许世清
- 作品数：53 被引量：154H指数：7
- 供职机构：中日友好医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胰岛的分离纯化和功能评价被引量：3
- 2009年
- 目的应用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化人的胰岛，并进行功能和安全性的评价。方法获得6例成人尸体胰腺组织供体，采用胶原酶消化法及密度梯度离心法分离和纯化胰岛，并分析胰岛的数量、纯度和活力。采用免疫荧光法分析胰岛内分泌细胞的组成和分布；检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛移植后的动物血糖水平。并对分离胰岛的安全性指标进行评价。结果分离纯化后的胰岛数量为（22．9±3．1）万IEQ，纯度为（59．0±8．9）％，活力为（89．0±3．0）％。免疫荧光显示，胰岛由4种内分泌细胞组成并呈正常分布。葡萄糖刺激胰岛素释放的刺激指数为8．1±4．0。胰岛移植于糖尿病裸鼠后，血糖在3d后降至正常水平并维持超过30d。分离胰岛样本的各项安全性指标在规定范围之内。结论采用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化的胰岛在形态、结构、数量、纯度、活力、体内外功能以及安全性方面都达到临床胰岛移植的标准，为开展临床胰岛移植奠定了基础。
- 蔡寒青许世清门秀丽眭维国张文健李启东杨文英娄晋宁
- 关键词：胰岛移植糖尿病胰岛素分离纯化
- 人胚胎胰腺组织干细胞的分离鉴定和纯化被引量：1
- 2007年
- 分离人胚胎胰腺组织中的胰岛细胞于体外培养,应用免疫细胞化学及RT-PCR的方法对其中的胰腺干细胞进行鉴定,并应用免疫磁珠的方法纯化其中的干细胞。结论是人胚胎胰腺组织中存在一定比例的干细胞,可以作为体外向胰岛素分泌细胞诱导分化的细胞来源。
- 葛焕琦蔡寒青门秀丽许世清潘焕峰娄晋宁
- 关键词：胰腺干细胞糖尿病诱导分化胰岛移植
- 蛋白激酶的激活保护GK大鼠糖尿病肾病
- 张文健王慧姜永玮许世清彭亮刘虹麟房青娄晋宁
- 大鼠胰岛素瘤实验模型的建立及其应用
- 2013年
- 目的通过移植大鼠胰岛素瘤INS-1细胞至糖尿病小鼠肾包膜下使之形成胰岛素瘤,并诱导其发生凋亡,建立可用于研究胰岛β细胞凋亡机制的动物模型。方法将5×106INS-1细胞接种于链脲霉素(STZ)造模的糖尿病小鼠左肾包膜下,监测动物空腹血糖和血清胰岛素水平的变化,当血糖趋近正常后摘取动物左侧肾脏并检测其血糖和血清胰岛素水平的变化;固定包埋摘取的肾脏,进行HE染色以及胰岛素的免疫组化染色,确定胰岛素瘤模型的建立。在胰岛素瘤动物模型中,腹腔给予毒胡萝卜素(TG)或软脂酸钠(PA),监测给药后动物空腹血糖的变化,当血糖浓度出现逆转时,摘取动物左侧肾脏,通过TUNEL原位染色法检测移植瘤细胞的凋亡。结果将INS-1细胞移植到糖尿病小鼠肾包膜下后,从第9天开始,动物空腹血糖进行性降低,血清胰岛素水平逐渐升高,当动物血糖接近至正常时,摘取动物左肾导致动物血糖显著升高,在摘取的左肾可见明显的移植瘤,免疫组织化学染色显示移植瘤细胞为胰岛素阳性。在胰岛素瘤动物模型给予TG或PA刺激后,动物空腹血糖出现逆转,显著升高,血清中胰岛素含量明显降低,摘取动物左侧肾脏后,TUNEL原位染色发现移植瘤内有明显的细胞凋亡。结论大鼠胰岛素瘤INS-1细胞肾包膜下移植可以建立胰岛素瘤动物模型,应用此动物模型可以在体内研究胰岛β细胞凋亡的机制。
- 彭亮刘虹麟成兰云房青许世清门秀丽娄晋宁张文健
- 关键词：胰岛素瘤胰岛素分泌细胞
- 坎地沙坦与卡托普利对1型糖尿病小鼠主动脉活性氧水平的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂坎地沙坦与血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利治疗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠主动脉氧化应激和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)功能障碍的影响。方法:腹腔注射STZ建立1型糖尿病C57BL/6小鼠模型,将诱导成功的成模小鼠随机分成3组:糖尿病对照组(DM)、坎地沙坦干预组(DM+CAD)、卡托普利干预组(DM+CAP),以同周龄同性别正常小鼠为正常对照组(NC)。本实验采用超氧化物阴离子荧光探针(DHE)检测小鼠主动脉总体活性氧(ROS)的产生,用eNOS抑制剂L-NAME检测小鼠对L-NAME敏感的主动脉ROS生成量。结果:与NC组相比,模型组小鼠主动脉DHE荧光染色显示氧化应激水平明显升高(P<0.05)。与DM组相比,DM+CAD组与DM+CAP组小鼠主动脉中ROS生成量明显减少,主动脉红色荧光强度明显减少(P<0.05)。给予L-NAME孵育后,NC组小鼠的主动脉荧光水平增强(P<0.05),DM组小鼠的主动脉荧光水平降低(P<0.05);DM+CAD和DM+CAP组小鼠主动脉荧光水平增强(P<0.05)。结论:坎地沙坦与卡托普利的干预可显著降低1型糖尿病小鼠主动脉氧化应激水平,减少了因eNOS功能失调引起的活性氧簇(ROS)的产生。
- 刘畅张正浩许世清
- 关键词：坎地沙坦卡托普利糖尿病氧化应激小鼠
- α-1抗胰蛋白酶对肝窦内皮细胞缺氧复氧损伤保护作用的实验研究被引量：12
- 2005年
- 目的探讨α1抗胰蛋白酶对人肝窦内皮细胞(LSEC)冷缺氧复氧损伤的保护作用。方法人LSEC在体外培养,通过低温、缺氧复氧建立缺氧复氧损伤实验模型,观察α1抗胰蛋白酶对LSEC缺氧复氧损伤的影响。细胞凋亡应用原位免疫组织化学和DNA梯状条带方法检测;产生基质金属蛋白酶(MMP)的活性应用酶谱方法分析;一氧化氮的产生通过检测亚硝酸盐含量进行分析;一氧化氮合酶的表达采用细胞免疫组织化学方法进行分析。结果低温、缺氧复氧引起LSEC凋亡,而α1抗胰蛋白酶抑制LSEC的凋亡。应用一氧化氮的抑制剂Nω硝基左旋精氨酸(LNAME)或MMP的抑制剂BB3103明显减少缺氧复氧诱导的LSEC的凋亡,而应用外源性一氧化氮的供体S亚硝基N乙酰青霉氨(SNAP)则明显增加LSEC的凋亡,表明一氧化氮和MMP在LSEC凋亡过程中是重要的介导物。在缺氧复氧过程中,一氧化氮合酶表达增强,一氧化氮产生增多,产生MMP的活性增强。α1抗胰蛋白酶明显抑制缺氧复氧过程中MMP的释放,并通过抑制一氧化氮合酶的表达减少一氧化氮的产生。结论α1抗胰蛋白酶通过抑制一氧化氮和MMP的产生保护LSEC的冷缺氧复氧损伤。
- 杨红张文健吴练秋顾锋叶丽亚李静许世清徐亚平娄晋宁
- 关键词：肝窦内皮细胞缺氧-复氧损伤
- 腺苷及腺苷A1受体在小鼠肾小球系膜细胞收缩中的作用
- 2020年
- 目的:观察腺苷A1受体(A1AR)在小鼠肾小球系膜细胞的表达,探讨腺苷和A1AR是否参与肾小球系膜细胞的收缩。方法:采用分样筛法提取原代小鼠肾小球系膜细胞,CCK8试剂盒检测细胞增殖,免疫荧光染色和Western blot观察A1AR在系膜细胞中的表达,每2min拍照动态观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激30min前后细胞面积的变化,对比腺苷、A1AR激动剂、A1AR抑制剂对细胞收缩的影响。结果:腺苷对系膜细胞的增殖无明显影响,A1AR主要表达于小鼠肾小球系膜细胞的胞浆中。腺苷和A1AR激动剂刺激48h后,系膜细胞在接触AngⅡ30min后的收缩反应显著增强,面积变化值分别达到8947±3658pixels和9813±1640pixels,显著大于正常对照组(4268±2131pixels,P<0.05);而使用A1AR抑制剂刺激48h后,系膜细胞的收缩反应有减弱趋势。结论:小鼠系膜细胞存在A1AR表达,腺苷及A1AR是调节系膜细胞收缩的重要机制。
- 刘琳姜世敏卓莉徐波许世清向青高红梅李文歌
- 关键词：腺苷腺苷A1受体系膜细胞
- 胰岛移植的新疗效——防止和逆转糖尿病的血管病变
- 2009年
- 现今，糖尿病已成为世界上发病率最高、对人类健康威胁最为严重的疾病之一。糖尿病患者由于产生胰岛素障碍或胰岛素不能完全发挥生理作用而引起糖代谢紊乱，导致一系列血管病变及其并发症，如动脉粥样硬化、肢体缺血坏死、视网膜病变和肾功能衰竭。虽然采用胰岛素治疗在一定程度上能够纠正患者的糖代谢紊乱，
- 姜永玮睢维国蔡寒青许世清娄晋宁
- 关键词：血管病变胰岛移植胰岛素治疗糖代谢紊乱逆转疗效
- 瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的研究被引量：10
- 2002年
- 目的 探讨瘢痕疙瘩的成纤维细胞的增殖和凋亡状态。方法 采用免疫组化和末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记技术 ,检测 2 4例瘢痕疙瘩和其周围正常皮肤中成纤维细胞的增殖和凋亡状态。以每 10个高倍镜(40 0倍 )视野中成纤维细胞凋亡及PCNA阳性细胞数与总细胞数之比作为凋亡指数和增殖指数 ,利用配对t检验进行统计学处理。结果 2 4例瘢痕疙瘩成纤维细胞和对照组平均增殖指数、平均凋亡指数、平均凋亡指数 /平均增殖指数 ,经配对t检验具有高度显著性差别。结论 瘢痕疙瘩成纤维细胞的过量增生和凋亡相对减少在瘢痕疙瘩的发生和发展中起着重要作用。
- 侯祚琼宋业光许世清
- 关键词：瘢痕疙瘩增殖凋亡
- 严重急性呼吸综合征患者血清细胞因子的分析被引量：1
- 2003年
- 张远春李静湛玉良吴练秋于雪莹张文健叶丽亚许世清孙瑞华王云亭娄晋宁
- 关键词：严重急性呼吸综合征血清细胞因子SARS
