鲁海富
- 作品数：21 被引量：50H指数：4
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金新疆维吾尔自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 绵羊ISG15重组蛋白及其编码基因和应用
- 本发明提供了绵羊ISG15的重组蛋白，应用该重组蛋白能在一定程度上治疗绵羊支原体肺炎，本发明还提供编码该重组蛋白的基因，其含有选自以下的核苷酸序列：1）SEQIDNo.1中所示核苷酸序列；或SEQIDNo.3中所示核苷酸...
- 孙延鸣沈文鲁海富姜方配杨文
- 文献传递
- 新疆细毛羊KAP6.1基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2013年
- 根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)6.1(登录号为AY483218.1)基因序列设计合成2个特异性引物,以新疆细毛羊为研究对象,从采集的皮肤组织中提取RNA进行RT-PCR反应,扩增出长度为320 bp的特异性片段,回收目的片段并连接至pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行分析。结果表明:试验成功克隆了新疆细毛羊KAP6.1基因,得到的长度为320 bp序列中包含252 bp的编码区序列。新疆细毛羊与绵羊亲缘关系最近,同源性为99.2%,与山羊同源性为94.8%,有13处核苷酸差异与人和兔的同源性分别为80.8%、75.1%。
- 沈文孙延鸣崔茹鹏鲁海富肖林晋石国庆
- 关键词：新疆细毛羊
- 绵羊ISG15基因的克隆表达与纯化被引量：3
- 2013年
- 为了克隆并表达绵羊ISG15,且对其表达产物进行纯化,首先从绵羊外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增出ISG15的基因;再通过基因克隆技术,构建ISG15在pET28a中的重组表达质粒pET28a-ISG15,在大肠杆菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达,得到ISG15的原核表达蛋白;最后采用Ni 2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白。结果显示:克隆的绵羊ISG15基因序列长度为541bp,编码157个氨基酸。重组表达产物通过SDS-PAGE可检测到相对分子质量为25ku的重组蛋白,且表达的目的蛋白能被Ni 2+-NTA亲和层析方法所纯化。该研究为后续深入研究绵羊ISG15奠定基础。
- 崔茹鹏沈文鲁海富孙延鸣
- 关键词：绵羊克隆
- 新疆野生盘羊ISG15基因的克隆表达被引量：1
- 2013年
- 本研究旨在克隆表达新疆野生盘羊ISG15基因,并对其表达产物的活性进行检测。首先,利用RT-PCR和RACE技术克隆盘羊ISG15基因的cDNA全长序列,再将ISG15基因克隆至真核表达载体pPIC9K,经电击转化至GS115中并用甲醇进行诱导表达,用Ni 2+螯合亲和层析法对表达的蛋白进行纯化,最后通过淋巴细胞转化试验来检测表达蛋白的活性。结果表明:克隆得到的新疆野生盘羊ISG15基因cDNA全长为642bp,开放阅读框为474bp,编码157个氨基酸。经酵母重组菌株GS115/pPIC9K-ISG15表达,SDS-PAGE结果显示表达的蛋白约为33ku,表达的蛋白可用Ni 2+螯合亲和层析方法纯化,淋巴细胞增殖试验结果显示,表达的ISG15蛋白能够显著地刺激淋巴细胞增殖(P<0.05),表明表达的蛋白具有生物学活性。
- 鲁海富沈文刘恺崔茹鹏杨文姜方配孙延鸣
- 关键词：野生盘羊ISG15克隆表达活性检测
- 杂交盘羊绵羊传染性胸膜肺炎支原体的诊断及防控被引量：4
- 2010年
- 绵羊肺炎支原体(MO)是引起绵羊传染性胸膜肺炎的病原体,本研究主要从常规细菌学方法及分子生物学方法等对石河子公园野生盘羊发生疑似传染性胸膜肺炎病例进行了病原学诊断,探究该病的病原特性,从而为该病防治措施提供参考依据。
- 李志远冷青文鲁海富
- 关键词：盘羊传染性胸膜肺炎
- 新疆野生盘羊干扰素刺激基因15基因序列的生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 以新疆野生盘羊干扰素刺激基因15(ISG15)基因为研究对象,运用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、信号肽、跨膜结构、亚细胞定位、二级结构以及高级结构进行生物信息学分析,并推测与其他物种的生物进化关系。结果显示:盘羊ISG15蛋白是一个疏水性蛋白,定位于细胞内;该蛋白含有5个α螺旋,7个β折叠,10个转角,有1个跨膜区,无信号肽。通过分子进化树研究发现盘羊的ISG15基因在绵羊、山羊、水牛、牛、猫、人、小鼠和野猪等物种中,与绵羊和山羊的亲缘关系最近。
- 鲁海富崔如鹏刘凯沈文孙延鸣
- 关键词：野生盘羊生物信息学
- ISG15蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用被引量：7
- 2013年
- 为研究重组绵羊ISG15蛋白(rISG15)对感染绵羊肺炎支原体后的盘羊杂交羊的免疫调节效果,本研究将18只盘羊杂交羊随机分为A、B、C 3个组,6只巴什拜羊为D组,全部人工感染绵羊肺炎支原体(CCU=106),感染5 d后A和D组肌肉每天注射生理盐水作为对照组;B和C组每天分别肌肉注射盘羊杂交羊和巴什拜羊的rISG15 200μg/只,并采用荧光定量PCR方法检测试验羊不同时间血液中ISG15、IL-12、IFN-γ的表达水平。结果显示,IFN-γ表达水平在感染第14 d,B组显著高于A、D组(p<0.05),第21 d,B、C组显著高于A、D组(p<0.05);ISG15的表达量在第14 d与21 d,B、C、D组的表达水平显著高于A组(p<0.05);而在此期间,A组的IL-12表达水平显著高于其它各组(p<0.05),但仅A组出现50%的死亡率。实验数据表明rISG15对易感的盘羊杂交羊具有一定的免疫调节效果,为绵羊支原体肺炎防治提供了实验依据。
- 姜方配沈文鲁海富杨文孙延鸣
- 关键词：ISG15肺炎支原体
- 2种检测阿勒泰羊Fec^B基因酶切产物方法的比较被引量：2
- 2014年
- 为了比较3%琼脂糖凝胶和12%非变性聚丙烯酰胺凝胶的溴化乙锭(EB)染色法检测阿勒泰羊FecB基因酶切产物的准确性,试验采用通用引物对阿勒泰羊的FecB基因序列进行PCR扩增,通过限制性内切酶AvaⅡ对扩增产物进行酶切消化,用EB染色的琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶检测相同条件下酶切的FecB基因产物,通过紫外凝胶成像仪(型号为Gel Doc 2000)进行比较,分析结果。结果表明:EB染色的12%非变性聚丙烯酰胺凝胶所得的酶切结果明显优于3%琼脂糖凝胶所得的酶切结果,因此可采用EB染色的12%非变性聚丙烯酰胺凝胶检测FecB基因。
- 郝耿杨会国鲁海富陈童艾布什於建国
- 关键词：琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶FECB基因阿勒泰羊
- 盘羊、巴什拜羊及其杂交羊类泛素ISG15基因的功能研究
- 盘羊(Ovis ammon)属于国家二级保护动物,具有较强的抗病力,而其杂交后代羊表现出抗病力弱,推测杂交羊抗病力弱可能与某些抗病基因变异相关。类泛素基因ISG15是疾病相关抗性基因的一种,在机体先天性免疫方面发挥着重要...
- 鲁海富
- 关键词：盘羊巴什拜羊杂交羊
- 文献传递
- 盘羊肺炎支原体感染PCR检测方法的建立与初步应用被引量：7
- 2011年
- 羊支原体性肺炎,是由支原体引起的一类高度接触性传染病,又称羊传染性胸膜肺炎（Infections pleuropneumonia of sheep and goats）,临床症状主要表现为高热、咳嗽、消瘦、
- 冷青文李志远屈勇刚鲁海富金云云王静梅剡根强
- 关键词：盘羊PCR绵羊肺炎支原体
