目的建立华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,比较两者检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S r RNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫Ig G抗体阳性例数为20例,阳性率为10.0%;ICT法为16例,阳性率为8.0%,灵敏度为80.0%,特异度为100.0%,符合率为98.0%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=2.25,P>0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9.0%,灵敏度为90.0%,特异度为100.0%,符合率为99.0%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ2=0.05,P>0.05)。说明ICT、RT-PCR两种检测方法与ELISA的测定结果比较一致。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高,两种检测方法均适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。
目的对深圳地区手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）肠道病毒71型分离株（enterovirus71，EV71）的VP4基因遗传进化进行分析。方法2009年采集深圳市儿童医院就诊的HFMD患者的粪便标本491份，选取其中8份经细胞培养鉴定为阳性的EV71毒株用RT-PCR扩增VP4基因，利用MEGA4．0软件进行遗传进化分析。结果2009年深圳地区8株EV71VP4基因全长207bp，编码69个氨基酸；8株EV71VP4基因核苷酸同源性为94．2％-98．1％，与深圳2001至2004年分离的17株EV71毒株核苷酸同源性在89．9％～98．1％，与GenBank中其他EV71病毒株VP4的核苷酸同源性为79．2％-100％；其中与亚洲流行株阜阳株（EU703812）核苷酸的同源性最高（100％），其次是C4代表株及2004年深圳株（AY895144）为94．2％～97．1％。除了印度株和其中1株EV71的VP4编码的氨基酸在第54位（ACA）不同之外，其余7株EV71VP4编码的氨基酸序列之间以及与GenBank报道的其他序列同源性达100％。8株EV71VP4基因核苷酸与c4代表株相比有17处不同，除1处以外其余全在简并密码位点上；轻重症病例毒株之间VP4基因序列未见明显改变。进化树显示8株EV71均属于C4基因亚型。结论2009年深圳市流行的EV71属于C4基因亚型，流行的EV71VP4基因非常保守，不属于变异区段，绝大部分核苷酸的变异属无义突变，VP4基因编码的氨基酸变异几乎为0。
