朱莲
- 作品数：11 被引量：26H指数：4
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- 肠道病毒71型灭活疫苗滴度的酶联免疫吸附检测方法被引量：5
- 2011年
- 目的 建立肠道病毒71型（EV71）灭活疫苗滴度的检测方法,用于疫苗研制及生产过程中抗原含量的测定.方法 以兔抗EV71多克隆抗体为包被抗体,小鼠抗EV71单克隆抗体为检测抗体,以夹心ELISA方法测量我们制备的EV71疫苗抗原参照品,建立抗原标准曲线,确定定量限度及最佳定量范围,同时验证该方法的特异性和可重复性.结果 建立了检测EV71抗原含量的夹心ELISA方法,定量限度为3.9352log10TCID50/mL,最佳定量范围为3.9352～5.9686 log10TCID50/mL,相关系数为R2=0.9956;特异性好,除与EV71疫苗样品有反应外,与其他样品无交叉反应;稳定性和重复性好,变异系数小于7%.结论 本研究建立的检测EV71灭活疫苗滴度的夹心ELISA方法灵敏、特异,为疫苗研制过程中抗原含量测定提供了快捷有效的检测手段.
- 高孟周康凤罗永能姜云水唐彩华陈柯达高丽美朱莲毛子旭毛江森
- 关键词：酶联免疫吸附测定肠道病毒71型灭活疫苗
- 微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度被引量：1
- 2004年
- [目的]建立一种简便、灵敏的微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗感染性滴度。[方法]取适宜稀释度病毒接种细胞已成致密单层的96孔培养板,至增殖高峰时直接在板上固定细胞/病毒系统,用间接免疫荧光法观察结果,以Reed-Muench公式计算CCID50。[结果]随着培养时间的延长,感染性滴度逐渐增高,18d可达增长高峰,比常规组织培养ELISA法提前1周左右;此法的重复性良好,灵敏度与常规组织培养法相似(P>0.05);可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。[结论]此法具有简便、灵敏、省时的优点,可代替常规组织培养ELISA法应用于甲肝减毒活疫苗感染性滴度检测中。
- 钱汶毛子安陈悦青姜立民陈军朱莲
- 关键词：甲肝减毒活疫苗微量免疫荧光法病毒滴度ELISA法组织培养法
- 胎牛血清细菌内毒素检测方法创建被引量：4
- 2020年
- 目的建立胎牛血清中细菌内毒素鲎试剂检测方法。方法首先,对2个厂家的3批鲎试剂进行灵敏度复核;其次,对供试品进行干扰初筛试验,并采用鲎试剂凝胶法对2个厂家生产的鲎试剂与同一厂家生产的3个批号的胎牛血清分别进行正式干扰试验;最后,建立胎牛血清细菌内毒素分析方法。结果首先,2个厂家的3批鲎试剂灵敏度测定值均符合规定;其次,样品稀释至333倍时,可用作正式干扰试验,并且在胎牛血清最大有效稀释倍数为333倍时,对鲎试剂无干扰,正式干扰试验符合规定;最后,用2个厂家灵敏度为0. 03 EU/ml的鲎试剂对3批同一厂家生产的胎牛血清进行了细菌内毒素检测,限值均符合规定。结论用鲎试剂检查胎牛血清细菌内毒素方法可行。
- 朱莲陈军陈卓
- 关键词：胎牛血清细菌内毒素鲎试剂
- Vero细胞肠道病毒71型灭活疫苗的纯化及鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的建立Vero细胞肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的纯化工艺。方法病毒收获液经离心澄清、福尔马林灭活和超滤浓缩后,采用Sephacryl S-400 HR凝胶过滤层析和Source 30Q离子交换层析2步层析法纯化EV71,进行各项检定及分析后除菌过滤。结果经纯化的疫苗各项纯化指标均符合中国药典2010年版的要求,杂蛋白去除率>99.9%;病毒纯化液在电镜下观察到典型的EV71病毒颗粒,经SDS-PAGE及Western blot分析,检测到与文献报道大小相符的EV71 VP1、VP2、VP3及特异性免疫反应;制备成疫苗后免疫大鼠能产生特异性中和抗体。结论本实验建立了Vero细胞的EV71灭活疫苗的纯化工艺,纯化后制备的EV71灭活疫苗具有较好的免疫原性。
- 姜云水高孟周康凤陈科达高丽美唐彩华朱莲毛江森
- 关键词：VERO细胞纯化
- 柯萨奇病毒A16型衣壳蛋白VP1～VP3的B淋巴细胞线性抗原表位预测与确定被引量：7
- 2015年
- 目的 确定柯萨奇病毒A16型（CVA16）YY157株衣壳蛋白VP1～VP3的优势B淋巴细胞线性抗原表位。方法用生物信息学软件Lasergene分析CVA16YY157株衣壳蛋白VP1-VP3氨基酸序列的亲水性、抗原性和表面可及性，预测出包含潜在B淋巴细胞线性抗原表位的区段，并用BepiPred1．0Server进行评估。人工合成相应的多肽片段，用多肽-酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其与明确感染CVA16的患儿血清的阳性反应与否和程度，并以健康人血清作比较。结果根据抗原性强、亲水性强和表面性好的要求，共预测出21个可能的B淋巴细胞线性抗原表位。相应的人工合成多肽与感染CVA16的患儿血清均呈现阳性反应，但程度不同。结论成功预测并用实验证实了CVA16YY157株衣壳蛋白VP1～VP3的优势线性B淋巴细胞线性抗原表位。
- 高孟倪红霞朱莲李剑波高丽美罗永能
- 关键词：柯萨奇病毒感染酶联免疫吸附测定
- 甲醛和β-丙内酯灭活柯萨奇病毒A组16型效果比较被引量：2
- 2015年
- 柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）是人手足口病的主要病原体，尽管多数病毒引起的临床症状较轻，但最近一些研究表明CoxA16也像EV71一样能引发严重的疾病，
- 朱莲朱赟高丽美倪红霞姜云水唐彩华周康凤
- 关键词：甲醛柯萨奇病毒A组16型灭活
- 柯萨奇病毒A16型YY157株在Vero细胞中培养与增殖特性的研究被引量：5
- 2014年
- 目的 探索柯萨奇病毒A16型（CVA16） YY157株在非洲绿猴肾（Vero）细胞中培养与增殖的合适条件.方法 把CVA16 YY157株接种于Vero细胞适应性传代,挑斑纯化后,在不同条件下培养并比较其对病毒滴度的影响.结果 CVA16 YY157株在Vero细胞中培养能导致细胞病变（CPE）,可形成蚀斑.将此CVA16病毒以0.01 ～0.1MOI接种于Vero细胞,并在低于2％牛血清浓度的培养基,35℃培养60 h,CPE可达90％以上;此条件下收获培养液上清,可得到较高滴度的病毒.结论 初步建立了CVA16 YY157株在Vero细胞中培养与增殖的方法,为其下一步的大规模培养及疫苗制备奠定了基础.
- 张锋朱莲陈军高孟唐彩华周康凤高丽美罗永能
- 关键词：病毒培养
- 不同进箱温度对冻干甲肝疫苗的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:评价冻干进箱板层温度-20℃与5℃对冻干甲肝减毒活疫苗的CCID50、外观的影响。方法:选择同一批号,采用两种不同进箱温度,其余冻干工艺均相同的的冻干甲肝疫苗,分别比较CCID50、外观、废品率。结果:两种进箱温度的冻干甲肝疫苗的感染性滴度CCID50没有明显差异,5℃进箱外观要好于-20℃进箱,5℃进箱废品率更低。结论:5℃进箱冻干甲肝疫苗外观更饱满,废品率更低,利于大规模生产。
- 黄卫新朱莲吴海光蒋秀梅张锋沈立军陈念良
- 肠道病毒71疫苗候选株H3-TY的遗传稳定性研究被引量：2
- 2011年
- 目的了解肠道病毒71（E、，71）疫苗候选株H3-TY的遗传稳定性。方法选取EV71疫苗候选株H3-TY种子库中的6个子代病毒，提取RNA，对其VPl基因进行RT-PCR扩增、克隆、序列测定，然后对所获基因序列进行同源性分析并计算同源率。结果H3．TY的6个子代病毒VPl基因之间核苷酸同源性介于99．6％～99．8％，氨基酸同源性为100．0％，主要抗原决定簇的氨基酸序列完全一致。结论H3．rIIY种子库中6代病毒的VP1基因之间高度同源，主要抗原决定簇稳定遗传。
- 唐彩华周康凤高丽美朱莲毛子旭毛江森
- 关键词：疫苗
- 中性硼硅西林瓶在甲型肝炎疫苗生产中的应用被引量：2
- 2013年
- 目前，国内已普遍采用西林瓶替代安瓿瓶分装冻干粉针剂。西林瓶直接接触制品，其质量与疫苗质量直接相关。该生产工艺的优点是灌装过程可以实现机械化半加塞，冻干结束后在冻干箱内自动加塞，然后出箱轧盖，解决了安瓿瓶的玻屑和在运输过程易碎的缺陷，这种工艺对保证制品质量十分有益。
- 黄卫新朱莲陈卓张锋沈立军顾春燕陈念良
