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淫羊藿苷对糖皮质激素诱导的骨微血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：17: 2009年; 目的体外建立糖皮质激素诱导骨微血管内皮细胞(Human bone microvascular endothelial cell,HBMEC)损害的模型,研究糖皮质激素对HBMEC的损害情况;探讨淫羊藿苷(Icariin,ICA)对糖皮质激素所致HBMEC损伤的保护作用。方法HBMEC分离与体外培养,建立体外糖皮质激素杀伤细胞模型,用MTT法观察ICA对激素损伤的HBMEC活性的影响,测定细胞生存率,并对细胞进行台盼蓝染色以观察ICA对激素诱导的HBMEC坏死的影响。结果糖皮质激素诱导HBMEC损害,台盼蓝染色显示细胞损害为坏死而非凋亡,并呈现一定的浓度依赖和时间依赖性;ICA能保护激素诱导的HB-MEC损害,使细胞生存率明显提高,ICA能显著抑制激素诱导的内皮细胞坏死。结论ICA具有保护激素诱导的HBMEC损伤的作用,这为早期干预治疗激素性骨坏死提供了实验药理依据。; 王佰亮李子荣娄晋宁叶丽亚张文建; 关键词：骨坏死内皮细胞淫羊藿苷血管

蛋白激酶的激活保护GK大鼠糖尿病肾病: 张文健王慧姜永玮许世清彭亮刘虹麟房青娄晋宁

大鼠胰岛素瘤实验模型的建立及其应用: 2013年; 目的通过移植大鼠胰岛素瘤INS-1细胞至糖尿病小鼠肾包膜下使之形成胰岛素瘤,并诱导其发生凋亡,建立可用于研究胰岛β细胞凋亡机制的动物模型。方法将5×106INS-1细胞接种于链脲霉素(STZ)造模的糖尿病小鼠左肾包膜下,监测动物空腹血糖和血清胰岛素水平的变化,当血糖趋近正常后摘取动物左侧肾脏并检测其血糖和血清胰岛素水平的变化;固定包埋摘取的肾脏,进行HE染色以及胰岛素的免疫组化染色,确定胰岛素瘤模型的建立。在胰岛素瘤动物模型中,腹腔给予毒胡萝卜素(TG)或软脂酸钠(PA),监测给药后动物空腹血糖的变化,当血糖浓度出现逆转时,摘取动物左侧肾脏,通过TUNEL原位染色法检测移植瘤细胞的凋亡。结果将INS-1细胞移植到糖尿病小鼠肾包膜下后,从第9天开始,动物空腹血糖进行性降低,血清胰岛素水平逐渐升高,当动物血糖接近至正常时,摘取动物左肾导致动物血糖显著升高,在摘取的左肾可见明显的移植瘤,免疫组织化学染色显示移植瘤细胞为胰岛素阳性。在胰岛素瘤动物模型给予TG或PA刺激后,动物空腹血糖出现逆转,显著升高,血清中胰岛素含量明显降低,摘取动物左侧肾脏后,TUNEL原位染色发现移植瘤内有明显的细胞凋亡。结论大鼠胰岛素瘤INS-1细胞肾包膜下移植可以建立胰岛素瘤动物模型,应用此动物模型可以在体内研究胰岛β细胞凋亡的机制。; 彭亮刘虹麟成兰云房青许世清门秀丽娄晋宁张文健; 关键词：胰岛素瘤胰岛素分泌细胞

血脑屏障体外实验模型的建立被引量：17: 2004年; 目的 :应用培养的CBA/J小鼠脑血管内皮细胞 (brainmicrovascularendothelialcells,BMVEC)构建血脑屏障(blood brainbarrier,BBB)的体外实验模型。方法 :将BMVEC种植在明胶包被的 2 4孔板细胞插入器的微孔滤膜上培养至汇合状态 ,通过 4h液面渗漏实验、扫描和透射电镜、血脑屏障形成前后膜两侧的电阻以及辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase ,HRP)的通透性和RMP 7对血脑屏障通透性的调控作用来证实BBB的形成。结果 :BMVEC培养至汇合后 ,4h液面渗漏实验成为阳性 ;扫描电镜显示细胞形成单层 ,透射电镜证实细胞间形成紧密连接 ;跨细胞电阻 (thetransendothelialelectricalresistance ,TEER)分别为汇合前和人脐静脉内皮细胞的 3.2倍和 7.7倍 ;对HRP的通透率分别为前对照组的 1 3.4 %和 6 .7% ;RMP 7处理使HRP在BBB的通透率增加了 2 .7倍。结论 :构建的BBB体外模型在形态学、电阻和通透性方面具备了BBB的基本特性。; 谢英叶丽亚张小滨侯新朴娄晋宁; 关键词：血脑屏障体外实验模型脑血管内皮细胞 BBB

线粒体形态与细胞凋亡的关系被引量：14: 2012年; 线粒体是高度动态的细胞器,其形态、数量以及在细胞内的分布经常发生变化,线粒体的融合/分裂率精确地调控细胞内线粒体的数目和形态。目前已知的与线粒体分裂有关的分子有Drp-1、Fis1、Mff、MTP18和Rab32,参与线粒体融合的分子有Mfn1/2和Opa1。线粒体的融合/分裂与细胞凋亡密切相关。最近报道凋亡早期出现线粒体网络的断裂和线粒体嵴的重塑,而且调控线粒体形态的蛋白参与了细胞凋亡,与凋亡调控有关的蛋白也影响线粒体的形态结构。因此,线粒体形态的变化与细胞凋亡密切相关,线粒体分裂过程增强可促进细胞凋亡的发生。本文将对线粒体的形态、线粒体的融合与分裂的调节及其与细胞凋亡的关系做一综述。; 门秀丽张丽萍吴静刘虹麟张文健娄晋宁; 关键词：线粒体细胞凋亡线粒体形态

P-糖蛋白抑制剂对两性霉素B血脑屏障转运的作用被引量：1: 2012年; 目的探讨P-糖蛋白抑制剂对两性霉素B（AraB）血脑屏障转运的影响。方法应用小鼠脑血管内皮细胞建立体外血脑屏障模型，选取维拉帕米作为P一糖蛋白抑制剂，AmB作为受试底物，经细胞毒性实验选定合适的温育时间及药物浓度，分别进行不同时间点的AraB细胞摄取实验及不同维拉帕米浓度的AraB细胞摄取实验。组间均数比较采用单因素方差分析，均数两两比较采用Bonferroni检验。结果AraB的血脑屏障转运随时间延长不断积累，与同一时间点对照组相比，抑制剂组在90rain（t=6．753，P=0．001）、120min（t=3．574，P=0．016）、150min（t=4．759，P=0．005）处AraB细胞摄取水平明显升高，其余时间点两组间差异无统计学意义。与阴性对照组相比，ArnB细胞摄取水平在不同浓度维拉帕米组（2、5、10、50、75和100μmol／L）均有显著提高（P=0．000、0．014、0．000、0．014、0．000、0．000），且随维拉帕米浓度升高增加幅度更明显。结论P=糖蛋白抑制剂维拉帕米可提高脑毛细血管内皮细胞对Arab的摄取作用，提示P-糖蛋白参与血脑屏障AraB的转运。; 王睿莹吴吉芹邵堃蒋晨王璇娄晋宁朱利平翁心华; 关键词：P-糖蛋白两性霉素B 血脑屏障体外研究

比较肿瘤坏死因子α和内毒素对人脑微血管内皮细胞凝血和纤溶活性的影响被引量：1: 2009年; 目的:比较肿瘤坏死因子α(TNF-α)和内毒素脂多糖(LPS)对人脑微血管内皮细胞(HBMVECs)凝血和纤溶活性的影响。方法:从人脑组织分离、纯化和培养HBMVECs,通过细胞免疫荧光染色、流式细胞术和电子显微镜对HBMVECs进行鉴定。检测TNF-α和LPS刺激前后HBMVECs凝血纤溶活性变化:一期凝固法检测凝血活性(PCA);酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞组织因子(TF)、血栓调节蛋白(TM)、组织纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的水平。结果:分离、纯化的HBMVECs表达内皮细胞典型的标志分子vWF、CD31,并具有摄取乙酰化低密度脂蛋白的能力。LPS和TNF-α促进HBMVECs的凝血活性,上调PCA和TF的产生,抑制抗凝血活性,下调TM的表达;并明显促进纤溶活性t-PA和PAI-1的表达。通过比较PCA/TM发现,TNF-α对HBMVECs凝血活性的影响明显强于LPS。结论:TNF-α在感染性中枢神经系统疾病中可能是导致脑微血管内皮细胞功能障碍的主要因素之一。; 王丽娜张文健叶丽亚娄晋宁鄢盛恺; 关键词：内皮细胞肿瘤坏死因子内毒素脂多糖凝血纤溶活性

微血管内皮细胞与缺血-再灌注损伤: 2007年; 缺血组织在恢复血液灌流后．会发生组织细胞功能代谢障碍和结构破坏进一步加重的病理过程。称为缺血一再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury，IR）。临床上，凡是由于各种原因引起器官和组织的缺血和缺氧，在治疗恢复过程中都会涉及到IR的问题．如器官移植、脑卒中和外伤休克等。微血管内皮细胞是贴附于微血管内壁的单层细胞．它不仅组成血管一组织间的屏障。; 冯洁吴练秋娄晋宁李成辉; 关键词：缺血-再灌注损伤微血管内皮细胞缺血组织 INJURY 病理过程代谢障碍

胰岛细胞抗体分型与胰岛细胞凋亡的实验研究: 2001年; 研究通过大量临床糖尿病病人胰岛细胞抗体 (Islet Cell Antibody,ICA)检测 ,发现 ICA阳性反应有两种完全不同的形态学表现 :弥漫型 ICA和边缘型 ICA。经免疫组织化学双标技术鉴别 ,弥漫型 ICA可同时有着染 α细胞和 β细胞 ,边缘型 ICA则仅着染 α细胞。这种只着染 α细胞的 ICA国内外尚未见有报道。为探讨其在糖尿病发病中所起的作用 ,选择 1型糖尿病 (1- DM)的弥漫型 ICA和边缘型 ICA各 3例 ,另选正常人 3例作对照。用患者血清分别以 2、 4、 8小时三个时相与分离并贴壁生长的正常人胰岛细胞孵育后 ,进行原位细胞凋亡检测。结果发现 ,弥漫型 ICA、边缘型 ICA均可导致胰岛细胞产生凋亡 ,其中弥漫型 ICA使 β细胞及 α细胞出现凋亡 ;边缘型 ICA使 α细胞产生凋亡。这一结果提示 :糖尿病发病机制除与分泌胰岛素的 β细胞有密切关系的经典途径之外 ,可能还与分泌胰高血糖素的; 潘琳叶丽娅杨兆军李静彭俊云李光伟娄晋宁; 关键词：抗体分型胰岛细胞凋亡糖尿病

一种人肿瘤干细胞系及其用途: 本发明提供一种人肿瘤干细胞系T3A－A3，该人肿瘤干细胞系从原发肝癌患者手术切除的肝癌组织中分离获得，该细胞能够在体外长期传代培养，已传代超过100次，细胞仍然生长迅速，并保持干细胞性质。该细胞既表达多种干细胞的标志、具...; 刘虹麟张文健叶丽亚娄晋宁; 文献传递

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