祝成亮 作品数:153 被引量:465 H指数:12 供职机构: 武汉大学人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
一种TaqMan探针荧光定量PCR检测巴通体的方法与应用 本发明提供了一种巴通体的实时荧光定量PCR检测引物对和探针,所述引物对的序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.2所示;所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示,所述探针5’端标记荧光基团,3’端标记荧光淬灭... 张祺 梅益 刘为勇 刘芳 刘映乐 祝成亮文献传递 一种具有抗菌及免疫调节双功能的二聚体多肽及其应用 本发明公开了一种具有抗菌以及免疫调节双功能的二聚体多肽及其应用,属于生物医药领域。该多肽通过常规的多肽固相合成技术分成两段制备,再通过半胱氨酸侧链的巯基配对形成二硫键,最后通过半制备反向高效液相色谱纯化得到。药理学实验研... 沈秉正 曹志贱 喻研 宋金春 涂毅 冯莉芳 祝成亮 高翔 黄亚冰 高越文献传递 乙型肝炎病毒对载脂蛋白B表达的影响及其机制探讨 被引量:7 2011年 目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对载脂蛋白B(ApoB)表达的影响,并探讨其调节机制.方法 采用RT-PCR和Western blot法检测HepG2和HepG2.2.15中ApoB mRNA和蛋白的表达,全自动生化分析仪Olympus 5400检测HBV患者和健康对照者ApoB血清学水平,分析健康对照者、慢性乙型肝炎、肝纤维化和肝癌患者中ApoB表达水平的差异,将HBV感染性克隆pHBV1.3转染HepG2细胞,RT-PCR和Western blot法检测ApoB和微粒体甘油三酯转移蛋白(MTP)表达水平的变化.结果 HepG2.2.15细胞中ApoB mRNA和蛋白的表达水平较HepG2低;ApoB在慢性乙型肝炎患者和肝纤维化患者的血清学水平明显低于健康对照者(P<0.05);HBV能够在mRNA和蛋白水平抑制ApoB和MTP的表达.结论 HBV可能通过抑制MTP的表达抑制ApoB的合成和分泌. 祝成亮 李艳 詹传华 郝世勇 张平安 李从荣 刘芳关键词:乙型肝炎病毒 载脂蛋白B 微粒体甘油三酯转移蛋白 肝纤维化 肝细胞癌 脊髓损伤后早期应用FK506抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达及细胞凋亡的实验研究 被引量:1 2007年 目的:观察FK506对脊髓损伤大鼠后肢运动功能及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达和细胞凋亡的影响。方法:成年雄性Wistar大鼠60只,采用Allen′s法建立脊髓损伤模型后,随机分为应用FK506治疗组(n=30)和应用生理盐水对照组(n=30),于伤后不同时间点取材,行苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组织化学染色检测caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,同时以BBB评分法评价后肢运动功能恢复情况。结果:HE染色显示治疗组脊髓组织病理学改变明显轻于对照组;治疗组和对照组均存在caspase-3的表达和神经细胞凋亡,两者都于伤后24h达高峰,但治疗组较对照组明显减少(P<0.01,P<0.05);治疗组后肢运动功能评分显著优于对照组(P<0.05)。结论:FK506能抑制脊髓损伤后caspase-3的表达和神经细胞凋亡,从而减轻继发性损害,促进脊髓功能恢复。 潘峰 陈安民 郭风劲 祝成亮 陶凤华 赵东明关键词:脊髓损伤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 FK506 热休克蛋白72重组腺病毒包装及其对细胞凋亡的影响 被引量:1 2009年 目的包装热休克蛋白72重组腺病毒表达载体,探讨其对ECV304细胞凋亡的影响。方法采用细菌同源重组法构建了热休克蛋白72重组腺病毒表达载体;流式细胞仪检测重组腺病毒对细胞凋亡的影响;荧光报告系统和蛋白印迹分析重组腺病毒对p53转录的调节和蛋白表达的影响。结果成功包装了热休克蛋白72重组腺病毒,热休克蛋白72能够促进细胞凋亡,从转录水平上调p53蛋白的表达。结论热休克蛋白72可能通过上调p53蛋白的表达促进细胞凋亡。 鲁敏翔 祝成亮 宋惠 李毅 刘芳 刘兴晖关键词:热休克蛋白72 凋亡 动脉粥样硬化 一种KPC碳青霉烯酶抑制肽及其应用 本发明公开了一种KPC碳青霉烯酶抑制肽及其应用,属于生物医药领域。本发明的KPC碳青霉烯酶抑制肽的氨基酸序列为Pro-Asn-Gln-Trp,通过固相合成法可制备得到,其对KPC碳青霉烯酶具有明显的抑制作用。本发明的抑制... 沈秉正 高翔 祝成亮 宋金春 曾智 彭燕文献传递 脂多糖对白细胞介素27的调节作用及其与环氧化酶2及前列腺素E2之间的相关性研究 被引量:1 2010年 目的 探讨脂多糖(LPS)在THP-1细胞对白细胞介素27(IL-27)的调节作用,阐明IL-27与环氧化酶2(COX-2)及前列腺素E2(PGE2)之间的关系.方法 采用不同浓度的LPS和IL-27刺激THP-1细胞,并在不同时间采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中IL-27和PGE2的含量,同时采用反转录PCR和Western blot检测COX-2的mRNA和蛋白表达的变化.结果 LPS在THP-1细胞能够诱导IL-27的产生,并呈时间和剂量依赖关系;IL-27能够在mRNA和蛋白水平诱导COX-2的表达,同时诱导PGE2的产生,其诱导作用呈时间和剂量依赖效应.结论 LPS能够在细胞水平刺激IL-27的分泌,同时IL-27能够诱导COX-2的表达和PGE2的产生. 祝成亮 李艳 张蕊 郝世勇 张平安 刘芳关键词:白细胞介素27 环氧化酶2 前列腺素E2 血清GP73和AFP等十项肿瘤标志物联合诊断HBsAg阳性肝癌的研究 被引量:9 2014年 目的探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)及甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)、糖基抗原(CA19-9、CA15-3、CA125)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)、亮氨酸氨基转肽酶(LAP)等肿瘤标志物单项和联合检测对乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)阳性肝癌的诊断价值。方法收集85例慢性乙肝、74例乙肝肝硬化、133例HBsAg阳性肝癌患者及46例健康体检者的血清,对GP73及AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP等肿瘤标志物进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 Spearman相关分析表明血清GP73与AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP均有一定的相关性(均P<0.05),除CA125外,肝癌组的相关系数均比非肝癌组小;但只有GP73与AFP、GGT及LAP的相关性在两组间的差异有统计学意义(均P<0.05)。GP73、AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP在慢性乙肝组、乙肝肝硬化组、肝癌组和正常对照组中的差异均有统计学意义(均P<0.05),肝癌组的GP73、AFP、LAP的血清水平均显著高于其他组(均P<0.05)。ROC曲线分析表明,单项指标中以GP73的ROC曲线下面积最大(AUC=0.792),但与AFP和ALP的差异不大(Z=0.127、1.908,P=0.899、0.056)。通过logistic回归对上述指标构建新的预测模型,联合预测因子(PRE)的AUC显著高于其它单项指标(均P<0.05)。结论 GP73单项检测有较好的诊断作用,GP73联合AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP检测可提高对HBsAg阳性肝癌的诊断效能。 董飞波 高国生 徐晓珍 祝成亮 颜卫华关键词:高尔基体蛋白73 ROC曲线 GOLGI 武汉市12881例住院儿童呼吸道感染病原学分析 被引量:9 2020年 目的:分析武汉大学人民医院住院儿童呼吸道感染病原流行病学特征,为呼吸道感染的诊断、治疗及预防提供临床依据。方法:收集2018年9月1日至2019年8月30日武汉大学人民医院12881例呼吸道感染住院儿童患者的血清和咽拭子。采用直接免疫荧光法检测腺病毒(ADV)、流感病毒A、B(IFA、IFB)、副流感病毒1、2、3(PIV1、PIV2、PIV3)及呼吸道合胞病毒(RSV)7种呼吸道常见病毒抗原,采用间接免疫荧光法检测2种呼吸道非典型病原体IgM抗体,即肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CP)。结果:至少一种病原体阳性的检出率为43.74%,其中检出率前3位依次为MP(29.09%)、RSV(8.59%)、PIV3(3.35%),混合感染率为4.87%,混合感染主要集中在病毒和MP的共同感染上。男、女MP感染阳性率具有显著性差异(P<0.05)。除PIV2外,各年龄段的病原体阳性率具有显著性差异(P<0.05),其中PIV3和RSV感染阳性率主要集中在0~3岁,MP和ADA感染阳性率主要集中在1~6岁。此外,呼吸道病原体感染阳性率受季节因素的影响,ADV和PIV3的感染主要发生在春季和夏季,MP和PIV1的感染主要发生在秋季,IFA和RSV的感染主要发生在冬季。结论:MP是本院住院儿童呼吸道感染的主要病原体,女性患儿较男性患儿易感,4~6岁儿童阳性率最高,秋季为其高发季节。 刘芮 沈秉正 张启悦 邬开朗 刘芳 祝成亮关键词:呼吸道感染 儿童 病毒 非典型病原体 新型冠状病毒肺炎患者血浆CRP,PCT和IL-6水平检测的临床诊断价值 被引量:4 2021年 目的评估单独及联合检测新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease-2019,COVID-19)患者血浆C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的临床诊断价值。方法选取2020年1月1日~2月2日期间武汉大学人民医院COVID-19确诊患者96例,其中普通型41例,重型45例和危重型10例,另选40例健康者作为对照组,收集96例患者的CRP,PCT和IL-6以及40例健康者的CRP和PCT检测结果并绘制ROC曲线。结果与对照组相比,COVID-19组患者的CRP[0.40(0.40~0.57)mg/L vs 60.35(21.00~108.48mg/L)]和PCT[0.05(0.04~0.07)ng/ml vs 0.09(0.05~0.20)ng/ml]水平显著增高,差异有统计学意义(Z=-4.662和-9.202,均P<0.001)。在COVID-19患者中,普通型患者的CRP[36.80(10.20~67.40)mg/L vs 84.90(49.25~134.65)mg/L,94.10(122.18~198.05)mg/L],PCT[0.06(0.04~0.09)ng/ml vs 0.12(0.07~0.27)ng/ml,0.22(0.05~0.47)ng/ml]水平明显低于重型、危重型患者,差异有统计学意义(Z=-4.576~-2.48,均P<0.05)。普通型患者的IL-6[8.42(1.73~20.59)pg/ml vs 73.65(18.03~311.39)pg/ml]水平低于危重型,差异均有统计学意义(Z=3.118,P<0.05);ROC曲线显示PCT和CRP诊断COVID-19价值较高,诊断重型和危重型COVID-19患者,CRP的价值最高,且三个指标联合检测可以提高诊断效能;诊断危重型COVID-19患者,IL-6有较高的预测价值。结论血浆CRP,PCT和IL-6水平可能是诊断COVID-19的潜在生物标志物,并且其血浆水平可以评估COVID-19的严重程度,三指标联合检测可以提高评估效能,对COVID-19的临床诊断和治疗具有重要的参考价值。 马俊娥 崔湘铧 刘芮 韩欢 邬开朗 刘芳 祝成亮关键词:降钙素原 白介素-6