刘虹麟
- 作品数：31 被引量：67H指数：3
- 供职机构：中日友好医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
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- 同一组织来源的肝癌干细胞分化能力异质性的体外研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过比较肝癌干细胞的不同单细胞克隆的体外分化能力,分析同一组织来源的肿瘤干细胞分化能力是否具有异质性,以进一步明确肿瘤干细胞的分化特性,为靶向肿瘤干细胞的治疗提供实验依据。方法通过有限稀释法对肝癌干细胞进行单细胞克隆培养,获得的单细胞克隆通过MTT测定比较其增殖能力。然后分别挑选增殖速度较快和较慢的3个克隆,采用RT-PCR方法比较其干细胞标志物表达水平。对干细胞标志表达水平高的3个克隆(A2、A3和B2)进行向成骨、软骨和脂肪方向的诱导分化。采用实时荧光定量PCR方法检测诱导前后成骨、软骨和脂肪标志分子的表达。结果获得的20个单细胞克隆增殖能力不同,并且增殖能力快的克隆表达干细胞标志物CD133、Oct4、c-kit、SCF、nestin比增殖能力慢的克隆强。向成骨方向诱导后,A2、A3和B2克隆I型胶原mRNA表达水平分别升高了(4.71±0.11)、(2.13±0.15)和(3.82±0.3)倍;骨钙素mRNA的表达水平分别升高(8.55±0.18)、(7.02±0.03)和(7.91±0.09)倍,说明A2克隆向成骨细胞分化能力最强。向软骨方向诱导后,B2分化能力最强,软骨标志分子蛋白聚糖和II型胶原的表达分别上调(25.01±0.19)倍和(17.49±0.19)倍,而在A2未发生明显变化,A3只轻微上调。向脂肪方向诱导后,A2、A3和B2克隆脂联素mRNA表达水平分别升高了(6.12±0.15)、(11.45±0.36)和(12.41±1.03)倍,过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达水平分别升高(4.92±0.02)、(9.54±0.18)和(8.96±0.11)倍。结论来源于同一组织的肝癌干细胞在分化能力上具有异质性,这可能是导致肿瘤组织异质性的原因之一,也提示靶向肿瘤干细胞的治疗需要联合用药。
- 刘虹麟许世清彭亮王在房青娄晋宁秦蕾王培刚张文健
- 关键词：肿瘤干细胞细胞分化间质细胞
- 肿瘤干细胞向不同肿瘤细胞分化的实验研究
- 肿瘤干细胞（cancerstemeells，CSCs）的存在已在某些肿瘤细胞株及原发性肿瘤中得到了证实，但肿瘤干细胞是否具有分化成为不同肿瘤细胞的潜能尚未见报道。因此，研究肿瘤干细胞的多向分化潜能对阐明肿瘤的发生、发展和...
- 刘虹麟
- 关键词：肿瘤干细胞淋巴瘤黑色素瘤CD10多向分化
- 文献传递
- 人胚胎主动脉血管内皮祖细胞的分离、培养及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的研究人胚胎血管内皮祖细胞(EPCs)分离、扩增及鉴定的方法,并评价其分化成血管内皮细胞的能力,为人胚胎血管来源EPCs作为干细胞技术治疗疾病的细胞材料提供依据。方法从14周龄流产人胚胎主动脉中应用胶原酶消化法分离获得EPCs,用含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的低血清培养基体外扩增培养EPCs。分离培养的EPCs鉴定采用细胞免疫荧光染色、RT-PCR及流式细胞术,检测EPCs细胞的特异标志CD133、CD34和血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)。培养的EPCs应用VEGF进行诱导分化,并评价其分化成为血管内皮细胞的能力。结果分离的人胚胎主动脉EPCs细胞表达EPCs的标志分子CD133、CD34和VEGFR2。EPCs在体外特定低血清培养条件下表现很强的增殖能力。培养的EPCs细胞经过VEGF诱导后,细胞表达CD133明显降低,表达vWF、CD31和ELAM-1增强,并且体外成管能力和摄取Ac-LDL能力增强,表明细胞分化成为血管内皮细胞。结论人胚胎早期主动脉的EPCs具有很好的体外自我更新能力和分化成为血管内皮细胞的潜能,可作为EPCs治疗疾病的细胞材料。
- 庄乾淑张文健叶丽亚刘虹麟曹妍婷成兰云丁浩娄晋宁刘鹏李建中
- 关键词：血管内皮生长因子受体2主动脉细胞分离
- 人胎盘CD133<'+>细胞群中LTC-ICs的功能特性
- 目的：造血干/祖细胞(HSPCs)移植的目的是使受者重建长期造血功能，其关键是原始造血干细胞(PHSCs)必须植入/归巢，并增殖分化，不断产生各系血细胞。表型(CD34、CD133)分析和传统造血祖细胞集落形成试验都不能...
- 刘虹麟
- 关键词：人胎盘组织造血功能
- 文献传递
- 蛋白激酶的激活保护GK大鼠糖尿病肾病
- 张文健王慧姜永玮许世清彭亮刘虹麟房青娄晋宁
- 大鼠胰岛素瘤实验模型的建立及其应用
- 2013年
- 目的通过移植大鼠胰岛素瘤INS-1细胞至糖尿病小鼠肾包膜下使之形成胰岛素瘤,并诱导其发生凋亡,建立可用于研究胰岛β细胞凋亡机制的动物模型。方法将5×106INS-1细胞接种于链脲霉素(STZ)造模的糖尿病小鼠左肾包膜下,监测动物空腹血糖和血清胰岛素水平的变化,当血糖趋近正常后摘取动物左侧肾脏并检测其血糖和血清胰岛素水平的变化;固定包埋摘取的肾脏,进行HE染色以及胰岛素的免疫组化染色,确定胰岛素瘤模型的建立。在胰岛素瘤动物模型中,腹腔给予毒胡萝卜素(TG)或软脂酸钠(PA),监测给药后动物空腹血糖的变化,当血糖浓度出现逆转时,摘取动物左侧肾脏,通过TUNEL原位染色法检测移植瘤细胞的凋亡。结果将INS-1细胞移植到糖尿病小鼠肾包膜下后,从第9天开始,动物空腹血糖进行性降低,血清胰岛素水平逐渐升高,当动物血糖接近至正常时,摘取动物左肾导致动物血糖显著升高,在摘取的左肾可见明显的移植瘤,免疫组织化学染色显示移植瘤细胞为胰岛素阳性。在胰岛素瘤动物模型给予TG或PA刺激后,动物空腹血糖出现逆转,显著升高,血清中胰岛素含量明显降低,摘取动物左侧肾脏后,TUNEL原位染色发现移植瘤内有明显的细胞凋亡。结论大鼠胰岛素瘤INS-1细胞肾包膜下移植可以建立胰岛素瘤动物模型,应用此动物模型可以在体内研究胰岛β细胞凋亡的机制。
- 彭亮刘虹麟成兰云房青许世清门秀丽娄晋宁张文健
- 关键词：胰岛素瘤胰岛素分泌细胞
- 线粒体形态与细胞凋亡的关系被引量：14
- 2012年
- 线粒体是高度动态的细胞器,其形态、数量以及在细胞内的分布经常发生变化,线粒体的融合/分裂率精确地调控细胞内线粒体的数目和形态。目前已知的与线粒体分裂有关的分子有Drp-1、Fis1、Mff、MTP18和Rab32,参与线粒体融合的分子有Mfn1/2和Opa1。线粒体的融合/分裂与细胞凋亡密切相关。最近报道凋亡早期出现线粒体网络的断裂和线粒体嵴的重塑,而且调控线粒体形态的蛋白参与了细胞凋亡,与凋亡调控有关的蛋白也影响线粒体的形态结构。因此,线粒体形态的变化与细胞凋亡密切相关,线粒体分裂过程增强可促进细胞凋亡的发生。本文将对线粒体的形态、线粒体的融合与分裂的调节及其与细胞凋亡的关系做一综述。
- 门秀丽张丽萍吴静刘虹麟张文健娄晋宁
- 关键词：线粒体细胞凋亡线粒体形态
- 胰高血糖素样肽-1通过抑制糖原合成酶激酶-3β活性保护内质网应激诱导的β细胞凋亡被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对内质网应激诱导的胰岛β细胞系INS-1细胞凋亡的影响及其机制。方法:培养INS-1细胞,接种后分组:正常对照组、0.1μM毒胡萝卜素(TG)处理组、0.5μM TG处理组、1μM TG处理组、GLP-1(10n M)处理组、TG+GLP-1处理组、SB415286(10μM)处理组和TG+SB415286处理组。细胞处理后,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,TG组INS-1细胞凋亡率均显著升高(P<0.05,P<0.01),随着TG浓度的增加Caspase-3活性逐渐升高。与TG处理组相比,TG和GLP-1共同处理组INS-1细胞凋亡率显著下降(P<0.01),且Caspase-3活性下降;TG和GLP-1共同处理组糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的活性下降。TG和SB415286共同处理组INS-1细胞凋亡率显著下降(P<0.05),且Caspase-3活性下降。结论 :GLP-1可以通过抑制GSK-3β活性减轻内质网应激引起的损伤从而保护β细胞。
- 王猛张文健许世清彭亮王在刘虹麟房青邓婷婷娄晋宁
- 关键词：胰高血糖素样肽-1Β细胞糖原合成酶激酶-3Β
- 刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖分化能力的影响被引量：11
- 2006年
- 目的:观察刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖分化能力的影响。方法:采用MTT法测定活细胞OD值,计算CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率。免疫磁珠分选人脐血CD34+造血干/祖细胞,细胞记数、双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪分析细胞增殖分化能力变化。结果:MTT检测法显示,0.01~10μmol.L-1的CL1处理,剂量依赖性和时间依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞生长。经14 d的培养,与细胞对照组相比,10、1μmol.L-1的CL1细胞数有下降趋势,但差异无显著性;表达粒系/单核巨噬系细胞表型CD15和CD11b的细胞百分数无显著差异。经14 d的培养,与培养0 d比较,CD15显著增高(P<0.05),CD11b有增高趋势,但无显著性差异。结论:CL1对胃癌SGC-7901细胞的体外生长具有抑制作用,但对人脐带血CD34+HSPC的增殖、和向粒细胞、单核巨噬细胞分化无明显影响,表明CL1在抗肿瘤作用剂量下,不会明显抑制造血干/祖细胞向粒-单细胞的增殖分化,提示CL1可能不会引起明显的造血抑制。
- 刘虹麟陈代雄方宁余丽梅刘金伟刘祖林文国容杨小生肖瑜祈莹肖建辉万卫红胡锡阶
- 关键词：刺梨胃癌
- KLF4对肿瘤干细胞自我更新和增殖潜能的影响被引量：9
- 2011年
- 目的:分析Kr櫣ppel样因子4(Krppel-like factor4,KLF4)对肿瘤干细胞T3A-A3自我更新和增殖能力的影响。方法:构建靶向干扰KLF4的慢病毒载体pLVTHM-shKLF4,利用前期实验分离与鉴定的肿瘤干细胞T3A-A3,应用RT-PCR和Western blotting分别检测pLVTHM-shKLF4感染后T3A-A3细胞中KLF4mRNA和蛋白的表达。细胞球形成实验检测pLVTHM-shKLF4感染对T3A-A3细胞自我更新的影响,平板集落形成实验检测T3A-A3细胞的克隆形成能力,流式细胞术检测T3A-A3细胞周期变化。裸鼠皮下移植瘤实验观察pLVTHM-shKLF4干扰KLF4表达后对T3A-A3细胞移植瘤生长的影响。结果:与肝癌细胞BEL-7402、HepG2相比,肿瘤干细胞T3A-A3表达更高水平的KLF4;pLVTHM-shKLF4感染能够在mRNA和蛋白水平下调T3A-A3细胞中KLF4的表达。pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞形成细胞球的直径明显小于对照病毒的pLVTHM-shNC感染的T3A-A3细胞[(104.33±16.28)vs(186.67±28.15)μm,P<0.01],pLVTHM-shKLF4感染细胞形成的细胞克隆数目明显少于对照细胞[(83.5±7.78)vs(125±9.19)个,P<0.01),pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞G1期比例明显升高[(39.65±4.03)%vs(29.35±1.00)%,P<0.01]。pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞的移植瘤生长速度较对照细胞移植瘤明显减慢[细胞接种33 d,(46.14±12.94)vs(228.12±94.86)mm3,P<0.01]。结论:干扰KLF4的表达可抑制肿瘤干细胞T3A-A3的自我更新及其在体内外的增殖潜能。
- 贾勇圣张文健刘虹麟彭亮杨治华娄晋宁
- 关键词：肿瘤干细胞自我更新增殖
