肖易凡
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:南京工业大学食品与轻工学院更多>>
- 发文基金:江苏省高校自然科学研究项目国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 介孔二氧化钛固载γ-谷氨酰转肽酶的制备及性质被引量:8
- 2011年
- γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在临床诊断和生物催化方面具有重要的应用价值。本文以介孔氧化钛晶须为载体进行GGT的固定化,考察了载体结构特性、吸附时间和给酶量对固定化效果的影响,并对固定化酶的催化特性及其稳定性进行了研究。结果显示,以最可几孔径为30nm的介孔TiO2为载体,载体载酶量可达5.07mg·g-1。在给酶量为18.99 U·g-1时,经室温吸附2.5h,固定化酶活性回收率可达73.05%。固定化酶的pH稳定性和热稳定性均显著优于游离酶,在4℃下保温贮藏60d、转化22个批次后,固定化酶活力仍可保持初始值的71.30%。经测定,游离酶和固定化酶的米氏常数Km分别为0.79mmol·L-1和1.05mmol.L-1,酰基化反应活化能分别为13.59 kJ·mol-1和15.42 kJ·mol-1;固定化GGT的失活反应活化能Ed为92.80 kJ·mol-1,相比于游离酶(49.61 kJ·mol-1)有明显的增加。
- 秦丹华姚忠王浩琦肖易凡杨敬徐虹韦萍
- 关键词:Γ-谷氨酰转肽酶固定化介孔二氧化钛酶学性质
- 有序介孔TiO_2固载γ-谷氨酰转肽酶催化合成S-bzl-γ-Glutamyl-L-Cysteine被引量:2
- 2010年
- 以有序介孔TiO2(OM-TiO2)为载体对B.subtilis NX-2GGT进行吸附固载.圆二色光谱分析和活性位点滴定结果表明,固定化前后酶的二级结构和活性位点数变化很小,固定化后GGT对供体的亲和力及转肽反应催化常数均有不同程度下降,但固定化酶对产物的亲和力有明显提高.固定化后GGT的热稳定性和pH稳定性均较游离酶有显著提高,固定化酶稳定性良好,经10批次转化后,固定化催化活性仍保持74%.以固定化GGT为催化剂,在L-谷氨酰胺(L-Gln)5mmol/L、S-苄基-半胱氨酸(S-bzl-cys)15mmol/L、酶浓度0.062U/mL和pH9.0条件下,40℃水浴反应5h,产物浓度为1.2mmol/L.
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- 关键词:酶法合成
- 介孔氧化钛晶须固载γ--谷氨酰转肽酶催化合成γ--L--谷氨酰--L--半胱氨酸
- 肖易凡