陈军
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 发文基金：浙江省医药卫生平台重点资助计划浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省医学科学院青年基金更多>>
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- 微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度被引量：1
- 2004年
- [目的]建立一种简便、灵敏的微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗感染性滴度。[方法]取适宜稀释度病毒接种细胞已成致密单层的96孔培养板,至增殖高峰时直接在板上固定细胞/病毒系统,用间接免疫荧光法观察结果,以Reed-Muench公式计算CCID50。[结果]随着培养时间的延长,感染性滴度逐渐增高,18d可达增长高峰,比常规组织培养ELISA法提前1周左右;此法的重复性良好,灵敏度与常规组织培养法相似(P>0.05);可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。[结论]此法具有简便、灵敏、省时的优点,可代替常规组织培养ELISA法应用于甲肝减毒活疫苗感染性滴度检测中。
- 钱汶毛子安陈悦青姜立民陈军朱莲
- 关键词：甲肝减毒活疫苗微量免疫荧光法病毒滴度ELISA法组织培养法
- 22批甲肝减毒活疫苗（H2减毒株）人体接种观察被引量：1
- 1998年
- １９９３年至１９９７年，采用本院批量生产的２２批甲肝减毒活疫苗对２３４名ＡＬＴ值正常，抗ＨＡＶ阴性的７￣８岁儿童进行了人体接种。经观察全部疫苗对人体均未产生局部和全身不良反应，抗体阳转率在８８％￣１００％，平均９６％。此结果进一步表明批量生产的疫苗质量稳定，安全且免疫效果良好。
- 钱汶陈军
- 关键词：甲肝减毒活疫苗安全性免疫原性
- 胎牛血清细菌内毒素检测方法创建被引量：3
- 2020年
- 目的建立胎牛血清中细菌内毒素鲎试剂检测方法。方法首先,对2个厂家的3批鲎试剂进行灵敏度复核;其次,对供试品进行干扰初筛试验,并采用鲎试剂凝胶法对2个厂家生产的鲎试剂与同一厂家生产的3个批号的胎牛血清分别进行正式干扰试验;最后,建立胎牛血清细菌内毒素分析方法。结果首先,2个厂家的3批鲎试剂灵敏度测定值均符合规定;其次,样品稀释至333倍时,可用作正式干扰试验,并且在胎牛血清最大有效稀释倍数为333倍时,对鲎试剂无干扰,正式干扰试验符合规定;最后,用2个厂家灵敏度为0. 03 EU/ml的鲎试剂对3批同一厂家生产的胎牛血清进行了细菌内毒素检测,限值均符合规定。结论用鲎试剂检查胎牛血清细菌内毒素方法可行。
- 朱莲陈军陈卓
- 关键词：胎牛血清细菌内毒素鲎试剂
- 柯萨奇病毒A16型YY157株在Vero细胞中培养与增殖特性的研究被引量：5
- 2014年
- 目的 探索柯萨奇病毒A16型（CVA16） YY157株在非洲绿猴肾（Vero）细胞中培养与增殖的合适条件.方法 把CVA16 YY157株接种于Vero细胞适应性传代,挑斑纯化后,在不同条件下培养并比较其对病毒滴度的影响.结果 CVA16 YY157株在Vero细胞中培养能导致细胞病变（CPE）,可形成蚀斑.将此CVA16病毒以0.01 ～0.1MOI接种于Vero细胞,并在低于2％牛血清浓度的培养基,35℃培养60 h,CPE可达90％以上;此条件下收获培养液上清,可得到较高滴度的病毒.结论 初步建立了CVA16 YY157株在Vero细胞中培养与增殖的方法,为其下一步的大规模培养及疫苗制备奠定了基础.
- 张锋朱莲陈军高孟唐彩华周康凤高丽美罗永能
- 关键词：病毒培养
- 冻干甲型肝炎减毒活疫苗成品检定方法的优化
- 2006年
- 目的对冻干甲肝减毒活疫苗成品检定中关键性项目的检定方法进行优化。方法(1)感染性滴度检测:建立微量免疫荧光法,并与常规组织培养ELISA法比较;(2)牛血清白蛋白残留量检测:比较反向间接血凝法、酶联免疫法的重复性、精确性;(3)水分含量测定:建立助溶剂加入法,并比较助溶剂加入前后冻干疫苗水分含量检测结果。结果(1)微量免疫荧光法灵敏度与常规组织培养ELISA法相仿(P>0.05),重复性佳,可提前1周左右出结果;可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。(2)反向间接血凝法测定结果不稳定,2批疫苗5次测定结果的变异系数(CV)为39.12%,34.23%;酶联免疫法的重复性,精确性均较佳(CV)为2.12%,2.82%,回收率为101.73%。(3)助溶剂加入前后2批疫苗5次测定结果的CV分别由8.32%,9.03%降为1.85%,1.82%。结论微量免疫荧光法有望代替常规组织培养ELISA法用于疫苗滴度检测;牛血清白蛋白残留量测定中酶联免疫法优于反向间接血凝法;加入助溶剂有利于提高疫苗水分含量检测的重复性。
- 钱汶陈军金巧军张轶侠陈悦青夏华良庄昉成邵健忠
- 关键词：感染性滴度水分含量
- 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法
- 一种冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法,其疫苗包含有明胶、乳糖、硫酸镁、氯化镁组成的甲型肝炎冷冻干燥保护剂和MEM氨基酸基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液溶液,将甲肝病毒液按一定比例加入到上述含有甲型肝炎病毒冷冻干燥...
- 柴少爱陈念良毛江森高丽美钱汶黄海鹰张峰陈卓忻亚娟毛子安黄伟新王平陈军袁建国庄昉成
- 文献传递
- 柯萨奇病毒YY157株在不同细胞系中的增殖特性被引量：1
- 2015年
- 目的了解柯萨奇病毒A16型（CoxA16）YY157株在多种细胞系中培养的增殖特性，为疫苗研制提供参考。方法把YY157株接种于非洲猴肾细胞（Vero）、人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5或KMBl7进行适应性传代培养，观察细胞病变情况，检测病毒感染性滴度，绘制增殖曲线。结果CoxA16YY157株在3种细胞中培养均产生细胞病变，在Vero细胞中病变早，增殖快，滴度达8．5lgCCIDs/mL；在MRC-5细胞中，此毒株增殖速度比在Vero细胞中慢，滴度达7．5lgCCID50/mL；在KMB17细胞中，此毒株增殖最慢，滴度只有7．0lgCCID如L。结论CoxA16型YY157株均可感染Vero、MRC-5和KMB17细胞并增殖，但敏感性和增殖速度有差异。
- 陈军朱莲张锋袁建国倪红霞高丽美罗永能
- 关键词：细胞培养技术柯萨奇病毒A16型细胞病变
- 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核衣壳蛋白优势线性B细胞抗原决定簇的预测与确定被引量：5
- 2016年
- 为了确定发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)核衣壳蛋白(N蛋白)的优势线性B细胞抗原决定簇位点,本文根据线性B细胞抗原表位拥有较强的抗原性、亲水性以及表面性等特点,运用生物信息学软件分析SFTSV N蛋白的氨基酸序列,预测潜在的线性B细胞抗原决定簇位点。根据已解析的SFTSV N蛋白晶体结构,使用PyMOL软件分析预测出的线性B细胞抗原决定簇位点的柔性及其在整个SFTSV N蛋白中的分布情况。人工合成相应多肽片段并以其为抗原,与SFTSV临床感染者的血清反应,采用多肽-酶联免疫吸附检测法检验多肽片段的免疫原性。结果共预测出六个可能的线性B细胞抗原决定簇位点,即A(40-KKLKETGGDDWVKDTK-55)、B(71-ASGKMSNSGSKRL-83)、C(94-ERAETRL-100)、D(135-LKVENYPP-142)、E(157-GVSEATT-163)和F(184-KMRGASKTEVYNSFRDP-200),均位于N蛋白表面且含有柔性较大的loop区。相应的六段人工合成多肽都与SFTSV临床病例血清呈阳性反应,确定它们均为优势线性B细胞抗原决定簇位点,其各自检测结果与商品化N蛋白抗体检测试剂盒相应检测结果进行线性回归分析表明呈正相关。综合运用上述多种方法,本研究成功地预测并确定了SFTSV N蛋白的线性B细胞抗原决定簇位点,为该病毒抗原特异性的分子基础研究以及相关疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 陈军孙培蓓张锋顾春燕高孟倪红霞罗永能
- 对恒河猴作为鉴定甲肝减毒活疫苗的动物模型评估被引量：3
- 1998年
- 1995～1997年期间,采用10批甲肝减毒活疫苗(H_2株)对50只恒河猴进行甲肝减毒活疫苗接种观察,接种后8周内检测ALT、抗-HAV抗体及肝穿病理检查,其结果表明恒河猴可作为鉴定甲肝减毒活疫苗的较好动物模型。
- 钱汶陈军柴曼君
- 关键词：减毒活疫苗甲型肝炎恒河猴动物模型
