熊涛
- 作品数：24 被引量：51H指数：5
- 供职机构：泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：四川省杰出青年学科带头人基金四川省应用基础研究计划项目四川省中医管理局重点科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Na^+/H^+交换器-1在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨Na+/H+交换器-1(NHE1)在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤中的作用。方法以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞。首先将实验分为2组:对照组和窒息组,通过免疫组织化学方法检测其HK-2细胞在损伤前后胞内NHE1的表达;再分为3组:对照组、窒息组和5-N-乙基-N-异丙基-阿米洛利(EIPA)干预组(每组8个复孔)。倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HK-2细胞活力,生物化学法检测细胞培养液中LDH漏出率变化。结果与对照组比较,窒息组细胞内和细胞膜上NHE1表达明显增加;与对照组比较,窒息组细胞形态发生改变;窒息组细胞的活细胞数量较对照组明显降低;LDH漏出率明显升高,差异具有显著性意义(Pa=0);与窒息组细胞比较,EIPA干预组细胞形态明显得到改善,活细胞数量明显增加,LDH漏出率降低,差异具有显著性意义(Pa=0)。结论新生儿窒息后血清诱导HK-2细胞NHE1的表达增强可能是导致HK-2损伤的重要机制之一,通过抑制NHE1活性可使细胞损伤减轻,活性增强。
- 陈亮董文斌李清平邓存良陈枫雷小平熊涛
- 关键词：窒息血清肾小管上皮细胞肾损伤
- Omi／HtrA2在窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的研究Omi／HtrA2在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）凋亡时的作用机制。方法以HK-2细胞为研究对象，实验分为空白对照组、窒息组、Ucf-101（Omi／HtrA2的特异性阻断剂）干预组。以体积分数为20％的窒息后24h血清作为攻击血清，以终浓度为10μmol／L的Ucf-101对窒息组进行干预。用激光共聚焦显微镜观测Omi／HtrA2在胞内的转位状况，采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果窒息血清攻击后，Omi／HtrA2由线粒体转位到胞质中，阳性转位细胞率较空白对照组明显增加[（28．1±3．6）％比（9．4±2．1）％，P〈0．01]。与空白对照组比较，窒息组细胞凋亡率明显增加（（36．3±4．4）％比（12．4±2．9）％，P〈0．01]。与窒息组比较，干预组细胞凋亡率明显减少[（27．0±3．9）%比（36．3±4．4）％，P〈0．01]。结论窒息后新生儿血清诱导HK-2细胞凋亡，Omi／HtrA2由线粒体转位到线粒体外，在其胞内凋亡信号转导过程中占有重要作用。
- 张勇董文斌李清平邓存良熊涛雷小平郭琳
- 关键词：窒息血清OMI/HTRA2转位
- 低危SBI发热新生儿快速筛查指标的初步研究
- 2009年
- 目的探索一种简单、有效的对新生儿非严重细菌感染(serious bacterial infection,SBI)性发热性疾病的早期鉴别方法,为减少抗生素使用提供有效依据。方法选取2006年1月到2007年6月入住我科的发热新生儿为研究对象。病人情况完全符合预先确定的指标体系者视为SBI低危组,其他则归为SBI高危组,比较两组SBI发病率和两组病例入院后发热持续时间并推断该指标体系对SBI的阴性预测值(negative predictive value,NPV)。结果在153例发热新生儿中,SBI低危组共58例,仅2(3.45%)例最终被确诊为SBI;相对于SBI高危组95例中有51(53.68%)例确诊为SBI,其差异有统计学意义(P<0.001)。该指标体系对SBI的阴性预测值为96.55%(其95%可信区间为91.86%-100%)。结论该指标体系可简单、快速、可靠排除发热新生儿为SBI,具有一定临床指导意义。
- 雷小平董文斌李清平翟雪松熊涛
- 关键词：新生儿发热严重细菌感染阴性预测值
- 促红细胞生成素对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞损伤信号传导的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的信号传导机制的影响。方法选择足月重度窒息新生儿50例。男28例,女22例;均未使用免疫抑制剂,无明显感染性疾病,且取得家属知情同意。在窒息后1 d抽取其外周静脉血5 mL,2 500 r/min离心10 min分离血清,56℃水浴30 min灭活补体,微孔滤器过滤除菌,采用DMEM/F12培养液配制成200 mL/L的攻击浓度。以HK-2作为攻击对象。攻击前分为空白对照组和EPO预处理组(5×104IU/LEPO的培养基预处理24 h),在攻击后15 min、1 h、2 h分为相应时点的攻击组和EPO预处理后攻击组。通过激光共聚焦显微镜观察间接免疫荧光染色后核因子-κB(NF-κB)核转位。Western blot法检测NF-κB抑制亚基I-κBα水平的变化,将Western blot结果扫描进入计算机,应用Image-Pro Plus图像分析软件对条带进行分析,以条带积分吸光度值代表蛋白表达量。结果攻击前,与空白对照组比较,EPO预处理组NF-κB核转位显著增加,I-κBα显著减少(Pa<0.05);攻击后,各组与空白对照组比较,NF-κB核转位显著增加,I-κBα显著减少(Pa<0.05),以攻击后1 h最明显;各时点EPO预处理后攻击组与血清攻击组比较,NF-κB核转位显著减少,I-κBα显著增加(P<0.05)。结论EPO预处理通过预激活NF-κB而抑制窒息血清,导致后续NF-κB进一步激活。
- 熊涛董文斌王明勇邓存良
- 关键词：促红细胞生成素肾小管上皮细胞
- 促红细胞生成素及黄芪注射液对窒息后血清诱导hk-2细胞损伤的保护作用及机制研究
- 目的：研究促红细胞生成素(erythropoietin，epo)对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(hk-2)损伤的保护作用及机制。 方法： (1)以hk-2为研究对象。 (2)以窒息后第一天2...
- 熊涛
- 关键词：HK-2细胞损伤促红细胞生成素黄芪注射液
- 文献传递网络资源链接
- 银杏叶提取物对窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究银杏叶提取物（EGb）对新生儿窒息后血清攻击人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）损伤模型的影响。方法以人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）为研究对象，200ml／L窒息血清作为攻击因素。实验共分为两阶段，均设对照组、模型组和EGb干预组（EGb预处理24h）。第一阶段EGb干预组设立5个质量浓度亚组。观察三组细胞形态学，乳酸脱氢酶（LDH）漏出率和细胞存活（MTT法）变化。第二阶段以第一阶段选出的EGb最适质量浓度预处理细胞，观察三组NF-κB p65蛋白（免疫组化）和抑制亚基I-κBα（western blot）的变化。结果与对照组相比，模型组细胞形态发生改变，LDH漏出率增加，细胞活力降低（P〈0．05）；与模型组比较，EGb预处理组细胞形态明显得到改善，LDH漏出率降低，细胞活力增加（P〈0．05），在5—50mg／L保护效应逐渐增加，50mg／L时保护效果最强，而〉50mg／L时保护效应反而下降。与对照组相比，模型组细胞NF-κB p65蛋白表达明显增加，I-κBα量减少（P〈0．05）；与模型组比较，EGb干预组细胞NF-κB p65蛋白表达明显减少，I-κBα量增加（P〈0．05）。结论EGb具有减轻窒息血清所致HK-2细胞损伤的作用，其作用可能与抑制窒息血清所致NF—κB激活有关。
- 熊涛董文斌王明勇邓存良
- 关键词：银杏叶提取物窒息血清肾损伤
- 促红细胞生成素对新生儿窒息后血清诱导HK-2细胞 Omi/HtrA2、caspase-3表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)Omi/HtrA2、caspase-3表达的影响。方法:以HK-2为研究对象,分为对照组、窒息组、EPO干预组、EPO+5-HD(5-Hydroxydecanoic acid sodium salt,5-羟葵酸盐)干预组。以200 ml/L窒息后24 h血清作为攻击浓度。观察各组细胞形态,采用免疫组化法检测细胞Omi/HtrA2、caspase-3的表达。结果:与对照组相比,窒息组细胞形态变化显著,Omi/HtrA2、caspase-3表达明显增加;而与窒息组比较,EPO组细胞形态明显改善,Omi/HtrA2、caspase-3表达明显减少;加入5-HD后,EPO的保护作用被抑制。各组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:EPO可减少新生儿窒息后血清诱导的HK-2细胞内Omi/HtrA2、caspase-3表达。
- 邓刚董文斌李清平雷小平熊涛邓存良陈枫
- 关键词：促红细胞生成素新生儿窒息血清OMI/HTRA2
- 二氮嗪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤时线粒体凋亡途径的影响被引量：13
- 2010年
- 目的研究二氮嗪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）损伤时线粒体凋亡途径的影响。方法取培养好的HK-2细胞，接种于6孔板中，分为对照组、窒息组、二氮嗪组。以体积分数为20％的新生儿窒息后24h血清作为攻击血清；以终浓度100mol／L的二氮嗪进行干预。采用免疫组化法检测细胞内天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达；激光共聚焦显微镜下观察间接免疫荧光双染色Omi／HtrA2在细胞内的转位和线粒体膜电位的变化。结果与对照组相比，窒息组HK-2细胞内caspase-3表达的吸光度（A）值明显增加（25．19±3．33比13．63±1．89，P〈0．01），Omi／HtrA2转位率明显升高[（56．01±5．30）％比（37．59±5．60）％，P〈o．01]，线粒体膜红／绿荧光强度比值明显降低（o．79士1．42比1．82±0．23，P〈0．01）；与窒息组相比，二氮嗪组HK-2细胞caspase-3表达的4值（20．17±2．19）明显降低，Omi／HtrA2转位率（（46．91±2．70）％]明显降低，线粒体膜红／绿荧光强度比值（1．47±0．14）明显增加，但均未恢复至对照组水平（均P〈0．01）。结论二氮嗪通过减少Omi／HtrA2在胞内转位、减少caspase-3表达、稳定线粒体膜电位，从而明显减轻新生儿窒息后血清诱导的HK-2细胞损伤。
- 刘喜娟董文斌李清平雷小平翟雪松熊涛邓存良陈枫
- 关键词：窒息血清二氮嗪OMI/HTRA2
- 促红细胞生成素对窒息新生儿血清诱导人肾小管细胞TLR4/MyD88表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)TLR4/MyD88(Toll-like receptors 4/myeloid differentiation factor 88)表达的影响。方法将HK-2分为对照组、窒息组、EPO组,每组12份,分别检测TLR4和MyD88表达情况。对照组加入DMEM/F12培养液,窒息组加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液,EPO组加入含50 IU/ml的EPO培养液预处理后再加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液。其余培养条件3个实验组完全相同,即在37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养24 h后,应用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测各组细胞TLR4特异性荧光抗体阳性结合率;免疫组织化学法(SP法)检测各组细胞MyD88表达情况。结果与对照组比较,窒息组细胞形态变化显著,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显增加;与窒息组比较,EPO组细胞形态明显改善,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EPO可减少新生儿窒息后血清诱导的人肾小管上皮细胞TLR4/MyD88的表达。
- 孙凤杰董文斌李清平翟雪松雷小平熊涛陈枫
- 关键词：促红细胞生成素新生儿窒息肾损伤
- 黄芪注射液对新生儿窒息后血清诱导人肾小管细胞损伤信号机制的影响被引量：5
- 2010年
- 目的从细胞蛋白水平和分子水平研究黄芪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2细胞株)损伤的信号传导机制的影响〔是否通过激活核因子κB(NF-κB)信号途径〕。方法以HK-2细胞株为研究对象,以20%窒息血清作为攻击因素,攻击前分为空白对照组和黄芪预处理组,在攻击后15min,1、2 h分为相应时间的血清攻击组和黄芪预处理组后攻击组。通过激光共聚焦显微镜观察间接免疫荧光染色后NF-κB核转位以及免疫印迹(Western blot)观测NF-κB抑制亚基I-κBα量的变化。结果攻击前与空白对照组比较,黄芪预处理组NF-κB核转位和I-κBα量无改变;而攻击后各组与空白组对照组比较,NF-κB核转位显著增加和I-κBα量显著减少,以攻击后1 h最明显;各时点黄芪预处理组后攻击组与空白攻击组比较,NF-κB核转位显著减少和I-κBα量显著增加。结论黄芪预处理能够抑制窒息后血清所致后续NF-κB激活。
- 熊涛董文斌王明勇邓存良
- 关键词：黄芪注射液新生儿窒息后血清NF-ΚB途径
