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张剑峰: 作品数：27 被引量：21H指数：3; 供职机构：青岛农业大学更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学交通运输工程水利工程更多>>

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马铃薯PVY和PLRV病毒的TC-RT-PCR检测被引量：1: 2016年; 传统的RT-PCR技术检测病毒需提取总RNA,RNA容易降解。利用试管捕捉反转录扩增(Tube cap-ture RT-PCR,TC-RT-PCR)方法检测了PVY和PLRV 2种病毒,实现了不需提取总RNA也可在同一反应中同时检测2种病毒。根据已报道的引物用TC-RT-PCR的方法对PVY和PLRV的外壳蛋白基因进行了检测。结果表明,TC-RT-PCR能够成功的检测出感染PVY或PLRV以及2种病毒共同侵染的样品,扩增产物序列长度均与设计片段的长度相符,分别为781和364 bp,2种病毒扩增产物的测序结果同Gene Bank中已知的序列比对后的同源性均高达97%以上。该技术为单独或复合感染的马铃薯病毒的检测提供了更加方便、高效的方法。同时测得试验PVY病毒样本属于PVYNW株系。; 郑叶叶韩磊迟胜起张剑峰; 关键词：PVY PLRV

番茄褪绿病毒CP基因克隆、序列分析及原核表达: 2016年; 为制备番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,To CV）抗血清,以番茄病叶为试验材料,提取总RNA,根据To CV CP基因设计特异性引物,利用RT-PCR方法克隆目的基因,构建原核表达载体p ET32a-To CVCP,在大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株中表达CP蛋白。结果表明：To CV CP基因（Gen Bank登录号：KT809400）全长774 bp,编码257个氨基酸,与Gen Bank中其他地区分离物核苷酸序列同源性为97.2%～99.6%,推导的氨基酸序列同源性为97.3%～100.0%。核苷酸序列保守位点占全部位点的91.3%,氨基酸序列保守位点占全部位点的88.3%,表明不同地理来源的番茄褪绿病毒的CP基因保守性较高。将To CV CP基因克隆到原核表达载体p ET-32a（＋）上,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白。SDS-PAGE分析表明,转p ET32a-To CVCP载体的大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株表达了分子量约33 k Da的重组蛋白。该重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、诱导6 h,表达量最大。; 韩磊迟胜起张剑峰; 关键词：外壳蛋白基因原核表达基因克隆

马铃薯卷叶病毒基因功能的研究进展: 2011年; 马铃薯卷叶病毒(PLRV)基因组具有较高的同源性和稳定性,不同株系间致病力不同。目前在VPg蛋白氨基酸序列和功能方面以及基因组功能方面取得了较大的进展。综述PLRV基因组核苷酸序列及其表达蛋白质在病毒侵染后的病害症状表达,病毒本身的复制增殖,以及病毒的传播等方面的作用。随着对基因组功能的研究更加深入,一定会给马铃薯的抗病育种带来更多可能。; 刘俊莹张剑峰张华鹏王聪聪; 关键词：蛋白质功能

马铃薯卷叶病毒中国分离株基因全长序列分析: 马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)引起马铃薯卷叶、黄化、矮缩、僵化及块茎网状坏死等病状,严重影响马铃薯的产量和品质.PLRV分布局限于韧皮部,由蚜虫以循环持久型方式传播,不能通过机械传...; 刘俊莹张剑峰迟胜起王聪聪; 关键词：马铃薯卷叶病毒

一种瓶装培养基反冲洗装置: 本实用新型公开的属于反冲洗装置技术领域，具体为一种瓶装培养基反冲洗装置，包括瓶体，所述瓶体上方设有瓶盖，所述瓶体内腔内壁连接有滤网，所述瓶体右侧设有电机，所述电机左侧设有密封舱体，所述密封舱体下壁右侧设有排气管，所述排气...; 邢明祯张剑峰迟胜起

烟草赤星病菌与黑斑病菌生物学特性的比较: 2011年; 比较烟草赤星病菌和黑斑病菌基本生物学特性。结果表明：烟草赤星病菌和黑斑病菌的最适生长温度分别为25～30℃和20～25℃；pH6～9培养条件更有利于烟草赤星病菌的生长；烟草赤星病菌利用葡萄糖和蔗糖的能力明显大于黑斑病菌；两病原菌对硝酸铵、硫酸铵和干酪素的利用情况基本相同，利用能力大小依次为干酪素、硝酸铵、硫酸铵；马铃薯琼脂培养基、葡萄糖琼脂培养基和蔗糖琼脂培养基对两病原菌生长的影响存在显著差异，玉米粉琼脂培养基对两病原菌生长的影响无差异；扑海因和代森锰锌能完全抑制两病原菌的营养生长，百菌清和翠贝对两病原菌的生长抑制作用无明显差异，甲基托布津对赤星病菌的抑制能力强于对黑斑病菌的抑制能力。; 任建国王俊丽岳美云张剑峰; 关键词：烟草赤星病菌生物学特性

一种琼脂糖电泳凝胶定量切割器: 本发明涉及电泳凝胶加工技术领域，具体为一种琼脂糖电泳凝胶定量切割器，包括支撑板以及安装在支撑板底端面的两个固定脚爪，所述支撑板的侧面与横梁固定连接，且横梁的表面与定量器套接，所述定量器外表面靠近支撑板的端处与刀头固定连接...; 陈芳龙张剑峰迟胜起曹欣然刘杰郭静静王子琦赵亮张兆良; 文献传递

马铃薯试管苗继代组织培养内生菌的鉴定: 对污染脱毒马铃薯组织培养的内生菌在LB培养基上进行分离纯化,获得6株细菌的单菌落,提取所得细菌的总DNA,采用16S rDNA通用引物对所得到的细菌的总DNA进行PCR扩增,测序结果利用BLAST软件到GenBank进行...; 张金利张剑峰贺秀芳刘俊莹迟胜起韩伟张国武宪忠张华鹏赵辉; 关键词：马铃薯内生细菌菌种鉴定; 文献传递

转二价核酶基因马铃薯及抗病性研究被引量：1: 2008年; 用克隆的特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)复制酶基因负链RNA的二价核酶基因,构建植物表达载体pROKⅡ/DR,经土壤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导叶盘法转化马铃薯外植体,获得再生植株。PCR和Southern-blot检测,证明目的基因已成功地导入马铃薯再生植株,其转化率约为14.5%,并能够在无性繁殖后代植株中稳定存在。RT-PCR检测表明,再生马铃薯植株中的二价核酶基因可以转录表达。经病毒接种的转基因马铃薯株系L5、L7、L8和J-1的无性繁殖后代在继发感染中仍表现出较高的抗病性,为最终获得抗PLRV马铃薯新品系打下了基础。; 张剑峰郝文胜于嘉林张鹤龄李天然张子义门福义; 关键词：马铃薯卷叶病毒转基因马铃薯抗病性

一种温室轨道喷雾机喷灌臂: 本实用新型公开了一种温室轨道喷雾机喷灌臂，其包括两根柔性悬挂臂和两端封闭的喷管，在每根柔性悬挂臂顶端均设有挂环，在每根柔性悬挂臂中部均设有一个收放装置；在两根柔性悬挂臂底端之间固定设有喷管，在喷管顶端中部设有注水口，在喷...; 张剑峰迟胜起梁建功张国; 文献传递