喻治准
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中山大学中山医学院微生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 登革病毒1、2型病毒样颗粒免疫学研究
- 目的：将制备的登革1、2型病毒样颗粒(VLPs)单独及联合免疫Ba1b/c小鼠,研究其刺激机体产生的免疫应答。方法：采用间接ELISA法检测VLPs特异性IgG抗体效价及攻毒后血清细胞因子变化;采用间接免疫荧光法检测免疫...
- 刘岩周俊梅方丹云喻治准晏辉钧刘文权汤云霞付春云江丽芳
- 关键词：登革病毒致病机制细胞免疫动物模型
- 文献传递
- 登革1-4型病毒样颗粒(VLPs)的构建、表达及免疫学研究
- 刘岩周俊梅喻治准方丹云晏辉钧刘文权汤云霞付春云江丽芳
- 登革2型病毒prM蛋白B细胞表位的筛选与鉴定
- 目的:分析登革病毒prM蛋白的抗原优势表位,研究其免疫原性,免疫保护性;并研究prM型交叉单抗和该单抗对应的表位肽抗血清对DENV1～4型成熟病毒颗粒及登革病毒2型不成熟病毒颗粒(immature DENV2,imDEN...
- 罗雅艳冯俊杰周俊梅喻治准方丹云晏辉钧曾谷城江丽芳
- 关键词：登革病毒表位噬菌体肽库
- 文献传递
- 登革病毒3型病毒样颗粒在酵母体内的表达与鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的探讨登革病毒3型病毒样颗粒(DENV3-VLPs)的免疫原性。方法用PCR法扩增登革病毒3型prME基因,插入载体pGAPZaA构建重组质粒pGAPZaA-prME-D3,将其转化毕赤酵母X33构建转化子pGAPZaA-prME-D3/X33。对转化子表达上清和细胞裂解液进行SDS-PAGE和Western blotting分析。用蔗糖密度梯度离心纯化表达的DENV3-VLPs并进行鉴定和电镜观察。结果成功构建重组载体pGAPZaA-prME-D3,获得酵母转化子pGAPZaA-prME-D3/X33,并应用毕赤酵母表达了DENV3-VLPs,表达蛋白约50000Mr,电镜观察VLPs直径为20～50nm。结论应用酵母表达系统成功表达了DENV-3VLPs,经鉴定表明其具有免疫反应性,为后续免疫原性研究及四价登革VLPs疫苗的构建奠定了基础。
- 付春云方丹云刘岩喻治准江汉宁江丽芳周俊梅
- 关键词：登革病毒病毒样颗粒毕赤酵母
- 登革2型病毒prM蛋白的分泌表达及B细胞表位的筛选与鉴定
- 罗雅艳冯俊杰周俊梅喻治准方丹云江丽芳
- 基于DENV-prM/E基因构建DENV-VLP及其免疫学特性
- 2014年
- [目的]构建和表达登革病毒4型病毒样颗粒,初步研究其免疫学特性.[方法]用RT-PCR法扩增DENV4-prM/E基因,构建重组质粒pGAPZ-sprM/E-D4,转化X33酵母菌株,SDS-PAGE、Western Blot鉴定目的蛋白表达.切片电镜检测病毒样颗粒,蔗糖密度梯度离心纯化.免疫三组Balb/C小鼠,每组15只.采用间接ELISA检测抗原特异性抗体,间接免疫荧光法检测免疫血清与天然病毒粒子的结合,流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞表型,酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测脾分泌IFN-γ、TNF-α和IL-10的细胞.[结果]重组质粒在酵母中以病毒样颗粒形式表达,为直径20～ 30hm的球形颗粒,VLP免疫组刺激小鼠产生抗体与灭活病毒组相似,流式及ELISPOT结果提示DENV4-VLP与灭活病毒组相似,用登革病毒抗原刺激后,分泌IFN-γ,TNF-α的细胞数目明显增加,各组分泌IL-10细胞数目的整体水平均不高.[结论]应用毕赤酵母表达系统成功表达获得了DENV4-VLP,具有良好的免疫原性,可诱导Balb/C小鼠产生有效的体液免疫应答,并能诱导Th1型免疫应答而诱导Th2型免疫应答较弱.
- 方丹云刘岩喻治准罗雅艳江丽芳周俊梅
- 关键词：登革病毒病毒样颗粒免疫应答
- 登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒的免疫原性研究
- 2012年
- 目的初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒(VLP)的免疫原性。方法表达纯化各型VLP,用纯化好的VLP免疫BALB/c小鼠,将BALB/c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1+2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照。ELISA法检测小鼠血清抗VLP抗体效价以及血清IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+细胞和CD8+细胞数。结果登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2～3倍;攻毒后,灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-γ,分别为60和35pg/ml,双价VLP组的较低;VLP2组的TNF-α一直保持较高水平,双价VLP组中攻DENV2组的TNF-α水平较DENV1组高;三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4+细胞的比例都有下降,而CD8+细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少。结论无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性。
- 喻治准刘岩付春云方丹云江丽芳周俊梅
- 关键词：登革病毒病毒样颗粒免疫原性
