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唐彩华: 作品数：31 被引量：64H指数：5; 供职机构：浙江省医学科学院更多>>; 发文基金：浙江省重大科技专项资金浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省“钱江人才计划”更多>>; 相关领域：医药卫生理学更多>>

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病毒颗粒中氢氘置换的证实被引量：1: 2004年; 已知重水(D2O)能增加某些病毒的热稳定性,但其机理不清.用基质辅助气体同位素质谱法,研究了日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)和甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)用D2O处理后,测定病毒及其RNA结构中的氘氢比值(D/H),以δDSMOW表示.结果说明,与正常病毒相比,上述D2O处理后的病毒样品中国δDSMOW值明显升高,其升高值与病毒样品的加入量呈良好的线性关系.实验还指出,D2O处理后的病毒国δDSMOW值的升高与其热稳定性的升高是相关联的.实验结果证明,D2O处理导致病毒及其RNA结构中发生氢氘置换,氢氘置换可导致病毒生物学性状(热稳定性增加)的表型改变.; 毛江森刘子阳唐彩华贺义惠朱家鸿王成玉柴少爱陈悦青钱汶; 关键词：病毒颗粒重水热稳定性 RNA

H2株冻干甲肝减毒活疫苗接种后血中T淋巴细胞亚群的变化: 2005年; 目的对接种H2株冻干甲肝减毒活疫苗后机体血中T淋巴细胞亚群的变化进行动态观察。方法按一针接种程序，给每人接种1瓶冻干甲肝减毒活疫苗(H2株)，接种前及接种后1、2、3．4、6、8周、3个月采取静脉血，用流式细胞仪检测全血T淋巴细胞亚群CD3^+、CD4^+,CD8^+细胞的含量，并比较CD4^+／CD8^+比值的变化。结果CD3^+细胞在接种后1-3周、CD4^+细胞在接种后1-2周呈现明显升高，分别与接种前作自身对照比较的t检验，差别有显著性意义(P<0．05)。结论H2株冻干甲肝减毒活疫苗有良好的T细胞刺激能力．; 忻亚娟庄昉成钱汶唐彩华陈悦青柴少爱; 关键词：接种后 H2株 CD4^+/CD8^+比值 CD8^+细胞 CD3^+细胞 CD4^+细胞

柯萨奇病毒A16型YY157株在Vero细胞中培养与增殖特性的研究被引量：5: 2014年; 目的探索柯萨奇病毒A16型（CVA16） YY157株在非洲绿猴肾（Vero）细胞中培养与增殖的合适条件.方法把CVA16 YY157株接种于Vero细胞适应性传代,挑斑纯化后,在不同条件下培养并比较其对病毒滴度的影响.结果 CVA16 YY157株在Vero细胞中培养能导致细胞病变（CPE）,可形成蚀斑.将此CVA16病毒以0.01 ～0.1MOI接种于Vero细胞,并在低于2％牛血清浓度的培养基,35℃培养60 h,CPE可达90％以上;此条件下收获培养液上清,可得到较高滴度的病毒.结论初步建立了CVA16 YY157株在Vero细胞中培养与增殖的方法,为其下一步的大规模培养及疫苗制备奠定了基础.; 张锋朱莲陈军高孟唐彩华周康凤高丽美罗永能; 关键词：病毒培养

冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H_2株)诱导的人体特异性细胞免疫应答被引量：2: 2008年; 目的了解接种冻干甲型肝炎（甲肝）减毒活疫苗[Hepatitis A（Live）Vaccine，Freezedried；Hep A]后，机体能否产生特异性细胞免疫应答。方法研究对象经HepA（H2株）1剂次免疫，流式法检测淋巴细胞亚群CD2^＋、CD4^＋、CD8^＋的百分率及表达干扰素（IFN）-γ及白细胞介素（IL）-4的阳性细胞百分率；T淋巴细胞的特异性增殖试验（MTT法）检测T淋巴细胞增殖反应；酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测淋巴细胞的IFNγ分泌能力。结果接种后2周，CD^＋上升，以4周上升为显著，与接种前相比，差异有显著的统计学意义（t=2．571，P〈0．05）；接种后4周～3个月，淋巴细胞对特异性刺激物甲肝病毒的反应都有明显增强，与接种前相比，差异均有非常显著的统计学意义（t=3．215～3．959，P均〈0．01）；接种后2周，表达IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分率上升，以IL-4为明显，与接种前相比，差异有显著的统计学意义（t=2．197，P〈0．05）；接种后3年，用ELISPOT法检测IFN-γ，阳性率为57．1％（8／14）。结论接种HepA（H2株）后，机体能有效地产生特异性细朐免疫席答。; 忻亚娟贺义惠庄昉成高丽美钱汶唐彩华陈悦青柴少爱毛江森; 关键词：细胞免疫

微载体技术高密度培养MRC-5细胞初探被引量：2: 2014年; 目的通过探索MRC-5细胞的微载体培养条件,以期建立MRC-5细胞的高密度培养方法.方法用3种不同培养基（MEM、M199、DMEM）分别培养3.0×104/mL的MRC-5细胞,观察它们的细胞增殖及传代能力；在Spinner培养系统中,用1.0 g/L Cytopore 2和3.0 g/L Cytodex 3分别培养密度为3.70× 105/mL和2.98×105/mL的MRC-5细胞,观察两种载体对细胞生长代谢和细胞密度的影响,筛选出最适宜的培养基及微载体.使用5 L CelliGen310生物反应器对筛选获得的培养基及微载体进行MRC-5细胞的灌流培养初步摸索.结果 MRC-5细胞在MEM、M199、DMEM培养基中培养96 h细胞分别增殖了7.0、4.4和3.0倍；在MEM培养基中连续传代至5次以上,细胞增殖稳定,1：3传代72 h形成致密单层,而在M199和DMEM培养基中连续传代均未能获得理想的细胞形态.经96～120 h的培养后,使用1.0 g/L Cytopore 2培养的MRC-5细胞密度达到2.20× 106/mL高于使用3.0 g/L Cytodex 3的1.12×106/mL,且前者葡萄糖和乳酸代谢较后者更为活跃.首选MEM和Cytopore 2作为MRC-5细胞的灌流培养体系.在5L生物反应器中以1.0 g/L Cytopore 2和2.5LMEM培养基培养MRC-5细胞至144h,细胞密度达到1.54×106/mL.结论初步建立的MEM Cytopore 2微载体细胞培养方法能够获得高密度、活性良好的MRC-5传代细胞.; 姜云水李剑波顾春燕陈科达唐彩华包佳源毛岱敏张峰庄昉成王平; 关键词：细胞培养技术微载体

基质稀释同位素质谱法测定微量富氘生物样品δD值: 2012年; 目的建立一种分析检测方法——基质稀释同位素质谱法，并测定微量富氘生物样品的6I）值。方法通过优化实验条件，如基质的选取、氧化燃烧的温度及时间、样品和氧化剂吸附水的脱除及氧化剂的用量等，建立基质稀释同位素质谱法，并用该法测定基质牛血清白蛋白（BSA）及两组微量富氘生物样品（A和B）的δDVSMOW值。结果本研究成功地构建了基质稀释同位素质谱法，最终选取BSA为基质，用量为5mg；氧化剂用量为CuO（500nag），V2O5（50mg）；100℃条件下脱吸附水20min；燃烧氧化温度为850℃，反应时间为30min。基质稀释同位素质谱法成功地测定了基质BSA及用A、B两种富氘生物样品制备的系列样本的δDVSMOW值。δDVSMOW值变化随生物样品A和B的加入量呈现良好的线性关系（R2〉0．99），两条直线的截距分别为-75和-74，与基质BSA的测定结果相吻合。结论基质稀释同位素质谱法能够用于测定微量富氘生物样品的δDVSMOW值。; 贺义惠唐彩华陈悦青陈卓金巧军张科技毛江森; 关键词：质谱分析法氢同位素

Vero细胞肠道病毒71型灭活疫苗的纯化及鉴定被引量：2: 2015年; 目的建立Vero细胞肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的纯化工艺。方法病毒收获液经离心澄清、福尔马林灭活和超滤浓缩后,采用Sephacryl S-400 HR凝胶过滤层析和Source 30Q离子交换层析2步层析法纯化EV71,进行各项检定及分析后除菌过滤。结果经纯化的疫苗各项纯化指标均符合中国药典2010年版的要求,杂蛋白去除率>99.9%;病毒纯化液在电镜下观察到典型的EV71病毒颗粒,经SDS-PAGE及Western blot分析,检测到与文献报道大小相符的EV71 VP1、VP2、VP3及特异性免疫反应;制备成疫苗后免疫大鼠能产生特异性中和抗体。结论本实验建立了Vero细胞的EV71灭活疫苗的纯化工艺,纯化后制备的EV71灭活疫苗具有较好的免疫原性。; 姜云水高孟周康凤陈科达高丽美唐彩华朱莲毛江森; 关键词：VERO细胞纯化

肠道病毒71型H3-TY株衣壳蛋白VP1~VP3的优势线性B细胞抗原决定簇预测与确定被引量：6: 2014年; 目的确定肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）H3-TY株衣壳蛋白VP1-VP3的优势线性B细胞抗原决定簇位点。方法用生物信息学软件DNAStar中的Protean程序分析EV71 H3-TY株衣壳蛋白VP1-VP3氨基酸序列的亲水性、抗原性和表面可能性,预测出包含潜在线性B细胞抗原决定簇位点的区段,并计算各区段上述指数的加权平均值。人工合成相应的多肽片段,用多肽-酶联免疫吸附检测（多肽-ELISA）检测其与明确感染EV71的临床病患儿童血清的阳性反应与否和程度。结果根据抗原性强、亲水性强和表面性好的要求,共预测出15个可能的线性B细胞抗原决定簇位点。相应的人工合成多肽与感染EV71的临床病患儿童血清均呈现为阳性反应但程度不同,其中免疫显性最高的肽段为包含VP1氨基酸残基208-222位的VP1D。结论成功预测并用实验证实了EV71 H3-TY株衣壳蛋白VP1-VP3的优势线性B细胞抗原决定簇位点,有助于揭示EV71衣壳蛋白抗原特异性的分子基础。; 高丽美高孟王静华唐彩华罗永能; 关键词：肠道病毒71型

生物样品结构氢氘置换的证实及氘百分含量的测定方法: 本发明是一种氢同位素分析方法，特别是用于生物样品结构氢氘置换及氘百分含量的一种测定方法。它选取一种基质，将制备得到的生物样品与适量的基质均匀混合再冻干，冻干混合样品被氧化剂充分燃烧氧化，混合样品中的氢被氧化为水，生成的水...; 毛江森刘子阳唐彩华贺义惠朱家鸿陈悦青毛子旭柴少爱; 文献传递

甲醛和β-丙内酯灭活柯萨奇病毒A组16型效果比较被引量：2: 2015年; 柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）是人手足口病的主要病原体，尽管多数病毒引起的临床症状较轻，但最近一些研究表明CoxA16也像EV71一样能引发严重的疾病，; 朱莲朱赟高丽美倪红霞姜云水唐彩华周康凤; 关键词：甲醛柯萨奇病毒A组16型灭活

唐彩华

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