吴海超
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
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- 猪圆环病毒2型基因1群B亚簇的体外培养特征被引量：1
- 2013年
- 为探寻猪圆环病毒2型(PCV2)在PK15细胞中的复制特征,将PCV2基因1群B亚簇(PCV2–1B)病毒感染PK15均质细胞A10,待感染细胞层长满,对其进行连续传代;对第5、6代细胞进行维持培养,即在细胞长满后隔天更换培养基,以维持细胞良好的生长;用第10代带毒细胞的培养液接种A10细胞,并进行换液维持培养。PCR与定量PCR检测结果表明,PCV2–1B病毒感染A10细胞后,其病毒基因组的含量在感染细胞长满之前(约96 h)随着细胞的增多而上升,同时也随着传代次数的增多而上升;换液维持培养的细胞,在维持10 d后PCV2–1B病毒基因组的含量能维持在107～108拷贝/mL,而第10代带毒细胞的培养液接毒A10之后,病毒基因组含量随细胞增多而上升,在达到约108拷贝/mL后,病毒基因组含量维持在107～108拷贝/mL。
- 罗维赵墩吴海超蒋大良余兴龙
- 关键词：猪圆环病毒2型PK15细胞毒株
- 一株猪丹毒杆菌的分离鉴定及其致病性实验被引量：6
- 2015年
- 从湖南邵阳某猪场的急性发病育肥猪体内分离到一株革兰氏阳性小杆菌,通过对其形态特征、PCR检测、生化反应、动物回归等试验,确定其为猪丹毒杆菌.通过对小鼠和猪的攻毒试验表明：该菌对ICR小鼠的LD50为1.75CFU,11×10^7CFU能使8～10周龄的阴性猪致死,且攻毒死亡猪呈典型的猪丹毒临床症状.说明所分离到的猪丹毒杆菌对小鼠和猪致病性极高,为强毒株.
- 赵墩魏榕刘晓波胡玉立吴海超屈泰龙李润成余兴龙
- 关键词：猪丹毒杆菌小鼠
- 育肥猪血清中猪细小病毒16WS株的分离与鉴定被引量：2
- 2014年
- 从一育肥猪早、中期生产状况差的猪场收集猪血清214份,采用猪细小病毒（PPV）特异性检测引物进行PCR检测,选取1份阳性血清接种猪睾丸细胞（ST）进行PPV分离、部分生物学特性研究,以及PPV部分基因序列分析。结果表明：在15、16、17、18、22周龄猪血清中均检测到PPV,检测阳性率分别为10%、40%、20%、15.4%、9%,而从2~14及24周龄的猪血清中没有检测到PPV;病毒分离和部分生物学特性研究结果表明,从血清中分离的PPV在ST细胞上传到第5代能够出现较稳定的细胞病变（CPE）,病毒血凝效价为28;PPV部分基因序列与GenBank收录的PPV毒株序列同源性在98%以上,其中与2012年西北农林科技大学时乐[1]分离的YL毒株同源性高达99.1%。以上结果证实本研究分离到PPV,且说明PPV在采样猪场的保育后期和育肥前、中期猪血清中具有较高的阳性率。
- 吴海超胡呈才刘崇灵李润成余兴龙
- 关键词：育肥猪猪细小病毒
- 病料中猪圆环病毒(PCV)的分型检测及PCV2型不同毒株的培养被引量：1
- 2013年
- 对湖南各地区送检猪病料进行了猪圆环病毒(PCV)的PCR检测,并对PCV阳性病料的DNA进行了猪圆环病毒1(PCV1)与PCV2的PCR分型检测。结果表明:送检的192份样品中,有117份为PCV阳性;117份PCV阳性样品全部含有PCV2的DNA,其中2份既有PCV2也有PCV1的DNA;对病料中的PCV2进行克隆,获得的序列均为PCV2–1基因组,对其中2株毒株的序列进行感染性克隆病毒的构建,拯救的病毒命名为PCV2(2–1)和PCV2(4–1);对PCV2(2–1)和PCV2(4–1)进行培养,结果 2株病毒均可以在换液维持的细胞中有效的复制。
- 罗维赵墩王湘吴海超蒋大良余兴龙
- 关键词：感染性克隆毒株
- 猪细小病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测不同接毒条件对病毒增殖效果的影响被引量：1
- 2014年
- 为提高细小病毒(PPV)细胞培养的滴度,本试验通过对猪细小病毒(PPV)感染ST细胞接毒工艺各步骤的比较研究,从不同接毒方式、细胞接种量、病毒感作时间以及接种浓度等方面进行分析,利用猪细小病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法对病毒滴度进行检测。结果表明:ST细胞覆盖率接近单层时接毒,采用分步法接毒,以103倍稀释病毒接种,接种病毒后感作2h,将接毒后细胞维持液中血清浓度设为2%这5个方面的接毒工艺可提高PPV细胞培养的病毒滴度。
- 刘崇灵刘晓波胡呈才吴海超李润成
- 关键词：猪细小病毒病毒增殖
