑤舌下静脉阴性对照组:以生理盐水代替质粒干预。注射6d后处死,进行心、肺、肝、肾组织的X-gal染色。结果与结论:转染6d后,仅有心包腔内组大鼠的部分心肌细胞在心尖、心室及心房水平可见明显的蓝染,其他各组大鼠心肌X-gal染色为阴性;各组大鼠肺、肝、肾组织X-gal染色均为阴性。提示采用心包腔内途径转染、再辅以超声微泡导入以及酶类的使用,可明显改善质粒对在体心肌细胞的转染效率,且不伴有心外组织目的基因的表达,具有较好的靶向性。
- 齐迎春谢晓华陈雯李朝晖
- 关键词：心包心肌细胞SIRNARNAI转染
- 双膝关节置换术后早期心肾损伤及固有免疫的变化被引量：1
- 2021年
- 目的观察一期序贯双侧全膝关节置换手术后早期心肾功能损伤、全身炎症反应及可能的固有免疫调节机制。方法选取2013年3月~6月在解放军总医院第一医学中心骨科住院、术中使用止血带的一期序贯双侧全膝关节置换手术患者15例,采用自身对照研究的方法,利用流式细胞技术观察术前24 h及术后4 h外周血CD14+单核细胞和中性粒细胞表面TOLL样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的变化,同时观察手术前后血浆C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、人心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)、肌酐(Cr)及尿液中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)水平的变化。结果与术前24 h比较,术后4 h外周血CD14+单核细胞和中性粒细胞表面TLR4表达、血浆CRP、IL-6水平显著上升,血浆H-FABP及尿液KIM-1水平亦明显升高[(5.61±0.71)mg/L vs.(0.81±0.51)mg/L,(3.97±1.97)ng/L vs.(1.68±0.86)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05)。术后4 h血清Cr水平较术前24 h变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论一期序贯双侧全膝关节置换手术可造成术后早期炎症反应及心肾损伤,其机制可能与术后早期的固有免疫TLR4信号通路激活有关。
- 陈雯李晓玲齐迎春谢晓华
- 关键词：全膝关节置换术炎症反应TOLL样受体4
- 钙调神经磷酸酶Aβ小干扰RNA筛选及对心肌细胞肥大的抑制
- 2012年
- 目的在细胞水平上筛选钙调神经磷酸酶(CaN)Aβ基因(mRNA)的小干扰RNA(siRNA)的干扰序列,为研究抑制在体心肌肥大的方法提供理论基础。方法针对CaNAβmRNA,参照siRNA设计原则,应用软件设计候选干扰序列,构建相应的小发夹RNA表达载体(si1053,si1280,si1539)。培养乳鼠心肌细胞,分为6组:空白对照组,肥大模型组(醛固酮诱导),肥大+si1280组,肥大+si1539组,肥大+si1053组,肥大+siGFP阴性对照组(转染针对GFP特定序列的shRNA质粒)。48h后显微镜下测量心肌细胞直径、CaNAβ及心房利钠因子(ANF)、β-重链肌球蛋白(β-MHC)mRNA水平。结果肥大模型组心肌细胞直径以及心肌组织CaNAβ、ANF、β-MHCmRNA表达水平较空白对照组明显增加(P<0.05)。肥大+si1053、肥大+si1280、肥大+si1539组细胞直径以及CaNAβ、ANFmRNA水平均较肥大模型组及肥大+siGFP阴性对照组降低(P<0.05),3组之间的CaNAβmRNA水平无明显差异(P>0.05),其中肥大+si1280组的细胞直径、ANF及β-MHCmRNA水平较肥大+si1053组、肥大+si1539组有明显减低(P<0.05)。结论成功构建CaNAβmRNA的小发夹RNA表达质粒,siRNA抑制CaNAβmRNA的表达,可抑制细胞水平醛固酮诱导的心肌细胞肥大;其中1280(21bp)为RNA干扰的相对更有效片段。
- 齐迎春谢晓华陈雯李朝晖
- 关键词：RNA干扰转染心肌细胞
- 在体肥厚心肌细胞实现钙调神经磷酸酶Aβ基因沉默的研究
- 背景与目的：心肌肥大被公认为是心血管疾病发病和死亡的独立危险因素，钙调神经磷酸酶(CaN)已被证明在心肌肥大过程中扮演重要角色。目前最常用的CaN抑制剂环孢素A(CsA)及FK506虽可通过干扰CaN通路抑制心肌肥大的发...
- 齐迎春
- 关键词：心肌肥大钙调神经磷酸酶SIRNA表达质粒RNAI技术转染效率
- 文献传递
- 大鼠肢体缺血再灌注致心肌损伤中过氧化物酶及肿瘤坏死因子-α的动态变化及意义被引量：6
- 2013年
- 目的研究血浆及心肌局部炎细胞髓过氧化物酶(MPO)及炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肢体缺血再灌注后心血管系统损害中的动态变化及意义。方法应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血再灌注模型,按照缺血及再灌注不同时间点随机分为9组:①正常对照组(C);②缺血2、4 h组(I_2,I_4);③缺血4 h再灌注0.5、2、4、6、12、24 h组(R_(0.5),R_2,R_4,R_6,R_(12),R_(24))。观察各组大鼠血浆及心肌MPO、TNF-α水平的变化,以免疫组化法观察心肌组织TNF-α的表达。结果与C组比较,I_2组血浆及心肌MPO、TNF-α即开始明显上升;与I_4组比较,血浆及心肌MPO分别于再灌注R_(0.5)、R_2组明显升高;R_4组血浆TNF-α明显上升,R_(12)组心肌TNF-α明显下降;R_(24)组血浆MPO、TNF-α明显下降(P<0.05)。R_4血浆MPO、TNF-α心肌TNF-α达到峰值;R_6组心肌MPO达到峰值。TNF-α免疫组化提示I_4组大鼠心肌胞浆即可见较多棕色染色颗粒,R_4组浆棕色染色颗粒继续增多,R_(24)组明显减少。结论炎细胞在心肌组织的聚集活化、全身及心肌局部炎性细胞因子的激活是肢体缺血期及再灌注期心肌损伤的重要病理学基础,其中再灌注期心肌损伤与全身性炎性细胞因子激活关系更大。
- 陈雯刘宁齐迎春张颖邓昭阳杨靖谢晓华
- 关键词：肢体缺血再灌注心肌损伤髓过氧化物酶肿瘤坏死因子-Α
- 硫化氢通过抑制炎性细胞因子及氧化应激保护大鼠骨骼肌缺血再灌注的心肌损伤被引量：12
- 2013年
- 目的研究外源性硫化氢对大鼠骨骼肌缺血再灌注的炎性细胞因子和氧化应激的影响,探讨其对骨骼肌缺血再灌注后心肌损伤的具体保护机制。方法雄性Wistar大鼠31只,随机分为4组⑥正常对照组(c组,8只);⑥缺血再灌注组(ischemiareperfusion,IR组,8只):应用止血带结扎双下肢构建大鼠骨骼肌缺血再灌注模型,缺血4 h再灌注4 h;⑥NaHS组(8只)和PPG组(7只):在上述骨骼肌缺血再灌注的模型中,分别于缺血前及再灌注前腹腔注射NaHS 14μmol/kg、炔丙基甘氨酸(PPG)50 mg/kg。观察4组大鼠心肌组织病理、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及血浆和心肌髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(T-SOD、CuZn-SOD)的变化。以免疫组化法观察心肌细胞TNF-α的表达。结果与c组比较,IR组血浆CK-MB明显上升,血浆及心肌MPO、MDA水平明显上升,T-SOD、CuZn-SOD水平明显下降(P<0.05),与IR组比较,NaHS干预后血浆CK-MB明显降低,同时,血浆及心肌MPO、MDA水平明显下降,T-SOD、CuZn-SOD水平明显上升(P<0.05);PPG组上述指标同IR组没有明显改变(P>0.05)。心肌TNF-α免疫组化可见IR组心肌胞浆棕色染色颗粒较正常对照组明显增多,NaHS干预后后心肌胞浆棕色染色颗粒明显减少。结论给予H2S的供体NaHS可以通过降低中性粒细胞浸润及前炎症细胞因子激活、抑制氧化应激反应对骨骼肌缺血再灌注的心肌损伤发挥保护作用。
- 陈雯刘宁张颖齐迎春杨靖邓昭阳李晓玲谢晓华
- 关键词：骨骼肌缺血再灌注心肌损伤硫化氢炎性细胞因子
- 外源性H2S吸入对大鼠肢体缺血／再灌注后心肌损伤的保护作用研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究外源性H2S吸入对大鼠双下肢缺血/再灌注后心肌损伤的保护作用。方法雄性Wistar大鼠23只,随机分为三组:①正常对照组(C组,8只);②缺血/再灌注组(I/R组,8只):应用止血带结扎构建大鼠双下肢缺血/再灌注模型,缺血4 h再灌注4 h。③H2S吸入组(H2S组,7只):大鼠双下肢缺血4 h,再灌注时给予含80 ppm H2S的合成空气持续吸入4 h。观察各组大鼠心肌病理、血浆H2S、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白-T(TnT)、髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化及心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性、MPO、TNF-α水平的变化。以免疫组化法观察心肌细胞TNF-α的表达。结果与C组比较,I/R组血浆CK-MB、TnT、MPO、TNF-α及心肌MPO、TNF-α水平明显上升(P<0.05),血浆H2S及心肌CSE活性明显下降(P<0.05),H2S吸入后血浆H2S及心肌CSE活性明显升高;同时,血浆CK-MB、TnT、MPO、TNF-α及心肌MPO、TNF-α水平明显降低(P<0.05)。心肌病理提示I/R组心肌明显肿胀、血管充血,心肌细胞间可见明显分叶核粒细胞浸润,红细胞漏出增多,H2S吸入后心肌损伤明显减轻。心肌TNF-α免疫组化提示I/R组心肌胞浆棕色染色颗粒较C组明显增多,H2S吸入后心肌胞浆棕色染色颗粒明显减少。结论外源性H2S吸入可以通过降低炎细胞浸润及炎性细胞因子激活而对骨骼肌缺血/再灌注的心肌损伤发挥保护作用。
- 陈雯刘莉张颖齐迎春任清爱张海峰邓昭阳耿彬谢晓华
- 关键词：心肌损伤髓过氧化物酶
